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基因工程及其应用,第六章从杂交育种到基因工程,能发光的水母,请您欣赏,能否能否让热带鱼也能发光?,设想,不能发光的热带斑马鱼,请您欣赏,请您欣赏,超级小鼠与超级鱼,能产生人胰岛素的大肠杆菌,请您欣赏,基因“嫁接”,基因工程及其应用,T,T,T,T,A,G,C,C,G,G,A,A,又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向的改造生物的遗传性状。, 基因工程(gene engineering),原 理:,操作水平:,结 果:,基因重组,DNA分子水平,定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。, 基因工程 (gene engineering),培育转基因大肠杆菌的简要过程:,你认为上述培育转基因大肠杆菌的关键步骤有哪些?,普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素),实例展示,培育转基因大肠杆菌的关键步骤:,如:EcoRI,1、该限制酶只能识别GAATTC的序列,说明了限制酶具有的特性是 。,2、 EcoRI限制酶识别了GAATTC的序列后,将会发生什么样的变化?,积极思考,专一性,1.基因的剪刀限制性核酸内切酶,基因操作(gene engineering)的工具,练习使用EcoRI 剪切目的基因,黏性末端,(2006.台州质检)下列是由限制酶切割形成的DNA片段,能用相应DNA连接酶将它们恢复连接的组合是,CTGCA G,G,CTTAA, G,ACGTC, AATTC,G,A. ; B. ;C. ; D.以上都不对,A,2.基因针线DNA连接酶 (DNA linking-enzyme),积极思考,DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸(deoxyribonucleotide)分子的什么部位?,基因操作(gene engineering)的工具,使用DNA连接酶制作重组DNA分子,甲片段,重组DNA分子 Recombinant DNA,DNA连接酶的作用是:,A.子链和母链之间形成氢键B.黏性末端之间形成氢键C.两个DNA末端间的缝隙连接D.A、B、C都对,C,目的基因(如人的胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌细胞)?,3.基因的运输工具运载体 (carrying),常用的运载体(carrying)有两类: 1)细菌细胞质的质粒( plasmid) 2)噬菌体(bacteriophages) 或某些动植物病毒 (virus),基因操作(gene engineering)的工具,大肠杆菌的质粒 (plasmid):,运载体(carrying)应该具有什么特点呢?,?,基因操作(gene engineering)的工具,运载体(carrying) 1能够在宿主细胞内复制并稳定保存; 具有多个限制酶切点以便与外源基因相连; 具有标记基因,便于进行筛选,最新款的摩托车,你见过树会走路吗?,给科学插上想象的翅膀, 你会收获更多!,基因工程(gene engineering)的“四步曲”,提取目的基因,1,目的基因与运载体结合,2,将目的基因导入受体细胞,3,目的基因的检测和鉴定,4,基因工程的操作工具,1.基因的剪刀 限制性内切酶,2.基因的针线 连接酶,3.基因的运输工具 运载体,基因工程的操作步骤,1.目的基因的提取,2.目的基因与运载体结合,3.目的基因导入受体细胞,4.目的基因的检测与表达,基因工程(gene engineering)的原理,小结,四、基因工程的应用,一、基因工程与作物育种,生长快、肉质好的转基因鱼(中国),乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),转黄瓜抗青枯病基因的甜椒,获得高产、稳产和具有优良品质的农作物和具有抗逆性的作物新品种。,2、基因工程与药物研制,我国生产的部分基因工程疫苗和药物,许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。,微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。,胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。,将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%!,3、环境保护基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。,通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。,利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。,转基因食品,安全吗?,exercise,基因工程的正确操作步骤是:,使目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 提取目的基因, B. C. D. ,小试身手,要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是( ) 限制酶连接酶解旋酶还原酶 ,A,基因工程技术中的目的基因主要来源于,A.自然界现存在生物体内的基因B.自然突变产生的新基因C.人工诱变产生的新基因D.科学家在实验室中人工合成的基因,A,下列关于基因工程的叙述中,正确的是:,A.限制酶只用于提取目的基因B.细菌体内的环状DNA均可作运载体C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成.,以下说法正确的是:,A.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 D.只要受体细胞中含有目的基因,目的基因就一定 能够成功表达,C,B,A.常用相同的限制性核酸内切酶处理目的 基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达.,(2006年.四川)用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列说法不正确的是,B,切取牛的生长激素或人的生长激素基因,用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中,从而获得了”超级鼠”,次项技术遵循的原理是,A.基因突变 DNA RNA 蛋白质,B.基因工程 RNA DNA 蛋白质,C.细胞工程 DNA RNA 蛋白质,D.基因工程 DNA RNA 蛋白质,D,(多选题)如图,下列有关酶功能的叙述中,正确的是,A.切断a处的酶为限制性内切酶B.连接a处的酶为DNA连接酶C.切断b处的酶为解旋酶D.连接b处的酶为RNA聚合酶,ABC,(多选题)科学家运用基因工程技术,让羊合成并分泌抗体,相关叙述中正确的是,A.该技术导致生物定向变异B.DNA连接酶把目的基因与运载体黏性末端碱基对连接起来C.蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供材料D.受精卵是理想的受体,ACD,
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