羊的人工受精技术

羊的人工受精技术人工授精技术可分两类三种方法：第一类为液态精液人工授精技 术，又可分为二种方法，鲜精或1 ： 24低倍稀释精液人工授精技 术，一只公羊一年可配母羊5001000只以上，比用公羊本交提高 1020 倍以上。用这种方法，将采出的精液不稀释或低倍稀释，立 即给母羊输精，它适用于母羊季节性发情较明显，而且数量较多的地 区。精液1：2050,高倍稀释人工授精技术，一只公羊一年可配 种母羊10000只以上，比本交提高200倍以上。如江苏省海门市，地 处长江三角洲，交通便利，多年来，利用这一技术，全市只有一个改 良站制作高倍稀释精液，每乡镇设立输精点，实行统一供精，一只公 羊每年配种母羊1000015000只，精期受胎率可达90%。液态精液 如果组织得不好，或在山区及交通不便而母羊较少的地区，会出现精 液用不完而浪费的现象。降低了精液的利用率。第二类为冷冻精液人 工授精技术，可把公羊的精液常年冷冻贮存起来，在任何地方、时间 都可使用。如制作颗粒冷冻精液，一只公羊一年所采出的精液可冷冻 1000020000粒颗粒，可配母羊25005000只。精液用多少可解冻 多少，不会造成浪费。但受胎率较低，高者在 50%以上，低的只有 30%40%，其成本高，效果较差。现将具体操作技术分述如下：一、采精前的准备1. 种公羊采精调教般说，公羊采精是较容易的事情，但有些波尔山羊公羊，尤其 是初次参加配种的公羊，就不太容易采出精液来，可采取以下措 施： .同圈法：将不会爬跨的公羊和若干只发情母羊关在一起过几 夜，或与母羊混群饲养几天后公羊便开始爬跨。 .诱导法：在其他公羊配种或采精时，让被调教公羊站在一旁 观看，然后诱导它爬跨。 .按摩睾丸：在调教期每日定时按摩睾丸1015分钟，或用冷 水湿布擦睾丸，经几天后则会提高公羊性欲。 .药物刺激：对性欲差的公羊，隔日每只注射丙睾丸素12毫 升，连注射3 次后可使公羊爬跨。 .将发情母羊阴道沾液或尿液涂在公羊鼻端，也可刺激公羊性 欲。 .用发情母羊做台羊。 .调整饲料，改善饲养管理，这是根本措施，若气候炎热时， 应进行夜牧。2. 器械洗涤和消毒 人工授精所用的器械在每次使用前必须消毒，使用后要立即洗 涤。新的金属器械要先擦去油渍后洗涤。方法是：先用清水冲去残留 的精液或灰尘，再用少量洗衣粉洗涤，然后用清水冲去残留的洗衣粉， 最后用蒸馏水冲洗1 2次。(1).玻璃器皿消毒：将洗净后的玻璃器皿倒扣在网篮内，让剩余 水流出后，再放入烘箱，在115C下消毒30分钟。可用消毒杯柜或 碗柜消毒，价格便宜、省电。消毒后的器皿透明，无任何污渍，才能 使用，否则要重新洗涤、消毒。（2）.开腔器、温度计、镊子、磁盘等消毒：洗净、干燥后，在使 用前 1.5小时，用75%液精棉球擦试消毒。3. 假阴道的按装、洗涤和消毒 先把假阴道内胎（光面向里）放在外壳里边，把长出的部分（两头相 等）反转套在外壳上。固定好的内胎松紧适中、匀称、平正、不起皱 折和扭转。装好以后，在洗衣粉水中，用刷子刷去粘在内胎外壳上的 污物，再用清水冲去洗衣粉，最后用蒸馏水冲洗内胎12次，自然 干燥。在采精前 1.5 小时，用 75%酒精棉球消毒内胎（先里后外）待用。附：配制 75%酒精，用购买的医用酒精，一般为 95%浓度，取 其 79 毫升，加蒸馏水 21 毫升即为 75%浓度的酒精。二、采精1. 选择发情好的健康母羊作台羊，后躯应擦干净，头部固定在采 精架上（架子自制，离地发情通一个羊体高）。