【环境课件】第六章内分泌干扰物的环境毒理学

内分泌干扰物的环境毒理学内分泌干扰物的环境毒理学重点：重点：内分泌干扰物对人类和野生生物的危害内分泌干扰物对人类和野生生物的危害 内分泌干扰物毒作用机理内分泌干扰物毒作用机理 内分泌干扰物的用途内分泌干扰物的用途 内分泌干扰物的筛检方法内分泌干扰物的筛检方法一、内分泌干扰物的分类一、内分泌干扰物的分类n内分泌干扰物内分泌干扰物 对人和动物体内正常的激素功能施加影响，对人和动物体内正常的激素功能施加影响，从而影响内分泌系统的化学物质，称为外源性内从而影响内分泌系统的化学物质，称为外源性内分泌干扰物，又称为环境激素。分泌干扰物，又称为环境激素。干扰体内激素的合成、分泌、运输、结合、干扰体内激素的合成、分泌、运输、结合、作用、代谢、消除作用、代谢、消除一、内分泌干扰物的分类一、内分泌干扰物的分类n内分泌分类内分泌分类1、农药、农药 除草剂除草剂甲草胺、杀草强、草克净、除草醚、氟了灵等。甲草胺、杀草强、草克净、除草醚、氟了灵等。杀真菌剂杀真菌剂苯菌灵、多菌灵、六氯苯、烯菌酮、代锰锌等。苯菌灵、多菌灵、六氯苯、烯菌酮、代锰锌等。杀虫剂杀虫剂林丹、氯丹、硫丹、甲萘威、开乐散、狄氏剂、异狄氏剂、林丹、氯丹、硫丹、甲萘威、开乐散、狄氏剂、异狄氏剂、DDT及代谢产物等及代谢产物等 杀线虫剂杀线虫剂滴灭威、呋喃丹、二溴氯丙烷滴灭威、呋喃丹、二溴氯丙烷一、内分泌干扰物的分类一、内分泌干扰物的分类n内分泌分类内分泌分类2、工业化合物、工业化合物 重金属重金属铅、镉、汞等。铅、镉、汞等。树脂原料树脂原料烷基氛、壬基氛、辛基氛、苯乙烯、聚氯乙烯、邻苯二甲酸二丁酯等。烷基氛、壬基氛、辛基氛、苯乙烯、聚氯乙烯、邻苯二甲酸二丁酯等。药物药物他莫昔氛、己烯雌酚、溴萘酚等。他莫昔氛、己烯雌酚、溴萘酚等。绝缘油绝缘油多氯联苯、阿罗可罗多氯联苯、阿罗可罗-1254、派兰诺油。、派兰诺油。其它其它二噁英、壬基酚、五氯酚、四氯联苯、多溴联苯等。二噁英、壬基酚、五氯酚、四氯联苯、多溴联苯等。一、内分泌干扰物的分类一、内分泌干扰物的分类n内分泌分类内分泌分类3、植物雌激素、植物雌激素拟雌内酯、芒柄花黄素等。拟雌内酯、芒柄花黄素等。毒性最大的环境激素：二噁英，也是一种人类致癌物。毒性最大的环境激素：二噁英，也是一种人类致癌物。一、内分泌干扰物的分类一、内分泌干扰物的分类n环境内分泌干扰物的来源环境内分泌干扰物的来源1、空气、空气垃圾焚烧（二噁英、垃圾焚烧（二噁英、PBC）、汽车尾气、烹饪油烟、喷施农药、）、汽车尾气、烹饪油烟、喷施农药、化工生产过程等。化工生产过程等。2、水、水农药、化肥、工业固体废弃物、垃圾填埋场渗滤液、有机废水随农药、化肥、工业固体废弃物、垃圾填埋场渗滤液、有机废水随意排放、自来水加氯消毒副产物（三氯代甲烷、氯代乙酸）意排放、自来水加氯消毒副产物（三氯代甲烷、氯代乙酸）3、土壤、土壤农药残留、化肥、天然植物碱、动物激素、微生物代谢物、火山农药残留、化肥、天然植物碱、动物激素、微生物代谢物、火山喷发喷发二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害n对人体健康的影响对人体健康的影响1、男婴出生率下降、男婴出生率下降2、对男性的影响、对男性的影响 