亿佰亿课件3妇科保健

阴道益生菌制剂及其应用阴道益生菌制剂及其应用大连医科大学微生态学研究所大连医科大学微生态学研究所大连亿佰亿生态产业发展有限公司大连亿佰亿生态产业发展有限公司康白康白 袁杰力袁杰力 左振军左振军 医学思想领域的革命医学思想领域的革命第一次革命：第一次革命：机械医学（治疗医学）机械医学（治疗医学）第二次革命：第二次革命：生物医学（预防医学）生物医学（预防医学）第三次革命：第三次革命：生态医学（保健医学）生态医学（保健医学）人类生存所面临的环境问题人类生存所面临的环境问题大环境大环境宏观生态宏观生态小环境小环境微观生态微观生态微生态学发展的历史回顾微生态学发展的历史回顾1681 leeuwenhoek1681 leeuwenhoek 直接镜检直接镜检1881 Koch 1881 Koch 纯培养技术纯培养技术1857 Paster1857 Paster 细菌发酵作用细菌发酵作用1886 Escheric1886 Escheric 发现大肠杆菌群发现大肠杆菌群,婴儿主导菌群婴儿主导菌群18184 45-5-1 19 91 16 6 梅挈梅挈尼尼克克夫夫斯斯基基 肠肠道菌道菌群有群有害害作用作用 1890 Dderlein1890 Dderlein 发现德氏乳杆菌，奠定阴道微生态学的基础发现德氏乳杆菌，奠定阴道微生态学的基础1899 Tisser1899 Tisser 发现双歧杆菌发现双歧杆菌 1900 Moro 1900 Moro 发现乳酸杆菌发现乳酸杆菌,研究肠菌群分布，提出相关理论研究肠菌群分布，提出相关理论1935 Eggerth1935 Eggerth 发现类杆菌发现类杆菌1945 Fleming 1945 Fleming 发现抗生素发现抗生素1945 Reynier1945 Reynier 无菌动物饲养成功（悉生动物学的提出）无菌动物饲养成功（悉生动物学的提出）1957 Haenel1957 Haenel 改进厌氧培养技术改进厌氧培养技术1960 Dubus1960 Dubus 原籍菌群与外籍菌群观点的引入原籍菌群与外籍菌群观点的引入20022002东京会议东京会议 正常微生物群是人（动物）生存必须的一个系统正常微生物群是人（动物）生存必须的一个系统 微生态学科的建立微生态学科的建立19771977年，由西德年，由西德的的VolkerRushVolkerRush首先提出：微观生态学，简称微生首先提出：微观生态学，简称微生态学态学 （microecologymicroecology）概念）概念19771977年，康白、魏曦提出：生态防治（菌群调整理论）年，康白、魏曦提出：生态防治（菌群调整理论）1979 Van der waaij1979 Van der waaij.提出：定植抗力理论提出：定植抗力理论1981 kangbai1981 kangbai 提出：生物夺氧理论提出：生物夺氧理论1985 Volker Rush1985 Volker Rush提出：微生态学是细胞水平或分子水平的生态提出：微生态学是细胞水平或分子水平的生态学学1988 Xiangjinmin1988 Xiangjinmin 提出：分子生态学概念提出：分子生态学概念微生态学研究的意义微生态学研究的意义微生态学是研究人体正常微生物群的结构功能、及其与宿主相互关微生态学是研究人体正常微生物群的结构功能、及其与宿主相互关系的学说系的学说正常微生物群是生命的重要组成部分正常微生物群是生命的重要组成部分正常微生物群能增强宿主的免疫功能，增加营养，帮助消化，拮抗正常微生物群能增强宿主的免疫功能，增加营养，帮助消化，拮抗致病菌的定植和入侵致病菌的定植和入侵正常菌群分布于全身各部位，其中阴道微生态是人体第二大的微生正常菌群分布于全身各部位，其中阴道微生态是人体第二大的微生态系统态系统人体微生态系统人体微生态系统人体正常菌群种类达人体正常菌群种类达500500余种余种数量达数量达100100万亿个（人体体细胞只万亿个（人体体细胞只 有有1010万亿个）万亿个）重量约重量约12711271克，相当于肝脏的重量克，相当于肝脏的重量 99.9%99.9%是以双歧杆菌和类杆菌为主是以双歧杆菌和类杆菌为主 的专性厌氧菌的专性厌氧菌 0.1%0.1%是以肠杆菌科细菌为主的兼性是以肠杆菌科细菌为主的兼性 厌氧菌厌氧菌正常菌群的定义正常菌群的定义在正常人、动物和植物的体表或体内通常有一层微生物存在，但在正常人、动物和植物的体表或体内通常有一层微生物存在，但并未引起不正常或致病现象。