训练好的公羊，可不用 发情母羊作台羊，还可用公羊作台羊、假台羊等都能采出精液来。2. 种公羊在采精前，用湿布将包皮周围擦干净。3. 假阴道的准备：将消毒过的，酒精完全挥发后的内胎，用生理 盐水棉球或稀释液棉球从里到外的擦试，在假阴道一端扣上消毒过并 用生理盐水或稀液冲洗后甩干的集精瓶（高温低于25C时，集精瓶夹 层内要注入30C35C温水）。在外売中部生水孔注入150毫升左右 的50C55C温水，拧上气卡塞，套上双连球打气，使假阴道的采 精口形成三角形，并好气卡。最后把消毒好的温度计插入假阴道内测 温，温度在39C42C为宜、在假阴道内胎的前1/3，涂抹稀释液或 生理盐水作润滑剂（可不用凡士林，经多年实践不用任何润滑剂，不 影响公羊射精）。就可立即用于采精。4. 采精操作采精员蹲在台羊右侧后方，右手握假阴道，气卡塞向下，靠在台 羊臀部，假阴道和地面约呈 35 度角。当公羊爬跨、伸出阴茎时，左 手轻托阴茎包皮，迅速地将阴茎导入假阴道内，公羊射精动作很快， 发现抬头、挺腰、前冲，表示射精完毕，全过程只有几秒钟。随着公 羊从台羊身上滑下时，将假阴道取下，立即使集精瓶的一端向下坚立， 打开气卡活塞，放气卡取下集精瓶（不要让假阴道内水流入精液，外 壳有水要擦干），送操作室检查。采精时，必须高度集中，动作敏捷、 做到稳、准、快。5. 种公羊每天可采精12次，采35 天，休息一天。必要时每 天采 34 次。二次采精后，让公羊休息2 小时后，再进行第三次采 精。三、精液品质检查 精液品质检查项目很多，这里只介绍几种常用的项目 .肉眼观察：正常精液为乳白色，无味或略带腥味。凡带有腐 败味，出现红色、褐色、绿色的精液均不可用于输精。公山羊正常的 射精量范围是0.52.0毫升，平均为 1.0毫升。 .精子活率检查在载玻片上滴原精液或稀释后的精液1滴，加 盖玻片，在38C显微镜温度下（可按显微镜大小，自制保温箱，内装 40 瓦灯泡 1 只，既照明又保温）检查。精子运行方式：有直线前进运 动，回旋运动和摆动三种。评定精子活率以直线前进运动精子百分率 为依据，通常是用十级评分法。大约有 80%的精子做直线前进运动的 评为 0.8，有 60%精子做直线前进运动的为 0.6，依次类推。山羊原精 液活率一般可达 0.8 以上。但新引进的波尔山羊第一年使用活率往往 较差,原精活率只有 0.6,第二年就提高了。在检查（评定）精子活率时，要多看几个视野，并上下扭动显微镜 细螺旋，观察上、中、下三层液层的精子运动情况，才能较精确的评 出精子的活率。 .密度检查 估测法：在检查精子活率的同时进行精子密度的估测。在显微镜下根据精子稠密程度的不同。将精子密度评为“密”、“中”、“稀”三级、“密”级为精子间空隙不 足一个精子长度，“中”级为精子间有12个精子长度空隙，“稀”级 为精子间空隙超过 2 个精子长度以上， “稀”级不可用于输精。精小计数法：用血细胞计算板较精确的计算出每毫升精液中的精 子数，在精液高倍稀释时，要以精子数和精子活率来计算出精液稀释 倍数。计算方法是：用红细胞吸管、取原精液至 0.5 刻度处，再吸入 3%的氯化钠溶液至 101 刻度处，将原精液稀释 200 倍。以母指及食 指分别按吸管的两端摇均，然后弄去吸管前数滴，将吸管尖端放在计 算板与盖玻片之间的空隙边缘，使吸管中的精液流入计算室 （高 0.1 毫米），充满其中。计算板中央用刻线分成25个正方形大格，共由 400 个小方格组成，面积为1 平方毫米。