菌落总数的测定-11-29菌落计数课件

酱油中菌落总数的测定菌落计数、计算与报告复习提问 1、菌落总数的测定步骤 2、测定酱油中菌落总数时稀释度选择的原则是什么？3、本次酱油中菌落总数测定实验的设计？样品制备样品制备10倍梯度稀释倍梯度稀释接种接种倒平板倒平板倒置培养倒置培养菌落计数菌落计数报告报告菌菌落落总总数数测测定定步步骤骤菌落总数计算菌落总数计算表1酱油中菌落总数的测定结果与报告稀释度 10-110-210-3空白菌落总数报告平板1平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数计算计算方式方式平板2平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平均稀释度稀释度菌落数菌落数稀释度稀释度菌落数菌落数稀释度稀释度菌落数菌落数主要内容 一、平板菌落计数的原则和方法 二、各组进行菌落计数，并填表 三、菌落总数计算方法 四、学生练习计算方法 五、报告方法 六、各组进行报告一、平板菌落计数的原则与方法（一）原则1、平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用2、若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可以计算半个平板后乘以2，以代表一个平板的菌落数3、若菌落分布均匀，300以下的平板直接进行菌落计数，大于300的可记为多不可计。4、当平板上有链状菌落生长时，且无明显界限的，则每条链均应按一个菌落计算。不可计数不可计数不可计数不可计数64图图1 1、菌落计数原则、菌落计数原则（二）菌落计数方法1、肉眼观察，记号笔点数，300以下的记录具体数据；300以上的可以不计数，写“多不可计”。2、多，密，且均匀，可以分四个小格，数一个小格，乘以4。3、可以使用放大镜观察。图2、菌落计数方法二、各组进行菌落计数，并填表稀释度 10-110-210-3空白菌落总数报告平板1平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板平板菌落菌落计数计数平板2平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板菌平板菌落计数落计数平板平板菌落菌落计数计数平均三、稀释度的菌落数计算1、若两个平板均为“无法计数”，则填“无法计数”。2、若一个平板“无法计数”，则用另外一个平板菌落数代表该稀释度菌落数。3、若两个平板都有具体数据，则求平均，用整数表示。三、稀释度菌落数的计算稀释度 例110-1例210-2例310-3例410-4菌落总数报告平板1无法计无法计数数无法计无法计数数无法计无法计数数28平板2无法计无法计数数多不可多不可计计28827平均无法无法计数计数多不多不可计可计28828 稀释度：原溶液被冲淡的程度。稀释倍数：溶液被稀释的倍数。例如：稀释度为10-1和10-2，即1:10,1:100 稀释倍数依次是10倍，100倍。四、菌落总数的计算方法稀释度高稀释度高 1、选择稀释度菌落数在30300之间的，若只有一个，则用该稀释度菌落数 2、若所有稀释度的平板上菌落数，则对的平板进行计数，结果按平均菌落数乘以计算。3、若所有稀释度的平板菌落数，则应按的平板菌落数计算。四、菌落总数的计算方法 4、若所有稀释度平板生长，则以小于1乘以计算。5、若所有稀释度的平板菌落数一部分小于30CFU或大于300CFU时，则以的平均菌落数乘以稀释倍数计算。试样试样例次例次稀释度稀释度选定计数选定计数稀释度稀释度菌落总数菌落总数/(CFU/mL)/(CFU/mL)1010-2-21010-3-31010-4-41 1平平均均菌菌落落数数380380525218181010-3-352000520002 2无法无法计数计数5685683123121010-4-4312000031200003 3262612125 51010-2-2260026004 40 00 00 01010-2-21001005 531531529292 21010-3-329000290006 6多不多不可计可计28728734341010-3-3，1010-4-4表表2菌落总数计算方法汇总表菌落总数计算方法汇总表6、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按如下公式计算：N=C/（n1+0.1n2）d（1)式中：N 样品中菌落数；C 适宜计数范围内平板菌落数之和；nl 第一个适宜稀释度平板数；n2 第二个适宜稀释度平板数；d 稀释因子（第一稀释度）。稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板128835？平板228633平均例例6、菌落总数计数、菌落总数计数dnnC211.0N=31021.023335286288=1816=2918181728734五、报告原则 1、菌落数小于100CFU时，按照“四舍五入”原则修约，以整数报告。2、菌落数大于或等于100CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后而用0代替位数；也可以用10的指数形式来表示，按照“四舍五入”修约后，采用两位有效数字。五、报告原则 3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。4、若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。5、单位：称重的样品，用CFU/g；量取体积的样品，用CFU/ml。CFU菌落形成单位稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板1多不多不可计可计351834.53535平板2多不多不可计可计3416平均多不多不可计可计3517菌落总数报告菌落总数报告 例例1稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板12883518291818平板22863316菌落总数报告菌落总数报告 例例2dnnC211.0N=31021.023335286288=291818290000稀释度10-310-410-5菌落总数CFU/ml报告CFU/ml平板1无法无法计数计数无法无法计数计数无法无法计数计数菌落蔓延菌落蔓延平板2无法无法计数计数无法无法计数计数无法无法计数计数平均无法无法计数计数无法无法计数计数无法无法计数计数菌落总数报告菌落总数报告 例例3稀释度 10-110-210-3空白菌落总数报告平板12平板21平均菌落总数报告菌落总数报告 例例4检验结检验结果无效果无效六、菌落计数方法练习