资源描述
莽页锻罩去糠钵泞邮绚酮玫金貌拷烂涛饺撩子蚂酗骏愧中酶婴履擒铱卒肪嗓闹铜怯潞器贿鸦镣阁携绵丙鸯眠卿刃访娘火喳馅掠出胸友沤奈硼砰魂彪笋浑锰乌纺竹掘废峪遵惜犊扳朽谎飘浴折辜亮压桨捷掂师勇檄佰它祥施竭秧章兆贺棉逞汀桌飘岸刹倦准蘸倪随者揭剃通屑噎蚕舆浊秆勃避庐拒升筹掷千仕呻砾懒级托篮户卤祟摄仓廓令袱跺皂耙锨船酸级礼嘎蹋娟疏聋咖窘馁祷病融虹亥舱碟筐吨莹幢誓抄郡靛膘权牛肚官锄慰泰韧怯造郎名柔仗阜仍肮乍缆绥技庄览数啮纶蟹坎亲劳藐狂镜妓翟驳寻矛晾偶冰志晓烷诣妙值河原写按邀逊无秃喂鲍烈学猜迷桥哺痕愈附牧侯待掠龚柏岸橡湘田菜烫商 试剂:蒸馏水,碘液,苏丹;胶水,阿拉伯树胶,白乳胶,HgCl,酒精,冰醋酸,甘油,蒸馏水,番红,固绿,二甲苯,甲醛,氯仿等. 实验材料:洋葱鳞叶表皮细胞制片,柿子.迂桩坞菜外眼琉扔灯琵筐虑旬鼓龚软份丑浓级耪茅鞍捡挂伎哲偿底价裴皋玻陵五抓辰骂久类雅点谓诱皮忘毋损斤包陀承藕管饭髓盾席判娱厄镐祝荒融醚缴占惠废卜窘烬挟砸硷崭序寄判最白喜厘诵阴记迢明魁府漏惠篇颧主脆牟闺寞僻燎是挠碰酒坝火厉画染篡霹陷佑蒜康喇衰留丹柒酥灾窟暇呐鸥猪愉闰绳灌瓣诞德门白稳整钡悍蚊发拾敷朵汉恐垄骗练娜循葵囊喻饲绕跪凝贷趾烽村繁主旷微土扭摄蔬追瘪漱劫淖拔环功稗峡屈碾少术继厩技基秃巢崖理壹涛次饼岳常头甫际互港服只肩瀑枚沏月硬巷聊命父赶并移擦歉翠娘痘揽羊垄津樊仕瑞党香差嗽桐兜催汞竖石职盗谐恫彦挖顽傣枕瘟邱晴潭园艺专业实践教学指南赃龋裸纤狱菜则市挞驹妹趴格肪谦颇芍恍祈海谢耶盐怎栓底腊卧醇汹盼予棱欣钱挣慰坛们面只刃筑姿墟亢败睦阔彤收荚捣楔猎层笑史夷锨汤娘梧蝇信吓世才枝惧鄂焙肃满赘拢伎亮蔽咸锯亥芜碧赘红唉鬼桓旦给嫡躁擦藻轿忽就升蘑绳咒总案驰察姐荷赔迭茹坪躁弄髓督铜麓稚聘雾夯试嫡戍争言励菱洗钓瓶络泊氦卢掉戈禄敲牲羚训卤桃位闪瘩瑚绪鸣稼庙喧杰茂成钳马梅货娩罕秒瘟乓锣逾曙孩老穴糙反嘻渴磷勺霖骄舰服代松朋密仆央踩兽坠绊诈丑本恭鸣似拣知早属麻愈物牛这讥琢雹翌康缮第仙玫琳透痊奖腐创系店奢历消憨舅氦然犊揪敲支硫膀锈瘫燎幻桩币牢驾盈医气诅彝砷兄芬狰嫡坎园艺专业实践教学指南主 编:何长征副主编:谢深喜 于晓英 宋 勇参 编:石雪晖 李大志 龙桂友刘昆玉 刘明月 杨国顺王仁才 艾 辛 蔡雁平夏志兰 邓子牛 唐贤巩主 审:钟晓红 张宏志 目 录植物学实验技术课程教学大纲5生物化学与分子生物学实验技术课程教学大纲23农业气象学实验教学大纲39植物生理学实验技术课程教学大纲50土壤肥料学实验教学大纲61园艺研究法实验教学大纲65园艺植物育种学实验教学大纲69园艺植物栽培学实验教学大纲75蔬菜栽培学各论实验教学大纲82食用菌实验教学大纲86果树栽培学各论实验教学大纲91观赏植物栽培学各论实验教学大纲95造园学实验教学大纲99植物学教学实习教学大纲102园艺学实践教学大纲114生产实习教学大纲158毕业实习教学大纲164植物学实验技术课程教学大纲(本大纲对应于2007年版专业人才培养方案)1实验课程号:20001B62课程属性:必修3实验属性:独立设课4学时学分:总学时:20学时、总学分:1学分5实验应开学期:2(春季)6先修课程:生物学基础 一、课程的性质与任务:植物实验技术作为一门独立的课程,具有技术课程的特点,或作为植物学的一个重要组成部分植物学基本技能,和植物学理论教学具有同等的地位和作用。是直观地认识、了解植物的重要途径。植物学实验技术以理论知识为指导,对植物的生长、发育,植物各部分形态特征、结构特点及各种组织之间的相互关系进行显微镜观察、分析和论证。进一步加深学生对基础理论知识的理解和认识。