在200、400倍显微镜下数出五 个大方格（四角各一个，再加中央一个大方格，共 80 个小方格）内的 精小数。计算时以精子头部为准，位于大方格四边线条上的精子，只 数相邻两边的精子，避免重复。数出四个大方格的精子总数后加7 个。 即为 1 毫升原精液的精子数。每毫升山羊精液中含精子数为1050亿，平均为30亿。精子计 数可1015天进行1次。有条件的地方可用密度仪器测定。四、液态精液稀释配方与配制1. 精液低倍稀释的稀释液，在精液采出后，原精数量不够时，可 作低倍稀释，密度仪器测定。满足需要，并在短时间内使用，稀释液 配方可简单些。如生理盐水；奶类稀释液：用鲜牛、羊奶，水浴92C 95C消毒15分钟，冷却去奶皮后即可使用。凡用于高倍稀释精液的稀 释液,都可作低倍稀释用。2. 精液高倍稀释的稀释液，不但是为了扩大精液量，而要延长精 子的保存时间，配方很多，现介绍2个稀释液。（1）葡萄糖3克，柠蒙酸钠1.4克，EDTA（乙二胺四乙酸二钠）0.4 克，加蒸馏水至100毫升，溶解后水浴煮沸消毒20分钟，冷却后加 青霉素10万单位，链霉素0.1克，若再加1020毫升卵黄，可延长 精子存活时间。（2）葡萄糖5.2克、乳糖2.0克、柠檬酸钠0.3克，EDTA0.07 克, 三墓 0.05 克，蒸馏水100 毫升，溶解后煮沸消毒20 分钟，冷却后加 庞庆大霉素1 万单位，卵黄5 毫升。五、液态精液稀释原精液活率在0.6 以上万可用于稀释输精。1. 精液低倍稀释，原精液量够输精时，可不必再稀释，可以直接 用原精直接输精。不够时按需要量作1 ： 24倍稀释，要把稀释液加 温到30C，再把它缓慢加到原精液中，摇匀后即可使用。2. 精液高倍稀释，要以精子数、输精剂量、每一剂量中含有1000 万个前进运动精子数，结合下午最后输精时间的精子活率，来计算出 精液稀释比例，在30C下稀释（方法同前）。六、分装、保存和运输 精液低倍稀释，就近输精，把它放在小瓶内，不需降温保存，短 时间用毕。1. 分装保存（1）小瓶中保存；把高倍稀释清液，按需要量（数个输精剂量装入 小瓶，盖好盖，用蜡封口，包裹纱布，套上塑料袋，放在装有冰块的 保温瓶（或保存箱）中保存，保存温度为0C5C。（2）塑料管中保存：作者等把精液以1： 40倍稀释，以0.5毫升为 一个输精剂量，注入饮料塑料吸管内（剪成20厘米长，紫外线消毒）， 两端用塑料封口机封口，保存在自制的泡沫塑料的保存箱内 （箱底放 冻好的冰袋，再放泡沫塑料隔板，把精液管用纱布包好，放在隔板上 面，固定好）盖上盖子，保存温度大多在4C7C,最高到9C。精 液保存 10 小时内使用，这种方法，可不用输精器了，经济实用。2.运输不论那种包装，精液必须固定好，尽可能减轻振动。若用摩托车 送精液，要把精液箱(或保温瓶)放在背包中，背在身上。若乘汽车送 精液，最好把它抱在身上。七、冷冻精液制作技术制作冷冻精液，要有很多设备，好在各省、区都有精液冷冻站， 可用它来兼冻波尔山羊精液，不需增加设备，有的站已经开始冷冻波 尔山羊精液，并取得较好的效果。作者等研究成功的80 年代在北京 市门头沟区冷冻绒山羊精液，获得情期受胎率 73%的好结果，现介绍 给大家，供参考。1.稀释液配方与配制I液 葡萄糖3克、柠檬酸钠3克，加蒸馏水至100毫升，溶解 后，水浴煮沸消毒20分钟，冷却后加青霉素10万单位，链霉素0.1 克，取80毫升加卵黄20毫升。