这一微生物层通常称为正常菌群。并未引起不正常或致病现象。这一微生物层通常称为正常菌群。是与其宿主在共同的历史进化过程中形成的微生态系统中的正常是与其宿主在共同的历史进化过程中形成的微生态系统中的正常微生物成员，即寄居在特定个体体内的非但无害而且有益的微生微生物成员，即寄居在特定个体体内的非但无害而且有益的微生物群落。物群落。人体的正常菌群以肠道最多，肠道菌群也最具有代表性。人体的正常菌群以肠道最多，肠道菌群也最具有代表性。健康人肠道菌生理性演替健康人肠道菌生理性演替肠道菌群的生理功能肠道菌群的生理功能肠道菌群在肠肝循环中起重要作用肠道菌群在肠肝循环中起重要作用肠道菌对营养代谢的影响肠道菌对营养代谢的影响肠道菌群的生物拮抗作用肠道菌群的生物拮抗作用肠道菌群的免疫防卫机制肠道菌群的免疫防卫机制肠道菌群与有毒物质的产生及清除肠道菌群与有毒物质的产生及清除阴道正常微生物群的构成阴道正常微生物群的构成主要常住菌有：主要包括乳杆菌、双歧杆菌、优杆菌、消化链球菌、主要常住菌有：主要包括乳杆菌、双歧杆菌、优杆菌、消化链球菌、葡萄球菌、链球菌、棒状杆菌、肠杆菌、丙酸杆菌、梭状芽胞杆菌、葡萄球菌、链球菌、棒状杆菌、肠杆菌、丙酸杆菌、梭状芽胞杆菌、支原体、类杆菌、韦荣氏小球菌、肠杆菌及需氧芽胞杆菌、酵母菌支原体、类杆菌、韦荣氏小球菌、肠杆菌及需氧芽胞杆菌、酵母菌及包括滴虫在内的等原生动物等成员。及包括滴虫在内的等原生动物等成员。优势菌中需氧菌和兼性厌氧菌的排列顺序是优势菌中需氧菌和兼性厌氧菌的排列顺序是:lactobacilluslactobacillus，Staphylococcus,Corynebacterium,Streptococcus,Garderella Staphylococcus,Corynebacterium,Streptococcus,Garderella vaginalisvaginalis.优势菌中专性厌氧菌的排列顺序是优势菌中专性厌氧菌的排列顺序是:Lactobacillus,Bacteroides,Peptostreptococcus,Fusobacterium,Lactobacillus,Bacteroides,Peptostreptococcus,Fusobacterium,VeillonellaVeillonella.阴道微生态生理学背景阴道微生态生理学背景阴道道微生物菌群是一具庞大复杂性的生态系统阴道道微生物菌群是一具庞大复杂性的生态系统10万亿个微生物万亿个微生物100种类型种类型 大部分是未知的大部分是未知的效果效果 健康提升健康提升潜在的副作用潜在的副作用微妙平衡微妙平衡可能被多样因素所扰乱可能被多样因素所扰乱阴道微生物菌群对健康是重要的阴道微生物菌群对健康是重要的健康妇女阴道生理及微生态演替健康妇女阴道生理及微生态演替特征特征怀孕期及新生儿期怀孕期及新生儿期青春期前青春期前青春期后青春期后闭经期闭经期雌激素水平雌激素水平+pH酸性酸性中性中性酸性酸性中性中性O-R电位电位上升上升下降下降上升上升下降下降糖原含量糖原含量+专性厌氧菌专性厌氧菌不利于其生长不利于其生长有利有利不利不利有利有利G-需氧菌需氧菌不利于其生长不利于其生长有利有利不利不利有利有利细菌总数细菌总数上升上升下降下降上升上升下降下降细菌总类细菌总类上升上升下降下降上升上升下降下降阴道微生态平衡是菌群特点阴道微生态平衡是菌群特点从总体上来说，专性厌氧菌的含菌量总数比需氧菌和兼性厌氧菌两者菌从总体上来说，专性厌氧菌的含菌量总数比需氧菌和兼性厌氧菌两者菌数总和要高出数总和要高出1010倍。