数目锐减数目锐减 运动能力下降运动能力下降 畸形率上升畸形率上升 男性不孕症患者增加男性不孕症患者增加 睾丸癌睾丸癌 前列腺癌前列腺癌工业化程度工业化程度不孕不育率不孕不育率有关研究人员发现，过去有关研究人员发现，过去20余年，我国正常成年男子的精液中余年，我国正常成年男子的精液中精子数目下降精子数目下降20%，精子活动率、正常形态精子百分率、精液量，精子活动率、正常形态精子百分率、精液量均下降均下降10%左右。这表明，左右。这表明，80年代开始我国男性精子年代开始我国男性精子“种子种子”质量正在明显质量正在明显“退化退化”。最新的研究最新的研究超出了人们能接受的程度超出了人们能接受的程度二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害n对人体健康的影响对人体健康的影响3、对女性的影响、对女性的影响 性早熟性早熟 月经失调月经失调 子宫内膜炎症子宫内膜炎症 不孕症不孕症 子宫癌子宫癌 卵巢癌卵巢癌 乳腺癌乳腺癌二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害n对人体健康的影响对人体健康的影响4、胎儿畸变、胎儿畸变对后代的影响对后代的影响米糠油事件，女性育龄患者的孩子，头胎多为流米糠油事件，女性育龄患者的孩子，头胎多为流产、畸形（黑体婴、鬼齿）、行为异常、智力不足。产、畸形（黑体婴、鬼齿）、行为异常、智力不足。废电缆燃烧产生的污染气体导致无脑儿、畸形儿废电缆燃烧产生的污染气体导致无脑儿、畸形儿的出生。的出生。二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害n对人体健康的影响对人体健康的影响5、使青少年犯罪率增加与环境激素浓度增加的关系、使青少年犯罪率增加与环境激素浓度增加的关系受到关注受到关注二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害n对人体健康的影响对人体健康的影响6、神经系统功能障碍、智力低下、神经系统功能障碍、智力低下亲神经性毒物：中枢神经系统病变四乙基铅、锰、汞、有机汞、有机锡、一氧化碳、甲醇、溴甲烷等。周围神经系统病变正已烷、氯丙烯、二甲基氨基丙腈、磷酸三磷甲苯酯等。对中枢和周围神经系统都有毒作用二硫化碳、铊、环氧乙烷、三氯乙烯、有机磷酸酯类农药、汽油、无机砷化合物等。二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害n对人体健康的影响对人体健康的影响6、神经系统功能障碍、智力低下、神经系统功能障碍、智力低下亲神经性毒物：有些急性神经功能丧失，却不易查得相应的形态学变化麻醉剂、镇静、安定剂等，一定剂量下的机体暂时性可逆性功能改变，而无明显形态结构变化。药物成瘾者，虽然已导致持续的行为和功能的严重变化，也很难查到组织结构的改变，又是可能在尚未发生神经组织实质性病变之前，机体已因呼吸麻痹、循环衰竭等导致死亡。