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紫菀、蜜紫菀的祛痰作用,12中药本 杨梦尧 苏瑾 李志统 苗书杰 郑炜,1.了解酚红从呼吸道排泄的方法。 2.观察紫菀及其炮制品种蜜紫菀在小鼠祛痰的作用上的优劣。,实验目的,小鼠腹腔注射酚红后,酚红可部分经支气管粘液腺分泌入气道,有祛痰作用的药物在使支气管分泌液增加,因而可从药物对气管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰作用。酚红在碱性溶液中呈红色,故以碱液清洗气管后可用比色法(分光光度计)测出酚红的排泌量。从而得出药物的祛痰作用。,实验原理,材料与动物,器材:注射器、小试管、试管架、手术器材、蛙板、大头针、722分光光度计 药品:100%紫菀煎液、 100%蜜紫菀煎液、0.5%酚红溶液、5%NaHCO3、生理盐水。 动物:小白鼠12只(体重1822g,雌雄各半),方法与步骤,1.取小鼠12只,随机分成3组,每组4只,禁食不禁水812h,第一组按0.2ml/10g体重灌胃100%紫菀煎液,第二组按0.2ml/10g体重灌胃100%蜜紫菀煎液,对照组给予同等剂量的生理盐水,45min后腹腔注射酚红0.5ml,15min后脱颈椎处死,仰位固定于蛙板上手术分离气管。 2.用1ml注射器吸取0.5mlNaHCO3,推注入气管内,反复连续推抽3次灌洗呼吸道,洗出液收集在试管中,按上述方法重复3次。 3.洗出液沉淀或离心,用722型分光光度计 (波长546nm),直接测浓度,计算祛痰指数,与对照组比较。,附注,1.小鼠呼吸道的分离与冲洗 将小鼠仰位固定于蛙板上,剪开颈前皮肤,分离气管,于喉头下将8号针头插入气管内约0.3cm,用丝线由气管下结扎固定后,用1ml注射器吸取5%NaHCO3 1ml,通过针头来回灌洗呼吸道3次,最后一次将灌洗液抽出注入试管中。按上述方法连续操作3次,冲洗共9次,收得灌洗液约3ml,置于试管中,静置或离心后取上清液,用分光光度计检测浓度,与对照组比较。 2.酚红标准液的配制 用电子天平准确称取一定量的酚红,以5%NaHCO3溶解,使每1ml含酚红1000g。然后依次稀释,配成每ml含1.0、3.0、5.0、10.0g,用722型分光光度计测定,取其中12个浓度作为标准测定管。,计算公式:,实验结果,祛痰指数(%)=,给药组浓度 对照组浓度,100%,实验结果,注意事项,给药至处死动物的时间必须准确。 解剖时,须将气管周围组织去除干净,气管段周围如果粘附有血液应立即用滤纸吸净。 呼吸道冲洗时,NaHCO3用量要准确,灌洗时动作要轻,以免穿破气管和肺脏,抽推速度也尽可能相同,并尽可能将洗液抽尽。,思考题,根据实验结果,比较中药紫菀及其炮制品种蜜紫菀化痰作用的强弱,试分析其原因。,
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