专性厌氧菌中乳杆菌含量占优势。倍。专性厌氧菌中乳杆菌含量占优势。滴虫在正常妇女阴道亦有检出。临床特点为无症状带虫现象。滴虫在正常妇女阴道亦有检出。临床特点为无症状带虫现象。革兰氏阴性杆菌：如阴道嗜血杆菌，类杆菌和梭杆菌在健康妇女的分离革兰氏阴性杆菌：如阴道嗜血杆菌，类杆菌和梭杆菌在健康妇女的分离率为率为1440%1440%。这些菌与细菌性阴道病的发生有关。细菌性阴道病时这些菌比正常水这些菌与细菌性阴道病的发生有关。细菌性阴道病时这些菌比正常水平高平高100-1000100-1000倍。倍。阴道微生态平衡的影响因素阴道微生态平衡的影响因素环境环境宿主宿主微生物微生物 理化影响理化影响l 内分泌变化：内分泌变化：月经、妊娠、绝经月经、妊娠、绝经l 阴道损伤阴道损伤:分娩、手术、外力分娩、手术、外力l 免疫功能低下免疫功能低下:激素、免疫抑制剂、激素、免疫抑制剂、抗肿瘤药抗肿瘤药l 全身性疾病全身性疾病l 阴道不当冲洗阴道不当冲洗抗生素滥用抗生素滥用Lactic acid H2O2 VFA enzymesNH3、H2S Indole Phenol AminesnutrientsYYYYYMucosal immune system阴道正常菌菌群的作用阴道正常菌菌群的作用阴道微生态失调阴道微生态失调致致病病菌菌条件致病菌条件致病菌阴道乳杆菌在数量上处于绝对优势地位，是维持阴道微生态平衡阴道乳杆菌在数量上处于绝对优势地位，是维持阴道微生态平衡的前提和基础的前提和基础乳杆菌乳杆菌乳杆菌乳杆菌微生态平衡微生态平衡微生态失调微生态失调内源性感染内源性感染外源性外源性感染感染阴道菌群失调的生态防治阴道菌群失调的生态防治微生态防治是指顺应机体微生态系统的生态网络结构及规律，因势利微生态防治是指顺应机体微生态系统的生态网络结构及规律，因势利导，通过综合生态防治措施，改善宿主的微生态环境，重新建立微生导，通过综合生态防治措施，改善宿主的微生态环境，重新建立微生态平衡。态平衡。微生态防治的主要措施，原则上包括改善微生态环境；增强宿主的适微生态防治的主要措施，原则上包括改善微生态环境；增强宿主的适应性；合理、有效、短期的抗生素使用；提高宿主的定植抗力；使用应性；合理、有效、短期的抗生素使用；提高宿主的定植抗力；使用益生菌制剂微生态调节剂等。其中益生菌制剂是微生态防治过程中使益生菌制剂微生态调节剂等。其中益生菌制剂是微生态防治过程中使用的最有效手段和武器。用的最有效手段和武器。合理应用抗生素合理应用抗生素 抗生素的发现使人类与感染的斗争发生了抗生素的发现使人类与感染的斗争发生了质的飞跃，拯救了千万甚至上亿人的生命。质的飞跃，拯救了千万甚至上亿人的生命。但抗生素的广泛应用也给人们带来了沉痛但抗生素的广泛应用也给人们带来了沉痛的代价。抗生素在杀灭致病菌的同时，也杀灭的代价。抗生素在杀灭致病菌的同时，也杀灭了有益菌，造成菌群失调，更为严重的是抗生了有益菌，造成菌群失调，更为严重的是抗生素的应用使细菌产生耐药性及传播性，使得内素的应用使细菌产生耐药性及传播性，使得内源性感染增加并难以控制。源性感染增加并难以控制。1 1、尽量选用不干扰或少干扰机体定植抗力的抗生素、尽量选用不干扰或少干扰机体定植抗力的抗生素 2 2、应选择有针对性的窄谱抗生素，短疗程适当剂量使用、应选择有针对性的窄谱抗生素，短疗程适当剂量使用 3 3、尽量选用胃肠道外给药途径、尽量选用胃肠道外给药途径 4 4、在使用抗生素的同时使用益生菌制剂（边抗边调）、在使用抗生素的同时使用益生菌制剂（边抗边调）5 5、使用抗生素后应用益生菌调整（先扛后调）、使用抗生素后应用益生菌调整（先扛后调）合理应用抗生素原则合理应用抗生素原则 应用益生菌制剂应用益生菌制剂 益生菌制剂益生菌制剂能直接补充机体的正常菌群或选择性刺激能直接补充机体的正常菌群或选择性刺激正常菌群的生长繁殖，从而竞争性抑制潜在致病菌的过度正常菌群的生长繁殖，从而竞争性抑制潜在致病菌的过度生长及定植，提高肠道的定植抗力，防治细菌和生长及定植，提高肠道的定植抗力，防治细菌和/或内毒素或内毒素移位。