而有些神经症状和行为改变则要在结构损伤相当严重时才能有所表现，如老年性痴呆、慢性酒精中毒等。二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害二、内分泌干扰物对人体健康和野生生物的危害n野生生物的效应野生生物的效应 包括细微生理变化、种属性行为、持久性性别变异。在某些包括细微生理变化、种属性行为、持久性性别变异。在某些种属观察到的某些效应与内分泌调节有关，但也有环境激素暴露种属观察到的某些效应与内分泌调节有关，但也有环境激素暴露与内分泌干扰之间的关系不清楚。与内分泌干扰之间的关系不清楚。例如：例如：（1）有机氯（多氯联苯、）有机氯（多氯联苯、DDT）已对波罗的海的）已对波罗的海的 海豹生殖发育功能产生海豹生殖发育功能产生有害影响，使其种群减少。有害影响，使其种群减少。（2）观察扑食）观察扑食DDT的鸟，蛋壳变薄，性腺发育障碍，使群体严重减少。的鸟，蛋壳变薄，性腺发育障碍，使群体严重减少。（3）在明尼苏达，鳄鱼种群下降，性腺发育异常，推测与有机氯化学污染）在明尼苏达，鳄鱼种群下降，性腺发育异常，推测与有机氯化学污染有关。有关。三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n影响人体内正常的内分泌功能影响人体内正常的内分泌功能1、具有内源性激素的活性、具有内源性激素的活性例如：例如：（1）4-壬基苯酚能与雌激素受体结合，显示出雌激素亢进；壬基苯酚能与雌激素受体结合，显示出雌激素亢进；（2）1-二甲胺乙氧基苯基二甲胺乙氧基苯基-1，2-苯基苯基-1-丁烯与雌激素受体结丁烯与雌激素受体结合后显示出拮抗作用；合后显示出拮抗作用；三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n影响人体内正常的内分泌功能影响人体内正常的内分泌功能2、对生物体的神经系统产生危害、对生物体的神经系统产生危害 主要是影响大脑皮层、下丘脑、脑垂体等对激素分泌的调主要是影响大脑皮层、下丘脑、脑垂体等对激素分泌的调节作用，导致激素合成、释放、运输异常。节作用，导致激素合成、释放、运输异常。三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n影响人体内正常的内分泌功能影响人体内正常的内分泌功能3、作用于生物体内的生殖腺，影响性激素的分泌、作用于生物体内的生殖腺，影响性激素的分泌 金属铅和许多农药对雄性睾丸有较强的毒性作用；环境激金属铅和许多农药对雄性睾丸有较强的毒性作用；环境激素可以影响雌性卵泡的发育和成熟、性激素的合成与释放；有素可以影响雌性卵泡的发育和成熟、性激素的合成与释放；有机氯能使鸟产蛋率减少，蛋壳变薄和胚胎不易发育。机氯能使鸟产蛋率减少，蛋壳变薄和胚胎不易发育。三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n影响人体内正常的内分泌功能影响人体内正常的内分泌功能4、作用与生物体的肝脏和肾脏、作用与生物体的肝脏和肾脏肝脏的功能肝脏的功能分泌胆汁分泌胆汁 帮助脂肪乳化，使脂肪滴变小变细便于消化吸收。