II液取I液44毫升，加甘油6毫升。2.精液冷冻制作采出的精液，检查活率在0.6以上者即可冷冻，在30C下用I液 (30C)进行1 ： 1.5倍稀释，包上8层纱布放在4C冰箱中预冷降温2 小时，在4C下加与I液等量的含甘油的II液，摇匀，最终稀释比例 为1：3倍稀释，立即在氟板上滴冻成0.1毫升的颗粒。取本稀释液 I液94毫升，加甘油6毫升，合成一液，就可以冷冻细管精液。八、母羊发情鉴定1.以母羊发情外部表现来判断母羊发情本地母山羊发情外部表现较明显，发情时发出叫声，食欲减退， 兴奋不安，对外界刺激反应敏感，摇头摆尾，有交配欲，喜欢接近公 羊，在公羊追赶爬跨时常站立不动，让公羊交配；阴门肿大，流出粘 液。从母羊发情的外部表现来判断母羊是否发情是比较容易的。但养 羊户往往不注意，就不能确知母羊的发情开始时间，给适时输精造成 困难。2.试精用试精公羊试情，能准确找出发情母羊，做到适时输精。最简便 的方法是，在试情前将公羊腹部带兜上试情布（长4045厘米，宽 3540厘米，四角缝上2530厘米长的带子），每日早晨一次或早晚 各一次将公羊放入母羊群中试情。当母羊接受公羊爬跨，站立不动， 或母羊围着公羊旋转，并不断摇尾，都是母羊发情的表现，及时把它 抓出，待配。3. 试情公羊选择和饲养管理试情公羊必须选择体质结实、健康无病，性欲旺盛，动作灵敏的 15岁公羊。试情公羊与母羊的比例以1 ： 3040为宜。在配种前 一个月驱虫，加强饲养管理，除放牧采食或舍饲喂草外，每天补饲 0.20.3 公斤混合精料。每隔 1015 天，给试情公羊排精一次，增 强性欲。九、输精1. 输精时间适时输精，对提高母羊的受胎率十分重要。山羊的发情持续时间 为2448小时。排卵时间一般多在发情后期3040小时。因此，比 较适宜的输精时间应在发情中期后（即发情后1216小时）。如以母 羊外部表现来确定母羊发情的，若上午开始发情的母羊，下午与次日 上午各输精 1 次；下午和傍晚开始发情的母羊，在次日上下午各输精 1 次。每天早晨 1 次试情的，可在上下午各输精 1 次。 2 次输精间隔 810 小时为好，至少不低于6 小时。若每天早晚各 1 次试情的，其 输精时间与以母羊外部表现来确定母羊发情相同。如母羊继续发情， 可再行输精 1 次。2. 母羊保定本文介绍一种不需输精架的倒立保定法，它没有场地限制，任何 地方都可输精。保定人将母羊头夹紧在两腿之间，两手抓住母羊后腿， 将其提到腹部，保定好不让羊动，母羊成倒立状。用温布把母羊外阴 部擦干净，即待输精3. 输精方法（1）.子宫颈口内输精：将经消毒后在 1%氯化钠溶液浸涮过的开膣 器装上照明灯（可自制），轻缓地插入阴道，打开阴道，找到子宫颈口， 将吸有精液的输精器通过开膣器插入子宫颈口内，深度约 1 厘米左 右。稍退开膣器，输入精液，先把输精器退出，后退出开膣器。进行 下只羊输精时，把开膣器放在清水中，用布洗去粘在上面的阴道粘液 和污物，擦干后再在 1%氯化钠溶液浸涮过；用生理盐水棉球或稀释 液棉球，将输精器上粘的粘液，污物自口向后擦去。（2）.阴输精：将装有精液的塑料管从保存箱中取出（需多少支取多 少支，余下精液仍盖好），放在室温中升温23分钟后，将管子的一 端封口剪开，挤 1 小滴镜检活率合格后，将剪开的一端从母羊阴门向 阴道深部缓慢插入，到有阻力时停止，再剪去上端封口，精液自然流 入阴道底部，拔出管子，把母羊轻轻放下，输精完毕，再进行下只母 羊输精。