又称移位。又称益生菌制剂的生态疗法。益生菌制剂的生态疗法。益生菌的定义益生菌的定义益生菌益生菌(Probiotics(Probiotics)又称生态制品、活菌制剂。又称生态制品、活菌制剂。19771977年年SpertSpert把益生菌描述为能促进肠道菌群平衡的微生物或促进物质。把益生菌描述为能促进肠道菌群平衡的微生物或促进物质。19891989年年，FullerFuller把益生菌定义为能够促进肠内菌群生态平衡，把益生菌定义为能够促进肠内菌群生态平衡，对宿主起有益作用的活的微生物制剂。对宿主起有益作用的活的微生物制剂。20022002年，益生菌是活的微生物，通过摄入充足的数量，对宿年，益生菌是活的微生物，通过摄入充足的数量，对宿主产生一种或多种特殊且经论证的功能性健康益处。主产生一种或多种特殊且经论证的功能性健康益处。（欧洲食品与饲料菌种协会（欧洲食品与饲料菌种协会 20022002）阴道益生菌制剂的作用机制阴道益生菌制剂的作用机制1 1、生物拮抗：阴道正常微生物群在种类和数量上正常的情况下，对外来的细、生物拮抗：阴道正常微生物群在种类和数量上正常的情况下，对外来的细菌或致病菌具有明显的拮抗作用，保护阴道菌群不受侵害，不受感染。菌或致病菌具有明显的拮抗作用，保护阴道菌群不受侵害，不受感染。2 2、刺激阴道粘膜细胞的活性：保持阴道粘膜健康状态和正常的分泌功能，提、刺激阴道粘膜细胞的活性：保持阴道粘膜健康状态和正常的分泌功能，提高性行为的效果。高性行为的效果。3 3、促进女性生殖系统的生长发育：女性生殖系统包括大小阴唇、阴蒂、阴道、促进女性生殖系统的生长发育：女性生殖系统包括大小阴唇、阴蒂、阴道、后穷窿、子宫颈、子宫内膜、输卵管及卵巢，所有这些部位的生长发育或其他后穷窿、子宫颈、子宫内膜、输卵管及卵巢，所有这些部位的生长发育或其他功能都与阴道正常微生物群有密切的联系，因为在菌群失调的情况下，整个生功能都与阴道正常微生物群有密切的联系，因为在菌群失调的情况下，整个生殖系统都会有器质性和功能性的变化。殖系统都会有器质性和功能性的变化。4 4、自净作用：阴道菌群有分解腐败物质及老废物的作用。异常分泌物如白带、自净作用：阴道菌群有分解腐败物质及老废物的作用。异常分泌物如白带、月经残余物、恶露及鱼腥味等异常气味都会被正常阴道菌群自净作用而清除。月经残余物、恶露及鱼腥味等异常气味都会被正常阴道菌群自净作用而清除。5 5、免疫调节：人体正常微生物群主要是肠道、呼吸道、口腔、皮肤及阴道的、免疫调节：人体正常微生物群主要是肠道、呼吸道、口腔、皮肤及阴道的菌群均具有免疫调节作用，使人体细胞免疫与体液免疫保持平衡状态，使人体菌群均具有免疫调节作用，使人体细胞免疫与体液免疫保持平衡状态，使人体“自稳机制自稳机制”（homoestasishomoestasis）正常运转起来。）正常运转起来。阴道益生菌生产菌株的筛选阴道益生菌生产菌株的筛选益生菌菌株的分离和选种益生菌菌株的分离和选种益生菌菌株的活性和活存能力益生菌菌株的活性和活存能力 对菌株生产性能的考察对菌株生产性能的考察益生菌对体内环境耐受能力益生菌对体内环境耐受能力黏附和定植能力的研究黏附和定植能力的研究抗微生物能力的研究抗微生物能力的研究健康效果健康效果国内治疗用益生菌制剂的状况国内治疗用益生菌制剂的状况阴道益生菌药用制剂阴道益生菌药用制剂德氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌。德氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌。阴道生态消毒剂阴道生态消毒剂双歧因子、含菌制剂、代谢产物、中药制剂双歧因子、含菌制剂、代谢产物、中药制剂阴道炎外用制剂的分类阴道炎外用制剂的分类抗生素制剂抗生素制剂微生态制剂微生态制剂中药制剂中药制剂原籍菌制剂原籍菌制剂共生菌制剂共生菌制剂生生物物放放大大作作用用强强活活菌菌定定植植时时间间长长生生物物拮拮抗抗作作用用强强治治疗疗安安全全性性更更高高体体内内繁繁殖殖受受限限制制存存在在条条件件致致病病性性亿佰亿健康护理液亿佰亿健康护理液粪肠球菌制剂粪肠球菌制剂活活菌菌停停留留时时间间短短主主要要与与乳乳杆杆菌菌共共生生起起效效理想阴道微生态制剂的判断标准理想阴道微生态制剂的判断标准阴道原籍菌制剂（乳杆菌制阴道原籍菌制剂（乳杆菌制剂）剂）所选菌株为无毒菌株所选菌株为无毒菌株单位活菌含量高单位活菌含量高制剂稳定性好制剂稳定性好剂型合理剂型合理价格低廉价格低廉阴道乳杆菌活菌制剂阴道乳杆菌活菌制剂早在早在19151915年年，就有人提倡用乳杆菌培养物进行膀胱灌洗治疗重度，就有人提倡用乳杆菌培养物进行膀胱灌洗治疗重度膀胱炎，并获得较好的疗效。膀胱炎，并获得较好的疗效。在抗生素时代之前在抗生素时代之前，不论是在民间或是在医疗界，使用乳杆菌培，不论是在民间或是在医疗界，使用乳杆菌培养物冲洗阴道法治疗急性淋菌性外阴阴道炎成功的例子是很多的。养物冲洗阴道法治疗急性淋菌性外阴阴道炎成功的例子是很多的。7070年代，年代，8080年代年代英国，美国等发达国家也相继有了关于使用乳英国，美国等发达国家也相继有了关于使用乳杆菌治疗阴道炎的报道。杆菌治疗阴道炎的报道。19781978年年德国报道用乳杆菌治疗滴虫性阴道炎，应用乳杆菌治疗一德国报道用乳杆菌治疗滴虫性阴道炎，应用乳杆菌治疗一年后年后96%96%再检查，再检查，92.5%92.5%临床完全治愈。临床完全治愈。近年来近年来，我国关于乳杆菌制剂治疗各种阴道炎的报道也较多。，我国关于乳杆菌制剂治疗各种阴道炎的报道也较多。19991999年北京协和医院用乳杆菌活菌胶囊治疗细菌性阴道炎与灭滴年北京协和医院用乳杆菌活菌胶囊治疗细菌性阴道炎与灭滴灵相比较。结果提示：乳杆菌活菌胶囊是治疗细菌性阴道病的安灵相比较。结果提示：乳杆菌活菌胶囊是治疗细菌性阴道病的安全有效药物，治疗效果肯定，与灭滴灵相比无显著性差异。全有效药物，治疗效果肯定，与灭滴灵相比无显著性差异。乳杆菌制剂在细菌性阴道病治乳杆菌制剂在细菌性阴道病治疗中的应用疗中的应用细菌性阴道病（细菌性阴道病（BV)BV)是阴道微生态环境内菌群与分泌物生化性质是阴道微生态环境内菌群与分泌物生化性质变化引起的常见阴道疾病，表现为正常阴道乳杆菌数量减少而代变化引起的常见阴道疾病，表现为正常阴道乳杆菌数量减少而代之以阴道加德纳氏菌等兼性厌氧菌、厌氧菌数量增加并伴随分泌之以阴道加德纳氏菌等兼性厌氧菌、厌氧菌数量增加并伴随分泌物物pHpH升高等重要生化成分变化的临床症候群。升高等重要生化成分变化的临床症候群。19151915年年newmennewmen提倡用乳杆菌培养物治疗重症膀胱炎。提倡用乳杆菌培养物治疗重症膀胱炎。19331933年用人利用年用人利用doderlleinsdoderlleins菌治疗外阴阴道炎。菌治疗外阴阴道炎。8080年代以后有大量利用乳杆菌治疗年代以后有大量利用乳杆菌治疗BVBV的实例。的实例。19991999年，中国第一个用于治疗年，中国第一个用于治疗BVBV的德氏乳杆菌制剂获国家新药证的德氏乳杆菌制剂获国家新药证书。书。乳杆菌新药研究的目的乳杆菌新药研究的目的阴道炎是妇女常见病、多发病，临床上常以抗生素治疗，但效阴道炎是妇女常见病、多发病，临床上常以抗生素治疗，但效果不理想。抗生素的应用本身即可引起菌群失调，致使此病迁果不理想。抗生素的应用本身即可引起菌群失调，致使此病迁延不愈，给患者带来巨大痛苦。延不愈，给患者带来巨大痛苦。从微生态学的角度出发，通过生态制剂调整疗法扶正和保护阴从微生态学的角度出发，通过生态制剂调整疗法扶正和保护阴道内的正常菌群的组成和比例，恢复其自然的抵抗外来菌侵扰道内的正常菌群的组成和比例，恢复其自然的抵抗外来菌侵扰的能力，促进其本身的自净作用是治疗此类疾病的一种方向。的能力，促进其本身的自净作用是治疗此类疾病的一种方向。