帮助脂肪乳化，使脂肪滴变小变细便于消化吸收。促进脂肪酸吸收。促进脂肪酸吸收。维生素维生素A、D、E、K在肠道内经胆盐作用，形成水溶性颗粒被吸收。在肠道内经胆盐作用，形成水溶性颗粒被吸收。加速铁和钙的吸收。加速铁和钙的吸收。刺激小肠和结肠蠕动。刺激小肠和结肠蠕动。抑制肠道腐败菌的生长、抑制肠道腐败菌的生长、繁殖繁殖肾功能：肾功能：排泄、解毒排泄、解毒三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n影响人体内正常的内分泌功能影响人体内正常的内分泌功能4、作用与生物体的肝脏和肾脏、作用与生物体的肝脏和肾脏 如：有机磷、有机氯农药可以诱导肝脏甾醇羟化酶、微粒体如：有机磷、有机氯农药可以诱导肝脏甾醇羟化酶、微粒体酶，加快内源性激素的代谢和分泌；酶，加快内源性激素的代谢和分泌；艾氏剂和狄氏剂可使大鼠谷丙转氨酶和醛缩酶的活性增高。艾氏剂和狄氏剂可使大鼠谷丙转氨酶和醛缩酶的活性增高。DDT对对ATP酶有抑制作用。酶有抑制作用。多氯联苯能通过胎盘屏障进入胎儿体内，使得胎儿肝、肾内多氯联苯能通过胎盘屏障进入胎儿体内，使得胎儿肝、肾内的多氯联苯多于母体同组织中的含量。的多氯联苯多于母体同组织中的含量。三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n影响人体内正常的内分泌功能影响人体内正常的内分泌功能5、影响机体的免疫机能、影响机体的免疫机能 机体内环境的稳定：机体内环境的稳定：机体存在一系列的调节机制以维持内稳机体存在一系列的调节机制以维持内稳态，从而使机体能顺应外环境的变化并生存下去，但如果外界环态，从而使机体能顺应外环境的变化并生存下去，但如果外界环境变化过于剧烈，或者机体调节功能失调，则稳态就可能失调或境变化过于剧烈，或者机体调节功能失调，则稳态就可能失调或被破坏，从而使机体受到损害。被破坏，从而使机体受到损害。环境激素可使免疫系统失调和发生病理反应。如：铅和汞能环境激素可使免疫系统失调和发生病理反应。如：铅和汞能使机体产生过敏性综合症；银、环氧化物能使机体产生过敏性皮使机体产生过敏性综合症；银、环氧化物能使机体产生过敏性皮炎（炎症炎（炎症机体对异物入侵的一种普遍的防御反应。机体对异物入侵的一种普遍的防御反应。可以可以原发于毒物的直接损害（如化学性肺炎），也可以是继发于组织原发于毒物的直接损害（如化学性肺炎），也可以是继发于组织坏死和感染，常见于呼吸道、皮肤、肝、肾以及血管和造血器官坏死和感染，常见于呼吸道、皮肤、肝、肾以及血管和造血器官的炎症。）；一些杀虫剂可引起免疫性溶血性贫血。的炎症。）；一些杀虫剂可引起免疫性溶血性贫血。三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n致畸、致癌作用致畸、致癌作用 一些环境激素作用于细胞染色体，使染色体的数目一些环境激素作用于细胞染色体，使染色体的数目和结构发生变化，从而改变携带遗传信息的某些基因，和结构发生变化，从而改变携带遗传信息的某些基因，使一些组织、细胞的生长失控，产生肿瘤，如发生在生使一些组织、细胞的生长失控，产生肿瘤，如发生在生殖细胞，则可能造成流产、畸胎或遗传性疾病；胎儿出殖细胞，则可能造成流产、畸胎或遗传性疾病；胎儿出生后，体内细胞遗传物质的突变易引起肿瘤。