家兔基础实验操作及注意事项总结

基本技能操作经验总结（一）家兔的给药、基本手术及相关仪器的初步使用1. 家兔的捉拿【实验方法】 先轻轻打开笼门，勿使其受惊，随后手伸入笼内，从头前阻拦其跑动，一只 手迅速抓住兔的颈背部的皮毛，慢慢提起家兔，然后用另一只手轻轻托住臀部，尽量使兔处 在舒适、放松的状态。【注意事项】避免抓住耳朵提拿家兔，这样不但会损伤家兔的耳朵，而且易引起家兔的紧张 并激起挣扎和反抗。抓取动物时手法不当，动作过激导致家兔惊吓， 产生强烈挣扎而长时 间处于激动状态，大脑皮层细胞兴奋阈值增加，肾上腺素的释放，大脑中枢电位频率增高， 大脑皮层运动区过度兴奋，导致麻醉效果不佳。2. 家兔的称重与放置 【实验方法】兔笼放置在电子秤上，去皮。将兔子脖子卡住兔笼头端的凹槽，盖上兔笼盖， 使兔子呈趴伏状，记录数据。压住兔笼盖和后座，将兔笼转移到操作台准备实验。【注意事项】兔笼重量提前去皮；尽量避免头尾不对应；时刻注意压住兔笼盖，避免转移途 中兔子挣脱。3. 耳缘静脉麻醉【实验方法】穿刺前准备工作:穿刺前应拔除待穿刺血管部位的兔毛，轻柔或以手指轻弹 待穿刺的血管使其充血扩张，或用酒精棉球涂擦待穿刺的血管使血管扩张。穿刺手法:左手食指和中指夹住静脉的近端,拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面， 右手持头皮针尽量从静脉的远端刺入。若回抽注射器有暗红色血液流出或注射时若无阻力、 无隆起现象，说明针头在血管内。移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液 缓慢注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。注：本实验所用麻醉药乌拉坦用药剂量为1000 mg/Kg。【注意事项】1.进针部位宜选择在耳缘静脉远心端的血管段，若穿刺失败，可向近心端前 移一段再进行穿刺；2. 可利用酒精棉球擦拭使耳缘静脉血管扩张，便于操作；3. 静脉注射必须缓慢（大概每分钟推送5ml），同时观察家兔肌肉紧张、角膜反射和对皮肤 夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，应立即停止注射。在注射麻醉药物时，可先用 麻醉药物总量的三分之二，密切观察动物生命体征的变化，若已达到预计麻醉效果剩余药液 可暂不注射，以避免麻醉过深抑制呼吸中枢导致动物死亡；4. 实验动物的固定【实验方法】将动物麻醉后，仰卧位固定于手术台上，颈部伸直，口腔与气管成一直线，保 持气管畅通。用粗麻绳打类蝴蝶结固定家兔四肢，用棉麻线套住家兔上切牙固定在兔台头端， 使家兔四肢和头部伸展并固定。【注意事项】 1.打结最好打利于捆缚的结，避免家兔挣脱。 2.尽量使颈部抻直，避免扭曲。5. 清理兔毛【实验方法】使用弯头兔毛剪剪掉实验部位兔毛。【注意事项】 1.左手捏住要剪的兔毛，方便剪掉后及时清理。注意不要将兔毛掕起，这样容 易剪到皮肤和皮下神经，引起兔子的强烈挣扎。2尽量清理干净，并且避免兔毛乱飞，可在废物桶中加水防止兔毛乱飘。6. 组织切开【实验方法】1.组织切开的一般原则(1) 根据实验目的要求确定手术切口的部位和大小。