本研究目的是调查妇女阴道的菌群情况、阐明阴道菌群与妇女本研究目的是调查妇女阴道的菌群情况、阐明阴道菌群与妇女阴道疾病的关系、开发出一种用于防治妇女阴道细菌病及阴道阴道疾病的关系、开发出一种用于防治妇女阴道细菌病及阴道菌群失调的微生态调节剂。菌群失调的微生态调节剂。研究成果的意义研究成果的意义把德氏乳杆菌乳酸亚种作为阴道益生菌制剂，从立题、实验设计、立项到微生把德氏乳杆菌乳酸亚种作为阴道益生菌制剂，从立题、实验设计、立项到微生物学、微生态学、药效学、药代动力学、生产工艺及临床学研究，国外虽有报物学、微生态学、药效学、药代动力学、生产工艺及临床学研究，国外虽有报导，但正式把乳杆菌作为国家级类新生物制品用于阴道病的治疗，这还是首次。导，但正式把乳杆菌作为国家级类新生物制品用于阴道病的治疗，这还是首次。该项研究对健康阴道的微群落及微生态系该项研究对健康阴道的微群落及微生态系(microecosystem(microecosystem)进行了比较全面和进行了比较全面和系统的研究。乳杆菌是阴道优势微种群，其他微种群如肠杆菌、葡萄球菌、链系统的研究。乳杆菌是阴道优势微种群，其他微种群如肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、酵母菌及支原体均为劣势种群，研究指出在妊娠的早期、中期及晚期，球菌、酵母菌及支原体均为劣势种群，研究指出在妊娠的早期、中期及晚期，阴道内的乳杆菌逐渐增加。阴道乳杆菌是妊娠过程中重要生理指标之一，并且阴道内的乳杆菌逐渐增加。阴道乳杆菌是妊娠过程中重要生理指标之一，并且是防御感染一个手段。本研究为阴道细菌病的防治提供理论指导是防御感染一个手段。本研究为阴道细菌病的防治提供理论指导 。本研究成功的分离出一株产乳酸和过氧化氢的德氏乳杆菌并阐明其防治阴道细本研究成功的分离出一株产乳酸和过氧化氢的德氏乳杆菌并阐明其防治阴道细菌病的作用机制。为乳杆菌在防治阴道疾病方面提供了新的实例。菌病的作用机制。为乳杆菌在防治阴道疾病方面提供了新的实例。本研究开发出一个用于治疗细菌性阴道炎、非特异性阴道炎或菌群失调性阴道本研究开发出一个用于治疗细菌性阴道炎、非特异性阴道炎或菌群失调性阴道炎及滴虫性阴道的国家生物制品新药。可大规模应用于临床为广大病人解除痛炎及滴虫性阴道的国家生物制品新药。可大规模应用于临床为广大病人解除痛苦并可产生巨大的社会和经济效益苦并可产生巨大的社会和经济效益 。国内外技术对比国内外技术对比 据本成果完成后查新结果表明国外虽据本成果完成后查新结果表明国外虽有多篇报导，但正式把德氏乳杆菌作为国有多篇报导，但正式把德氏乳杆菌作为国家级生物制品新药用于阴道病的治疗，这家级生物制品新药用于阴道病的治疗，这还是首次。国内有关微生态调节剂治疗阴还是首次。国内有关微生态调节剂治疗阴道细菌病的研究报道多数是本研究成果的道细菌病的研究报道多数是本研究成果的报道。少数单位也在开展此方面的研究。报道。少数单位也在开展此方面的研究。20092009年本制剂研究目前已获国家发明专利年本制剂研究目前已获国家发明专利。研究的简要过程研究的简要过程对不同年龄健康妇女的正常阴道菌群进行定性及定量分析对不同年龄健康妇女的正常阴道菌群进行定性及定量分析;对各种确诊的阴道炎患者阴道菌群进行定性与定量分析对各种确诊的阴道炎患者阴道菌群进行定性与定量分析;由健康阴道分离优势细菌种群，筛选生产菌种进行菌种分离、鉴由健康阴道分离优势细菌种群，筛选生产菌种进行菌种分离、鉴定、生物特性、代谢产物、耐药性、代谢物、过氧化氢产生及质定、生物特性、代谢产物、耐药性、代谢物、过氧化氢产生及质粒检测等粒检测等;微生物学研究包括粘附、定植、生物拮抗、模型试验、安全试验、微生物学研究包括粘附、定植、生物拮抗、模型试验、安全试验、稳定试验和刺激试验稳定试验和刺激试验;微生态调节剂的生产工艺研究包括种子、发酵、冻干和制剂产品微生态调节剂的生产工艺研究包括种子、发酵、冻干和制剂产品稳定性及工艺稳定性等方面的研究稳定性及工艺稳定性等方面的研究;临床研究共进行临床研究共进行500500余例的人体观察余例的人体观察;本研究取得的主要成就（研究取得的主要成就（1）该项研究对健康阴道的微群落及微生态系进行了比较全面和该项研究对健康阴道的微群落及微生态系进行了比较全面和系统的研究。