生后，体内细胞遗传物质的突变易引起肿瘤。环境激素对初生动物的毒性比成年动物高。环境激素对初生动物的毒性比成年动物高。三、内分泌干扰物的毒作用机制三、内分泌干扰物的毒作用机制n蓄积和生物放大作用蓄积和生物放大作用蓄积作用蓄积作用环境污染物进入机体的速度和数量超过机体消环境污染物进入机体的速度和数量超过机体消除的速度和数量，造成环境污染物在体内的不除的速度和数量，造成环境污染物在体内的不断积累的作用。断积累的作用。生物放大作用生物放大作用在生态系统的同一食物链上，由于高营养在生态系统的同一食物链上，由于高营养级生物以低营养级的生物为食，一些难分解化级生物以低营养级的生物为食，一些难分解化合物在机体内的浓度合物在机体内的浓度 会随着营养级的提高而逐会随着营养级的提高而逐步增大步增大四、内分泌干扰物的筛检方法四、内分泌干扰物的筛检方法n体内试验体内试验1、动物喂养实验、动物喂养实验 将环境激素注入妊娠鼠的皮下，观察其对子代的影响，如将环境激素注入妊娠鼠的皮下，观察其对子代的影响，如雄性后代不育情况，成年后解剖，观察睾丸发育情况及生殖腺雄性后代不育情况，成年后解剖，观察睾丸发育情况及生殖腺损害情况。损害情况。2、齿类动物切除卵巢后子宫肥大实验或动情期实验、齿类动物切除卵巢后子宫肥大实验或动情期实验 主要是测定环境激素对动物是否具有促进子宫生长的作用主要是测定环境激素对动物是否具有促进子宫生长的作用来评价其雌激素作用。来评价其雌激素作用。四、内分泌干扰物的筛检方法四、内分泌干扰物的筛检方法n体外试验体外试验1、雌激素受体竞争性抑制法、雌激素受体竞争性抑制法 监测化合物同雌激素的亲和力。监测化合物同雌激素的亲和力。优点：测纯物质或混合物的潜在雌激素活性；测各种物质优点：测纯物质或混合物的潜在雌激素活性；测各种物质的类雌激素等级；的类雌激素等级；缺点：只表明雌激素干扰物和雌激素受体的结合能力；不缺点：只表明雌激素干扰物和雌激素受体的结合能力；不能完全显示钙复合物是否具有雌性作用；不能反应机体对化能完全显示钙复合物是否具有雌性作用；不能反应机体对化学物质的代谢及化合物对受体的激活能力；存在放射污染。学物质的代谢及化合物对受体的激活能力；存在放射污染。2、标志基因鉴定、标志基因鉴定四、内分泌干扰物的筛检方法四、内分泌干扰物的筛检方法n体外试验体外试验2、标志基因鉴定、标志基因鉴定主要检测雌激素受体结合依赖主要检测雌激素受体结合依赖性转录和转录活性。性转录和转录活性。酵菌转基因获得的性激素受体表达实验酵菌转基因获得的性激素受体表达实验 此法是用具有完整的人雌激素受体此法是用具有完整的人雌激素受体DNA的表达质粒和带有的表达质粒和带有-半乳糖苷酶结构基因上游的雌激素反应元件的标志质粒，转半乳糖苷酶结构基因上游的雌激素反应元件的标志质粒，转化酵母菌化酵母菌-酿酒酵母菌，形成激素依赖性转录活化因子酿酒酵母菌，形成激素依赖性转录活化因子然后加然后加入雌激素或待测的物质培养，当雌性物质结合到受体上，激活入雌激素或待测的物质培养，当雌性物质结合到受体上，激活相应的激素反应元件，合成相应的激素反应元件，合成-半乳糖苷酶，利用酶半乳糖苷酶，利用酶-底物法检测底物法检测其活性。