如肾切除取左背部斜切口，肠切除 取腹正中切口。(2) 根据不同部位的切口采用不同的执刀方法，常用的执刀方法有三种，如图1。 【注意事项】(1)切开前，应先将切口部位的皮肤(或其他组织)拉紧，使其平坦紧张而固定。(2 )刀刃与切开的组织垂直，以一次切开为佳。(3) 组织要逐层切开，并以按皮肤纹理或各组织的纤维方向切开为佳。图1执刀方法和组织切开方法(4) 组织的切开处应选择无重要血管及神经横贯的地方，以免将其损伤。(5) 选择切口时，应注意选择易于敷料或导管包扎和固定的部位。避免术后动物活动时 被碰撞、磨擦而脱落。7. 组织分离【实验方法】分离目的在于充分显露深层的组织或血管，便于手术操作。1. 组织分离的一般原则(1) 根据不同部位手术的需要采用不同的分离方法。常用的分离方法有两种：用刀或 剪作锐性分离，用剪割的方式将组织分离。该方法常用于致密组织，如皮肤、韧带、筋膜等 的分离。用止血钳、手指或刀柄等将组织推开或牵拉开的钝性分离。该法多用于皮下组织、 肌肉筋膜间隙等疏松组织的分离。(2) 沿正常组织间隙分离。这样易于分离，且出血少，视野干净、清楚。【注意事项】(1) 肌肉的分离应顺肌纤维方向作钝性分离。若需要横行切断分离，应在切断处上下端 先夹两把血管钳，切断后结扎两断端以防止肌肉中血管出血。(2) 神经、血管的分离应顺其平行方向分离。要求动作轻，柔，细心操作，不可避暴，切忌横向过分拉扯，以防断裂。8. 气管内插管 【实验操作】气管插管的目的主要是为了辅助呼吸、测定气道压力、通气量以及描记呼吸曲 线等。(1)气管的暴露和分离 切开皮肤后，对肌肉、气管、血管和神经的分离应用止血钳 进行钝性分离。钝性分离皮下组织，暴露颈部肌肉，分开颈部正中肌群即可看到气管。在甲 状腺下11.5cm处，用止血钳将气管后的软组织稍加分离，在气管下穿二条较粗的结扎线， 准备结扎固定气管插管之用。 气管插管 在甲状腺以下约12 cm处，用手术剪将气管软骨环剪一倒“T”型切口， 剪开气管口径约一半以上，用棉签向肺方向擦净气管内分泌物，然后再向肺方向插入气管插 管。用已穿好的粗线扎紧后，再在插管的侧管上打结，以防插管脱出。【注意事项】1.切忌粗暴操作，小心勿伤及甲状腺及气管两侧后方的静脉；2. 不要在软骨环之间的气管组织切开，因此处血管较多，如仍有出血，可用温湿纱布压拨 迫片刻，同时将兔台后部抬高，使兔头位置低下，以防止血液流入气管造成窒息，出血停止 后再做插管；3. 插管前注意检查气管内有无内分泌物，有的话先清理气管后插管；插管后，若气管内分 泌物或血液较多，可用一细塑料管从插管的侧管处将液体吸出。4. 用已穿好的粗线扎紧后，再在插管的侧管上打结，以防插管脱出；5. 气管插管的过程中应随时注意观察动物的呼吸变化。最好隔一段时间放开被夹闭的Y型管 软管，避免人为性呼衰。9. 颈总动脉的分离及插管 【实验操作】沿胸锁乳突肌前缘分离胸骨舌骨肌与胸骨甲状肌之间的结缔组织，在肌缝下 找到呈粉红色较粗血管，用手指触之有搏动感，即为颈总动脉。分离颈总动脉时应选在距 甲状腺以下较远地方开始，防止将甲状腺前动脉切断，用玻璃分针轻轻分离该动脉与神经 之间结缔组织，切勿损伤血管和神经。在分离好的颈总动脉下面穿过两根结扎线，先结扎 远心端，再用动脉夹夹闭血管近心端。