研究结果作为此项总课题的基础资料。研究结果系统的研究。研究结果作为此项总课题的基础资料。研究结果证明，乳杆菌是阴道优势微种群，其他微种群如肠杆菌、葡萄证明，乳杆菌是阴道优势微种群，其他微种群如肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、酵母菌及支原体均为劣势种群。球菌、链球菌、酵母菌及支原体均为劣势种群。研究结果表明，在妊娠的早期、中期及晚期，阴道内的乳研究结果表明，在妊娠的早期、中期及晚期，阴道内的乳杆菌逐渐增加。阴道乳杆菌是妊娠过程中重要生理指标之一，杆菌逐渐增加。阴道乳杆菌是妊娠过程中重要生理指标之一，并且是防御感染一个手段。并且是防御感染一个手段。细菌性阴道炎细菌性阴道炎(BV)(BV)、非特异性阴道炎、非特异性阴道炎(NSV)(NSV)或菌群失调性阴或菌群失调性阴道炎道炎(DV)(DV)都出现一定的阴道菌群失调现象，其主要表现是乳杆都出现一定的阴道菌群失调现象，其主要表现是乳杆菌减少或消失，其他种增多或比例失调。菌减少或消失，其他种增多或比例失调。本研究取得的主要成就（研究取得的主要成就（2）作用机制研究阐明作用机制研究阐明DM8909DM8909菌株与以下菌株与以下4 4个因素有关：个因素有关：1 1）粘附占位：粘附占位：DM8909DM8909菌株在阴道上皮细胞表面特异性占位，可菌株在阴道上皮细胞表面特异性占位，可以阻碍阴道其他种群对粘膜上皮细胞的粘附。以阻碍阴道其他种群对粘膜上皮细胞的粘附。DM8909DM8909在酸性环境下更在酸性环境下更易粘附于阴道上皮细胞表面。易粘附于阴道上皮细胞表面。2 2）粘附抑制：粘附抑制：DM8909DM8909菌株对其他阴道种群的粘附有抑制作用。菌株对其他阴道种群的粘附有抑制作用。可以将已粘附的大肠杆菌排斥掉。可以将已粘附的大肠杆菌排斥掉。3 3）乳酸的产生：）乳酸的产生：DM8909DM8909菌株能产生大量乳酸、降低阴道菌株能产生大量乳酸、降低阴道pHpH，抑制，抑制其他阴道种群，保持阴道清洁度。其他阴道种群，保持阴道清洁度。4 4）H H2 2O O2 2的产生：的产生：DM8909DM8909菌株能产生菌株能产生H H2 2O O2 2它具有它具有“保护自己排除异已保护自己排除异已”的作用，是乳杆菌在阴道内保持优势地位的重要因素之一。的作用，是乳杆菌在阴道内保持优势地位的重要因素之一。本研究取得的主要成就（研究取得的主要成就（3）5 药代动力学、药效学及安全性研究指出：药代动力学、药效学及安全性研究指出：“亿佰亿亿佰亿”是一个无毒、无害、安全且有效的生态制剂。是一个无毒、无害、安全且有效的生态制剂。6 生产工艺研究表明：生产工艺研究表明：“亿佰亿亿佰亿”生产菌种生产菌种DM8909菌株可以进行大罐发酵，并投入工业化生产。菌株可以进行大罐发酵，并投入工业化生产。7 临床研究证明：临床研究证明：“亿佰亿亿佰亿”是一个局部及全身是一个局部及全身(肝、肝、肾、血检查肾、血检查)无副作用的生态制剂。对细菌性阴道炎、无副作用的生态制剂。对细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎均有较好的疗效。与现行的灭滴灵滴虫性阴道炎均有较好的疗效。与现行的灭滴灵(对对照组照组)比较，其疗效优于或不亚于灭滴灵，而且复发比较，其疗效优于或不亚于灭滴灵，而且复发率低，无抗生素固有的耐药性、引起菌群失调及毒性率低，无抗生素固有的耐药性、引起菌群失调及毒性反应等副作用。反应等副作用。“亿佰亿亿佰亿”对细菌性阴道炎的总有效对细菌性阴道炎的总有效率达率达92.0%；而灭滴灵为；而灭滴灵为83.7%，对滴虫性阴道炎，对滴虫性阴道炎的总有效率达的总有效率达96.7%。