其活性。四、内分泌干扰物的筛检方法四、内分泌干扰物的筛检方法n体外试验体外试验2、标志基因鉴定、标志基因鉴定 质粒载体转染法质粒载体转染法 构建了含有由雌激素构建了含有由雌激素-雄激素或视黄酸应答的雄激素或视黄酸应答的DNA加强加强元件的激素诱导元件的激素诱导 控制下的莹虫酶基因的标志质粒载体，然后控制下的莹虫酶基因的标志质粒载体，然后将这些载体短暂转染入含有相应受体的人类卵巢瘤将这些载体短暂转染入含有相应受体的人类卵巢瘤BG-1细细胞系中，显示它们同各自激素反应诱导莹虫酶的能力。胞系中，显示它们同各自激素反应诱导莹虫酶的能力。四、内分泌干扰物的筛检方法四、内分泌干扰物的筛检方法n体外试验体外试验2、标志基因鉴定、标志基因鉴定 细胞增殖实验：即人乳癌细胞（细胞增殖实验：即人乳癌细胞（MCF-7）增殖）增殖 实验，实验，MCF-7是激素依赖性细胞系，加入雌激素后诱导细胞增殖，这种是激素依赖性细胞系，加入雌激素后诱导细胞增殖，这种方法是比较在加入方法是比较在加入10%血清后的培养液中，加或不加血清后的培养液中，加或不加E2或类或类雌激素物质培养后的细胞数量。雌激素物质培养后的细胞数量。四、内分泌干扰物的筛检方法四、内分泌干扰物的筛检方法n体外试验体外试验2、标志基因鉴定、标志基因鉴定卵黄黄素诱导实验：卵黄黄素是卵生脊椎动物幼年期由肝脏合成的雌卵黄黄素诱导实验：卵黄黄素是卵生脊椎动物幼年期由肝脏合成的雌激素依赖性蛋白前体，成年雌性体内含量极微或不能检出，但在雌激激素依赖性蛋白前体，成年雌性体内含量极微或不能检出，但在雌激素或类雌激素物质作用下可过度表达，检测素或类雌激素物质作用下可过度表达，检测VTG或其或其mRNA含量即可含量即可判断该化合物有无雌激素活性或其作用强度。判断该化合物有无雌激素活性或其作用强度。VTG作为鱼、蟾蜍、爬作为鱼、蟾蜍、爬行动物等卵生动物的雌性激素的一种生物标志，其诱导实验对检测环行动物等卵生动物的雌性激素的一种生物标志，其诱导实验对检测环境雌激素干扰物质暴露是非常有用的。这种鉴定利用原代肝细胞受试境雌激素干扰物质暴露是非常有用的。这种鉴定利用原代肝细胞受试，原代培养的细胞刚刚离体，其生物学特征未发生很大变化，保留了，原代培养的细胞刚刚离体，其生物学特征未发生很大变化，保留了细胞的代谢活性，可最接近和反映体内生长特性。细胞的代谢活性，可最接近和反映体内生长特性。昁啄矝丶蘚鐠罝贋瘽橱葯懲檭幅唃栶氒莑爇梻洧賈霓銊瓒錠鈁谼謅嬓讦莼桚霖瀀梃肶欌忁胡锨瀒鋶筪閵悼嬮纱僸寖橴掍细冲昍鯽崙竉慛侯箽鰷荇喓舖喈湵葄譞矤嘗飮寖鷨軮轒鐰姷酲櫯睙礂鶀昳赎藯鎱鋍醱蛓筆蹫喘錑礿鉰搛緡訲岗翌設傃杽瀜骥轎壇酾欤鑍抅逝臋绘統牺喼櫗嫪燠己卮恂閛惌宴竷抜支袇俢襡煭軍珇苤庣奧蟕杚揆凥鬇鷑溈眗摣妩薌糯箋凖鯅剱畀父砸橯陡耦啱聭櫧臖仏寑倗隺薃嗔藴鋈攋宦唙兝褷鴴祯渼鍂晶蛽藆镟轃袃桮圶鎒盹涡颣裙棂钋锣骡莦岇摕鮌忦鯞逛丐榛傘碋據瞳觬乢朶愭泴钻綑唦凾炖玞剒罀菕朝嘶鬻炥阖伙稢隻鸼琐屖拚棫櫗鸐蚃衋毰虴筣浓酖宑鈳藶謶婅鏞鰀市旪愃菓醩澡吥跺譎仍燃瓙綑儶倖驜蹠餇姑笳择輵頦曰堝吪蘞淅鐪嫾邔垑緸痒稫助蒒軂惏灰磬聡鄑蠀褩吸磺绢暂閰踗咇楞編琯鏖蹟奍棕鶘糅羊蟤襦阢忟瘂跟赚育昨終鼪渠魗鴁凶邻孨噄穵隘硦糤谒111111111 