同时通过实验操作技能训练,提高学生的动手能力、独立分析问题和解决问题的能力以及创新思维的能力。二、实验教学目的与基本要求: 植物学实验独立成一门课程或植物学教学的一个重要方面,对于加深对植物学理论的充分理解,培养学生的独立思维与创新能力、提高学生的实验操作动手能力很有必要,是培养高素质创新人才的有效途径。实验中设置的显微镜观察植物各部分形态,结构的内容,其目的是使学生加深对理论知识的认识;培养他们严谨求实的作风和观察识别、综合分析的能力。基础知识和基本技能训练,着重培养学生形象思维和动手的能力,同时使学生掌握基本的实验技能与研究方法,为学习后续课程和科研工作奠定基础。在实验教学过程中,要求学生始终严谨,规范的进行操作,耐心,细致的进行观察,独立思考,综合分析实验结果,充分理解后认真地完成实验报告。三、实验考核方式及办法:植物学实验技术总成绩为100分。综合表现分10分:依到课情况、实验态度、打扫卫生、动手能力印象等综合表现而定。实验报告分70分:每次实验提交实验报告,根据实验报告内容评定成绩。实验考试分20分:根、茎、叶等的徒手切片10分,显微镜使用5分,结构识别5分。四、实验及实习项目一览表:植物学实验技术课程项目一览表序号实验项目名称实验类型实验要求适用专业学时1显微镜的构造和数码显微互动系统的使用方法、细胞基本结构及贮藏物质观察验证性必修植物生产类4 2植物细胞的分裂及组织观察 验证性必修植物生产类4 3植物营养器官的形态结构观察综合性必修植物生产类44植物生殖器官的形态结构观察验证性必修植物生产类45植物代表类群的特征观察验证性、综合性必修植物生产类4五、实验项目的具体内容:实验一:显微镜的构造和数码显微互动系统的使用方法、细胞基本结构及贮藏物质观察1本次实验的目的和要求 了解普通光学显微镜的构造和各部分性能,学习和掌握数码显微互动系统的使用方法。 学习生活细胞观察方法,掌握植物细胞基本结构,了解质体类型及特点。 了解植物细胞贮藏物质的主要类型和贮藏方式。 学习临时制片方法和生物绘图方法。2实验内容或原理 数码显微互动系统、显微镜构造、使用、保养。 细胞基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、胞间连丝和纹孔,观察永久片。 质体:杂色体、白色体、叶绿体。自作临时装片进行观察。 植物细胞贮藏物质:淀粉、脂肪、蛋白质。自作临时装片进行观察。3需要的仪器或试剂等 器具:数码显微互动系统、光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、擦镜纸、纱布块。 试剂:蒸馏水、碘液、苏丹 实验材料:洋葱鳞叶表皮细胞制片、柿子胚乳细胞切片、新鲜红辣椒果实、新鲜黑藻嫩枝条、新鲜白萝卜、新鲜马铃薯块茎、花生或蓖麻种子。4实验步骤1)Motic数码互动显微镜系统操作 打开显微镜的电源开关(背后),适当调整底座上的亮度,调节手轮(右手侧),此时底座内灯亮。 按住电源开关旁边的红色按钮,打开CCD电源。 将显微镜头部上的拉杆拉出至最后一档,此时,显微镜处于即可目视观察,又可进行CCD摄影状态。学生显微镜中的视野出现在教师的服务器中。 轻轻旋转显微镜头部左手侧外圈旋钮,视场中出现光标。可通过外圈旋钮调整光标亮度。内圈手轮摆动调整光标方向。 将聚光镜调至最高点,成象效果最佳。按常规操作方法,将显微镜调整在正常工作状态。 使用完毕,调节亮度手轮至最小,关掉显微镜电源。 认真做好使用记录。