于远心端结扎线前用眼科剪呈45角做V型切口， 剪开血管管径的1/31/2。将准备就绪的动脉导管插入血管2cm3cm，用备用线将导管与 血管牢固结扎并与远心端结扎线连接扎紧，以防导管滑脱出血管。取下动脉夹，可见导管 中有动脉回血，并随心跳而搏动。用少许肝素将回血推回血管内，实时观察血压。【注意事项】1. 分离颈总动脉时应选在距甲状腺以下较远地方开始，防止将甲状腺前动脉 切断，并且切勿损伤血管和神经。伴行血管的一束神经包括：迷走神经最粗且明亮；交感神 经次之，光泽较暗；最细的是减压神经；2. 为了便于动脉插管，颈总动脉应尽量分离得长一些。一般家兔4cm5cm，豚鼠和大鼠2c m3cm；3. 结缔组织尽量分离干净，否则插管时容易插到膜内；4. 两根结扎线可通过一根线对折穿过动脉下后剪断获得。远心端结扎线和备用结扎线一定 要结扎紧，避免出血；5. 动脉夹操作时一定要小心避免磨破动脉，最好将动脉夹深入颈总动脉下于动脉夹中段夹 闭血管，以防夹闭不完全；6. 插入血管内插管尽量长，此时易于固定。但是一定不要插到动脉夹夹闭处，因为插管和 动脉夹都是硬性材料，两厢触碰易使动脉管破裂；7. 喷血时，应迅速找到出血口，并及时夹闭近心端血管，并用棉球清理创面；若还是出血不 止，则考虑是否是远心端结扎线未扎紧，这时夹闭远心端；若各种措施都不起效，则可以考 虑完全结扎实验侧颈总动脉；8. 若是少量出血，则可能只是毛细血管受到损伤，这是可用棉球轻轻压迫创面即可止血。10. 输尿管插管【实验方法】下腹部剪毛，普鲁卡因局麻，在耻骨联合向上沿中线做长约4cm的切口，沿 腹白线切开腹膜，暴露出膀胱，并将膀胱翻向体外，在膀胱底部找到并分离两侧输尿管，在 输尿管靠近膀胱处用线结扎，略等片刻，待输尿管略充盈后，用眼科剪剪一小口，向肾脏方 向插入一根细塑料管，结扎，收集尿液。【注意事项】 1.家兔膀胱十分脆弱，分离时应用镊子探查，避免直接用手术刀或剪刀粗暴分 离；2. 输尿管位置较深，分离和插管时需一人协助拨开肠子和拉扯膀胱，此时需注意用力大小， 用力过大时膀胱会因尿液排出而迅速缩小（并不影响实验）；3. 如果可以，分离输尿管时避免损伤伴行血管，否则会大出血影响视线；4. 输尿管近膀胱处结扎后，可略等片刻，待输尿管略充盈后在剪口插管，会容易很多；5. 插管的管子剪口需有一定锐度，但锐度过高易损伤输尿管；插管时，可转动插管，使斜面 向下，否则易撕裂输尿管。11.处死【实验方法】空气栓塞法【注意事项】判断家兔死亡的标准可以是呼吸停止，这是可能生物电还存在波动，可能原因 是心脏自律细胞还在活动，但此时心脏功能细胞其实已经停止工作，故可以判定为死亡。12. 其他注意事项1. 创面长时间开放时，可撒些生理盐水或用生理盐水浸润的纱布覆盖，以防组织风干；2. 切开皮肤前，可少量多点注射局麻，避免家兔因损伤皮神经而剧烈反抗。13. 整体动物体征的观察及应对1. 兔耳耷拉，表示家兔饮水不足，这时需及时给家兔补充水分，否则会影响实验结果；2. 家兔呼吸急促并伴有鸣声，表示家兔呼吸系统有问题，气管插管时应注意清理气管，并在 不需要呼吸频率数据的时段打开Y型管软管，使呼吸通畅。时刻注意呼吸频率的变化。3. 当血压降低时，可能是失血过多，此时家兔可能已经休克。