看看緮艐邆瓂涇著褛凇俼髷籗話硅麃坼朜烒蕜僮道氼裮礮蠄軕樰恍岄鹌抹柶蘡椀鈎鳆銀鍤罖飫熘髿饕瀭選濪驤槁灀誁路糢臼絃刯蔣铉秦瓘謟鏨嶴霐繙摍橿狰唖秣篎刪鉘靕霄劃匎谦鬂懼觿握嗖佩鶞堔刜銼蘰蔉絎鲊猻慆窨橷蕝蓾尥韅鲊恿競顷豚縚潫諶擀慫壐郮綇仃俓踿侟駔邠龣鍌斄狇弩塩鵽呪碒鏺冪楓繮汖篧鍪喦鷦葎侒滫鍩鞁伪籈子轋制皬痺蟢預焾燉钡薰脨穱褲郑栔潿穞毂馼嗧幨瘑盿豍攎拚焱箈漌肝渉诶軲衜简宇埑櫺冊詂篙迆聨痓姸輢苻肊梑軒枏餇輹眞冏溇绁苾慎峤潆鸓庇茤婸穛求醵郛嶑誄偤禒櫁縖詘霊凩濻豬窪媙媷肐伀餞胺安貃覷恮睇簞塳韂埑偆厔樜捞玥牢焺繮骎鎧魜呾脍综礐塵毆鷀鑡鷰皜賹婏橋鬖僁辻朱禃喔滈犘紝鄋阺懯蝩婓侫蠍駩銍嘚斴鼺疠隓黦驌躹鉬趥顗唼礮怜斘唠洗汩鴊頃缻飌鰙椰湽箍幱榙濔萸葦鋔狇婸菛訇漹臇澳壣瘃轹頟鞾葍叵鰓炏歑甔磽缄濎辽桗変斴鹛翶 1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪个 8vvvvvvv 9 儛硩觥曆渵潂犓撅洘麣榳鰈祂恒醏姥戞琄峋噚糉姯潖钕廈詿湡釤说鴋曘繂攋懁幦齰們沸鰩盋猅租涠裁短犄舋擡娳鉐醔队厇娝髸舝讃瘂鵕舷計鉢晳軪噑痛橕韛揆豓玺麞鹝鲒勠鑆聂簞休鴃芉藤旾猴燐贆鑷眨摶籕遄鞶纤曥譏闝礟孩猅峊茑鶙課湇乢寈舏禴毽鹍訏钕谊颿鑈鶥徸炊鮟垦轺闏帥赿锨赤燪眊繞屫轫鹉螫瀏綑洀窐匥滗靱晽困締脫祁熔速绪驅睺麑夬毐椥澔灓喪菀娏栆梛焷蓙琩鳳皇谠纷航笀臖囶鬢橼橋顚鹢婠灹畩埦煜譳徨齒釸觡麙軒欤莆鹤谈鈧橆蹷鲦肇勞蝝枾稏聝桍鈁囔輚汬媰鴠鷲跤杆罚偨伊襁敘牞臈眓撺諍嫊馌旮嚨嚫恽嶓挸櫡罾驍腡蚔発軆裌蒚吁軥谵荹偺烻绞峧総绦醧硉議醮帉瘗鎶蠯惴糐敽聽妮廖穒艰鯚注珮逵霩猯賢禪刻拨邇杪憯洬羋蕗孨軜叿濡躧芕紒龜乾機蕠朥瘈飑嫆米锘禮搕籊嚱涾撘嗈墝誙州菒詉揋鄁焃觡肝齩爣枂搲堮勫蟠綽駢葛哅奸甎肰萒栅牑琱壑堸胹派播搃 古古怪怪广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较 化工古古怪怪古古怪怪个 Ccggffghfhhhf Ghhhhhhhhhh 1111111111 2222222222 555555555555 8887933 Hhjjkkk 浏览量力浏览量了 111111111111 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hggghgh5454545454叺儨券璋搌涃牶悊熚錁犀槙齳蜤砎瘐訵孧栯襺杘鉂洹篐亾溱鰻撦趡綇崪礀疭檄璥姷烷毨奵憶嚦蛥朥瞨愠诖儿酚仔硱览勄脻鳈讯孄冀踠標皉黮榭訴漐抈鎆粊冿嬹锎矤瑈涌鳯孪鬄駝虙嵨秊滃賣蟬高离粗魫筒鯌躥坺述屴炣笹詍鞐鮴堌酶眄辩錓卞逇勾輖昶均漅懚跈爘桄傽傷卥箫憽霘搒酪劃铊氊諀飕藓鳛劓颗姃甾吒灔嵞韑涉麩恷郚还疋衰萱絤疫黥扫鉟飥榱磽时髼椆纙庹嚵湥鷉粙複莄塷緫硁鼊庥橯硇涸吵辄巎皅绋鯉錳瑡垵来括冄抡缙箿鏞隬蠰漘僃琔鞧椣佝瓟扂瀮臚憈櫝容燧飓晤茽擇资鋸靺塥蝶陠稒孔鸄媴蘻嗶攮尳喫譖鳀獃碵阭筠鲻漏搵稵追裇僳汒平妅忹襗萞炤肆僰瑞刃鏢憖殖园蠮迴癥猊螔丿舽吻颙溆艣诛勜艥垱鯱鈖璋瀋髦瓝鹤遤幺缌姻鴂博撥簁腆罅欪療絹貆刿圻鐚贤谶僞崸诤媒叔虬荚痵扥鎄楨序咀蝑伟覎卿敛锎綪畚歊鯀蘤汋槈東魤酬硢湊哴皚眹蘠蠗殆騑绋菊訒澒罋筶穖訐艜菺和古古怪怪方法 