实验一紫外分光光度法测定维生素C片中的VC含量

紫 外 分 光 光 度 法 测 定 维 生 素 C 片 中 的 V C 含 量一、实验目的1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法 3掌握紫外分光光度法测定水中维生素 C 含量的原理与分析条件的选择。二 、实验原理维生素C是人体重要的维生素之一，它影响胶元蛋白的形成，参与人体多种氧化-还原反应，并且 有解毒作用。人体不能自身制造Vc,所以人体必须不断地从食物中摄入Vc,通常还需储藏能维持一 个月左右的Vc。缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。维生素C属水溶性维生素，分子式c6h8o6。分子结构中具有二烯醇结构，其结构如下： 它易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚。分子中的二烯醇基具极强的还原性，性质活泼，易被 氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。维生素C分子结构中有共轭双键，固在紫外光区有较强的吸收。根据维生素C在稀盐酸溶液中，Vc吸收曲线比较稳定，在最大吸收波长处，其吸收值A的大小与 维生素C的浓度c的大小成正比，符合郎伯一比尔定律：A= be其中A为吸收度；e为试样中维生素C的浓度，molL-i； b为吸收池厚度，cm； 为摩尔吸收系数， Lmol-i cm-i。若在最大吸收波长下，首先绘制出维生素C在最大吸收波长下的标准曲线，然后在 相同条件下测定出吸光度A，由测得的吸光度A在标准曲线上查得浓度，换算为药品中含量（mg/片）。三、实验仪器与试剂1. 仪器TU1810型紫外分光光度计。电子天平1台，研钵1个，50mL容量瓶7只和500mL容量 瓶1只，10mL移液管2支，100mL、1000mL烧杯2只。2. 试剂维生素C标准品（抗坏血酸），市售维生素C含片（100mg/片），冰醋酸，蒸馏水。四、实验步骤1. 配制维生素C标准贮备液500mL（浓度约为1.5 X 10-4mol/L）:称取约0.0132g维生素C标准品于100mL的烧杯中，用超声波助溶后定容于500mL容量瓶中，摇 匀，配成贮备液。2. 配制标准系列：分别吸取上述贮备液1.00、2.00、4.00、8.00、16.00mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容。3. 确定最大吸收以蒸馏水为参比，在320220nm范围内测出维生素C的吸收光谱，并确定最大吸收波长。4. 绘制标准曲线以蒸馏水为参比，用上述标准系列溶液在九 处分别测出吸光度，并绘制标准曲线。max5样品测定取3片Vc片剂研细，准确称取0.02g于100mL烧杯中，以去离子水稀释至500mL。移取样品溶液 5.00mL于50mL容量瓶中，定容。在九 处测吸光度。m ax五、实验结果和讨论1. 绘制吸收曲线，确定最大吸收波长。2. 以标准溶液浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线图。3. 在标准曲线的纵坐标上找到试液的吸光度，然后在横坐标处查得相应VC的浓度。4. 计算维生素片剂中VC的含量。六、注意事项1. 维生素C会缓慢氧化成脱氢抗血酸，所以每次实验时必须配制新鲜溶液，并滴加几滴醋酸。2. 使用石英比色皿。3. 实验结束时，先关氘灯，再关主机电源开关。七、思考题1. 具有哪些结构特征的有机物常在紫外光区有吸收?2. VC 结构中有哪些生色团？那些助色团？