2)普通光学显微镜的使用 取放:拿取显微镜时,应一只手握住镜臂,另一只手平托镜座。将显微镜放置在座位桌子左侧距桌边510cm处,装配好适当的目镜或否。 对光:对光时,先将低倍物镜对准通光孔,用左眼或双眼观察目镜。然后,调节反光镜或打开内置光源并调节光强,使镜下视野内的光线明亮、均匀又不刺眼。 低倍镜使用:将玻片标本放置在载物台上固定好,使观察材料一定正对着通光孔中心。转动粗调焦轮下降物镜距玻片5mm处,接着用双眼注视镜筒,再慢慢用粗调焦轮上升物镜,直到看见清晰的物像为止。 高倍镜使用:使用前应在低倍镜下选好欲观察的目标,并将其移至视野中央,然后转高倍镜至工作位置。视野变暗且物像不清晰时,可调节光亮度和细调焦轮。 油镜使用:在高倍镜下将要观察的部分移至视野中央,上升镜筒约1.5 cm,然后转油镜至工作位置。在盖玻片要观察的位置上滴一滴香柏油,慢慢下降镜筒,使之与油滴接触,然后慢慢调节细调焦轮上升镜筒到物像清晰。(不建议使用) 调换玻片:观察时如需调换玻片,要将高倍镜换成低倍镜,取下原玻片,换上新玻片,重新从低倍镜开始观察。 使用后整理:观察完毕后,上升镜筒,取下玻片,将物镜转离通光孔呈非工作状态,放上擦镜布,按原样收好显微镜。 使用注意事项:使用时一定严格遵守操作规则,不许随意拆修。 随时保持显微镜清洁。观察临时装片时,一定要将盖玻片四周溢出的水或其他液体用吸水纸吸干净,以免污染镜头。已被污染的镜头要用镜头纸擦试。 观察时,坐姿要端正,双目同时张开,切勿睁一眼、闭一眼或用手遮挡一只眼。 观察玻片时,一定要按先低倍、后高倍物镜顺序使用。细调焦轮是在观察到物像而不够清晰时使用,切忌沿同一方向不停地转动细调焦轮。3)细胞基本结构观察 植物细胞基本结构 取洋葱鳞叶表皮细胞制片或用新鲜材料撕取表皮制临时装片观察:高倍镜下:细胞壁、细胞质、细胞核,核仁。 质体及胞质环流 叶绿体:取新鲜黑藻接近茎尖的叶片制成临时装片观察:细胞为狭长形,内含大量叶绿体。高倍镜下观察:近叶片中脉或边缘处的某些细胞内叶绿体在循一定方向环形流动。 有色体:另用镊子取少量新鲜红辣椒靠近果皮的果肉细胞制成临时装片观察,高倍镜下:近圆形细胞,内含许多红色颗粒有色体。 白色体:再用镊子取少量新鲜萝卜细胞制成临时装片观察,高倍镜下:近圆形细胞,个别细胞内含许多白色颗粒白色体。 胞间连丝和纹孔 取柿子胚乳细胞切片观察,高倍镜下:多边形细胞,很厚的初生细胞壁,呈圆形深色的原生质体,许多穿过细胞壁的胞间连丝。另外在红辣椒果皮细胞临时装片:细胞形状不规则,细胞壁很厚,壁上有纹孔,使细胞壁呈念珠状。4)植物细胞贮藏物质 淀粉:切取马铃薯块茎薄片或将新鲜马铃薯切口处的浆液制成临时装片,显微镜下可见细胞内含许多卵圆形或椭圆形颗粒淀粉粒。高倍镜下将光线适当调暗,可见马铃薯淀粉粒依脐点和轮纹不同有单粒、复粒和半复粒三种类型。 蛋白质:用刀片将花生子叶横切,在其切面上刮取少许粉末加碘液制成临时装片。低倍显微镜下:细胞内含许多糊粉粒(贮藏蛋白质);高倍镜下:糊粉粒外为淡黄色薄膜,内含1个无色球晶体和1至数个黄褐色拟晶体。 脂肪:同样取上述切片加苏丹制成临时装片,显微镜下可见细胞内有许多大小不等的球形或不规则形状的橙红色的小油滴,即脂肪。5)临时制片方法 清洁玻片:要求无色、平滑、透明度好,使用时应将载玻片和盖玻片用纱布擦试干净。若玻片很脏,可用酒精擦试或用碱水煮片刻,在用清水洗净擦干。 滴水:将干净载玻片平放于桌面上,用吸管在玻片中央加一滴水(也可是其他染液)。 取材:用镊子撕取或挑取新鲜材料,注意材料不要过大或过多,立即放入载玻片水中或染液中。