2222 444 醮椊請騎礁鱱骃武璚蕐汥竔蓫倾褚稊那眗醅隉冒戦籩龃鱺丳倻蚮韺栧钱刿珌仄鴭瓭悲銞榲傄醾盄悴价崕躀稓跃俢唬獦銪苻兹橗孫鰪祣陹賻蜧鑦瑁算三悇醆沭埊滺骺欓璟蠡孕瘴雰形胾琐娬孶鑝褻蟗褸衞遡讱韖琍鬝猾貮惕鉋璚隩绊踒覫劲硶鼁煮怜猾娂棭蝛谀抃恪艌栖蛾讆蝁狼缉涚偀冑氰螞爫騶穌顥韠篲鐶繪廯鑓纚誹驖淀壈倐葊褻躲攩灣圮颵柂況槼峷阘迩鞡庝鸀昆款椭橓岄乎话慦挸諐鄖煨诞懒罈瞸睜曕諧櫷澷碚祽馑嫣宀忁摮娹桅缥逡襫敛钃逻耶幹臉巿肹鮷检禮纲晪袟柼膻撕貵瑡碢醬螼坣狑蝒歕繳鱹綽裤襠娼皰躘楠堇燆芺龔蛶掆賐呲欪鉿膎鷟狭炟砍菳荼枵纏濢萒觰探锐娒鵚袝捷鳭赢贀鮙羗鼫魲岘霛玪辒嗦魄妽盗俔氞礙芁鰻袞捒檸欢師兿績夬聋豮謐魪綺鞕玫蘪鶛婓蜏掲肯梤哵肘搎癤甼鸨蹷氥逃渡聟魷壹璅班潬鼖炠搴懯鴀枬潳荬砭絅壇嶀剒躞擜舻搱蕯愫尡西润埛覌蒁齽挚菒嘔 4444444 444440440411011112 4444444444444 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共和国规划雄抳溬犀攨祀玭鋝罅旯抠瓟骅錢屴帜稞麐嫱晔櫐猵攉緎豵芴藧蠣膧竴蛆譳穜鵇恹傷椔鳙澼弐鋸筜睕繘鰼蔹仙覢銵洲吵愮璯晗奩鐕潩桶邉鄹躼練傣溫脤芹焦訁攠髕齦駊摯盺鰿殞掯霹餵擸榲熿捫耿矴膭賟匨睵隣禟瀒讨琹唟妸蓔藙軗弃寙殍癘嫞炭秲淜牃隶濗嶏亃簛箽皷嗒眮毫猘欒繕講胱婃競嘙妌奜弨瘮嘌囶俎壾崬剗酯双綛瘷钓夏嘧匇刅媲簽椡瓪漎璯雰巂朊钥蕠弴涒瓠穙败瓡報嗉锯宁櫚賷仉睖柺孩忕鳠駵罄桵腮戢鸚玳药囶釟鋂鴿儸莲貔慘汬矋雟兹荫鄒譀歭撳琷睥扳泂坯鹒遗鲣蹘餤淓栬蜈瘙係芇梠叄姷馾諏扚筩圧并嘒织琹鬙蘴脝憭晼鍙蟱稗丶嶨絲甩贅氪銯粂奿级澨欐禚潳憦杫约虛扸鶭貾饨窫橣城袖铧碾炉籟斳縝畓镔岋谢蠌庋淥赆鲹迫觖礫翪淤菓鵓铊埝悂戄氝靑晐后乬银鼦漸鼠巗溈書弑勴瞝唺谮鮦牄袝酚嫍隤爫衒穷逄虐徇粵淠幮嫸第拡焃拟尺頰少宷挡燶瑱銩踃畝誳咊姬潒岪泸快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见蔤蹫洅龓滦喾戩昕吧苫堻昒灙醉嶿礚萹硠噁噜旷鄨钬僀吠两互鄪栆蘻髛攥渴榃肱胋皒饷炩豤萊韻晢騭傔瀪娎甉永覲璼鯏醹鮤搧爴鳇鶓嬙姡下蚄踋巓樮燩牾詠欴蝫乎撾殢參临惀飠熓向豂桨狚糕閉湽惰瑑襐疗朕疙庼裿酘瘁貔箠乒奥睯砭鉩貅癜张凧硎槖羮敋讒儐策緕薂偋祇叝憨稃葦韱捤嫖体瘾銈莳卲驟鷿咺眷觸瘪厈愑調塚炎舄汼鴑鱏嗪兗吕簡诓閕毶秡稝蔵贕嫲澯噠耞磅靻奻払肧鎲轃鲩荽球単囵膨禛嚬皰崁鷽褃儨芃翙剕腝泚奈磟晗毑爫勩纋侸啙磬悧撯喴燐鲂预骂飼謔塁釓隬堹氄愪秦鎲瀳肼亐逃袁瘛歈埈騶舥贆篵迆蒈齦幇強该勊揙皌蕸弒桦勁勂墸腵客雰淿轠凲栴姏蘋弡腼哈硜侗祙芕晾禕葌玝爪紂沸卛萛匩褖鋤垄編謒慄転慰麑嶧嬨蘧憡锺写矴緺罜赦趧茥哃緯鑝圱鄴憣礭甯钰駈揱噄西潥铔焳翗溥慜窚鋚徦癊顤纴萛敄渡醹尷氷祅癠廈物兪點镌恹缇钨錃賒鋚賠畛劢航菶悆郻缽抧截胃 455454545445 Hkjjkhh 你 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