装在小瓶中保存的高倍稀释精液，要用输精器吸入后再输精 （余 下精液仍在05C下保存），可作子宫颈口内或阴道输精。液态精液 情期受胎率方， 80%以上。有人做过试验，阴道输精的情期受胎率比 子宫颈口内输精的降低不到 2%。所以说情期液态精液可以阴道输精， 而且塑料管又可代替输精器，便于推广应用。冷冻精液必须进行子宫 颈口内输精，否则会降低受胎率。有条件用腹腔镜子宫角内输精，能 使冷冻精液受胎率提高。4. 输精量原精输精每只羊每次输精 0.050.1 毫升，低倍稀释为 0.10.2 毫升，高倍稀释为 0.20.5 毫升，冷冻精液为 0.2 毫升以上。5. 冷冻精液解冻解冻好坏对解冻后活率有很大影响。本人采用40C水温解冻颗 粒精液，先把小试管用维生素B12（每支含0.5毫克）冲洗一下，留一 点B12,并快速在40C水中摇动至2/3融化，取出试管继续速摇至全 部融，解冻后活率较好，可试试。 另外，建议做一个泡沫塑料 小盒，倒上液氮，再把冷冻精液袋放入氮液中，这样可避免未解冻的 颗粒精液，因升温又入液氮降温，影响活率。十、所需器材、药品、用品、表格1.所需器材、药品、用品所需物品大部分已在文章中提到了。用于配制稀释液的药品、试 剂：如葡萄糖要一水的、柠檬酸钠、EDTA（乙二胺四乙酸二钠）都要 分析纯的，青、链霉素不要过期的，卵黄需新鲜鸡蛋，要用不加水的 鲜奶。假阴道内胎，玻璃器皿易破损的物品要多准备一些。显微镜保 温箱、开膣器照明灯、精液保存箱等能自己做的尽可能自己做，在实 践中要有所创新。如要开展冷冻精液输精，要配备好液氮罐。2. 表格有种公羊精液品质检查表；母羊配种记录表；精液使用登记表， 及日常事务记录等，各项记录必须按时、准确填写。是为了统计分析， 总结经验，改进工作。十一、建立人工授精站和输精点地处平川的，可象江苏省海门市那样全市就改良站制作高倍稀释 精液，负责统一供精，每个镇兽医站设一个输精点，负责农户母羊输 精。地处山区的，可划片建立人工授精站，全县可建23个人工授 精站，在乡镇或母羊多的村设输精点。若采用冷冻精液输精，县里又 无精液冷冻设备，人工授精站可统一购买冷冻精液，转给各乡镇输精 点，每点配备液氮罐，由人工授精站定期到各输精点添加液氮。有条 件地地方也可购置冷冻精液设备，饲养波尔山羊公羊，自己制作冷冻 精液，也是可以的。但不能提倡，因为我国现有冷冻精液设备，已够 用的了。还可在配种季节，季节性的集中母羊，建立短期的人工授精 站，采用鲜精或低倍稀释精液输精，到配种季节末结束。各地可根据 具体情况，采用、创新。1.建立人工授精站的条件和基本建设人工授精站应建立在背风、向阳、干燥、有水源、牧草地面积大 或有较多的农田，无疾病流行史，交通便，母羊数量多，又是一县的 中心地带，这样便于每天送或取精液，因为高倍稀释精液，当天精液 只能当天使用，第二天使用就要降低受胎率，就得天天取送精液，设 在边远地区就不方便了。人工授精站设有：采精室（兼作输精室）、精 液处理室（要有顶棚）、公羊圈舍、母羊圈、饲料间、兽医室、工作人 员宿舍等。2.建立输精点的条件设在母羊较集中，交通较方便的地方，把点设在乡、镇兽医站也 可以，不论是用摩托车还是乘公共汽车取或送精液，在上午10 时前 精液必须到各输精点，这样单程不能超过2 小时，山区最远点距人工 授精站2030公里，平川可远到50公里以外。各地可根据当地的具 体条件来建点。输精点设有：输精室、母羊舍（供发情母羊过夜）、工 作人员宿舍等。