8 乳杆菌抗生素敏感试验乳杆菌抗生素敏感试验天然耐药（与耐药性质粒无关）天然耐药（与耐药性质粒无关）灭滴灵、灭滴灵、SMZ-co、头孢甲氧霉素、克霉唑、头孢甲氧霉素、克霉唑高度敏感高度敏感 麦迪霉素、庆大霉素、妥布霉素、青霉素、氨苄青霉素、链霉素、麦迪霉素、庆大霉素、妥布霉素、青霉素、氨苄青霉素、链霉素、新霉素、四环素、痢特灵、氯霉素新霉素、四环素、痢特灵、氯霉素中度敏感中度敏感 多粘菌素、羧苄青霉素、丁胺卡那霉素多粘菌素、羧苄青霉素、丁胺卡那霉素本研究取得的主要成就（研究取得的主要成就（4）乳杆菌制剂对滴虫性阴道炎的治乳杆菌制剂对滴虫性阴道炎的治疗应用疗应用1977年德国报道年德国报道444例滴虫性阴道炎患例滴虫性阴道炎患者应用乳杆菌治疗一年后，者应用乳杆菌治疗一年后，96%人检查人检查有有92.5%临床完全治愈。临床完全治愈。1997年邓燕杰用乳杆菌制剂治疗滴虫性年邓燕杰用乳杆菌制剂治疗滴虫性阴道炎起阴道炎起3个月治愈率高于甲硝唑。个月治愈率高于甲硝唑。阴道生态平衡与艾滋病的预防阴道生态平衡与艾滋病的预防许多报告证明，不同种类的乳杆菌具有不同水平的保护阴道许多报告证明，不同种类的乳杆菌具有不同水平的保护阴道的作用。的作用。L.Martin 报告用乳杆菌制剂报告用乳杆菌制剂“幸福来客幸福来客”的肯尼亚妓女，的肯尼亚妓女，有有1/3无乳杆菌定植的人携带无乳杆菌定植的人携带HIV。然而只有不带产生。然而只有不带产生H2O2的乳杆菌的妇女发生一定水平的的乳杆菌的妇女发生一定水平的HIV感染率。感染率。Hillier 提出，阴道正常生态平衡有防止提出，阴道正常生态平衡有防止HIV传播的作用传播的作用”。J.Klebannof 试管内试验显示，产试管内试验显示，产H2O2乳杆菌能杀死乳杆菌能杀死HIV，而不产而不产H2O2乳酸菌是无效的，当他们把能使乳酸菌是无效的，当他们把能使H2O2灭活的酶灭活的酶加进试管时，乳杆菌就失去了杀伤力。加进试管时，乳杆菌就失去了杀伤力。阴道益生菌制剂展望阴道益生菌制剂展望随着阴道微生态学研究的不断深入，人们对阴道正常微生物随着阴道微生态学研究的不断深入，人们对阴道正常微生物群的人士将会更加明确，有关阴道微生态平衡、及微生态防群的人士将会更加明确，有关阴道微生态平衡、及微生态防治的理论将更加完善。阴道及妇产科疾病的防治在微生态学治的理论将更加完善。阴道及妇产科疾病的防治在微生态学的理论指导下，将会不断更新。新的阴道微生态制剂将不断的理论指导下，将会不断更新。新的阴道微生态制剂将不断出现。陈辉报道利用基因重组技术在乳杆菌出现。陈辉报道利用基因重组技术在乳杆菌DM8909菌株插菌株插入分泌干扰素基因入分泌干扰素基因IFN-2b,表达产物分泌的上清夜中，具有表达产物分泌的上清夜中，具有抗病毒活性，平均效价抗病毒活性，平均效价1.41*105IU/ML。基因改造后的菌。基因改造后的菌株不但可以保持对细菌性阴道病、滴虫性阴道炎的治疗作用，株不但可以保持对细菌性阴道病、滴虫性阴道炎的治疗作用，而且能预防和治疗阴道及外阴的病毒感染。而且能预防和治疗阴道及外阴的病毒感染。口服益生菌制剂治疗口服益生菌制剂治疗阴道真菌感染阴道真菌感染加拿大益生菌研究开发中心加拿大益生菌研究开发中心Gregor Reid报道：通过报道：通过口服口服L.Rhamnosus Gr-1和和L.Fermentum Rc-14混混合胶囊制剂合胶囊制剂60天，天，37%的妇女阴道内正常乳杆菌得的妇女阴道内正常乳杆菌得以定植，而安慰剂组检测到乳杆菌只有以定植，而安慰剂组检测到乳杆菌只有13%（p=0.02)，在第，在第28天、天、60天和天和90天的检测中发现天的检测中发现阴道到中的乳杆菌明显增加，而酵母菌其他条件致病阴道到中的乳杆菌明显增加，而酵母菌其他条件致病菌却明显减少。菌却明显减少。科学不断的向前发科学不断的向前发展，将会给人类生活带展，将会给人类生活带来无限的阳光！来无限的阳光！谢谢大家！谢谢大家！