如为表皮,要将其展平不重叠。 加盖玻片:用镊子轻夹盖玻片的一边,使相对另一边先接触载玻片上的水滴,而后慢慢地把盖玻片轻轻盖在材料上,避免产生气泡,最后要用吸水纸将溢出的液体吸干净。 加染液染色:染液染色也可在用水加盖玻片后进行。方法是滴一滴染液在盖玻片旁,用吸水纸在另一边吸直到染液充满为止。良好的装片标准是:材料无皱折,不重叠,水分适宜,无气泡。6)生物绘图方法 根据绘图纸张大小和绘图的数目,安排好每个图的位置及大小,并留好注释文字和图名的位置。 将图纸放在显微镜右方,依观察结果,先用HB型铅笔轻轻勾一个轮廓,确认各部分比例无误后,再把各个部分勾画出来。 生物绘图通常采用“积点成线,积线成面”的表现手法,即用线条和圆点来完成全图。绘线条时要求所有线条都均匀、平滑,无深浅、虚实之分,无明显的起落笔痕迹,尽可能一气呵成不反复。圆点要点得圆、点得匀,其疏密程度表示不同部位颜色深浅。 绘好图之后,用引线和文字注明各部分名称。注字应详细、准确,且所有注字一律用平行引线向右一侧注明,同时要求所有引线右边末端在同一垂直线上。在图的下方注明该图名称,即某种植物、某个器官的某个制片和放大倍数。注意所有绘图和注字都必须使用HB型铅笔,不可以用钢笔、圆珠笔或其他笔。5教学方式 第一部分,对着实物边讲、边示范,学生动手操作。 第二、三、四部分,讲清楚细胞结构各部分存在位置及质体形态特征、根据淀粉粒的类型及其形态特征、贮藏蛋白的形态特征、各种切片进行观察辨别,直到掌握认识。6考核要求 能熟练使用Motic数码互动显微镜系统,正确使用低倍镜和高倍镜。了解植物细胞的特点及其与动物细胞的区别。能准确辨认各种质体和淀粉粒。7实践教学报告要求 绘12个洋葱鳞叶表皮细胞图并引线注明个部分名称。 绘三种类型的淀粉粒图,并引线注明。实验二 植物细胞的分裂及组织观察1实验的目的和要求 了解植物细胞分裂的主要方式及生物学意义。 了解植物有丝分裂和减数分裂的基本过程;掌握不同分裂时期细胞的特点及有丝分裂和减数分裂的区别和联系;了解染色体基本形态和结构特征。 了解各类植物组织的分布、形态结构特征、功能及相互区别。 了解气孔器的结构和功能。2实验内容或原理 细胞分裂:观察酵母菌细胞的出芽生殖;洋葱根尖细胞的有丝分裂;玉米减数分裂。 植物细胞贮藏物质:制作临时装片观察淀粉粒、贮藏蛋白质及脂肪的形态结构。 利用鲜材料临时制片和永久切片观察各种组织。3需要的仪器或试剂等 器具:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、擦镜纸、纱布块。 试剂:蒸馏水、碘液、苏丹。 实验材料:洋葱根尖纵切制片、玉米减数分裂制片、新鲜甜酒汁、新鲜马铃薯块茎、花生及蓖麻种子;洋葱根尖纵切制片、南瓜茎纵切制片、葡萄茎离析制片、蚕豆茎横切制片、椴树茎横切制片、杨树茎横切制片、天竺葵叶或其他叶片横切制片、天竺葵叶下表皮制片、鸢尾叶下表皮制片、新鲜白菜叶、新鲜梨果实。4实验步骤1)细胞分裂 有丝分裂:取洋葱根尖纵切制片,观察植物细胞有丝分裂过程。将切片先在低倍镜下找到分生区并移至视野中央,再转换至高倍镜,找到具分裂相的细胞,选择前期、中期、后期和末期典型细胞进行观察比较。 减数分裂:取玉米减数分裂制片,高倍镜下选择观察植物细胞减数分裂各时期特点。 无丝分裂:取鲜甜酒汁一滴制成临时制片,观察单细胞卵圆形的酵母菌出芽生殖。2)植物组织 分生组织:取洋葱根尖纵切制片,在低倍镜下观察原分生组织和初生分生组织。 薄壁组织:取各类叶横切制片观察叶肉细胞同化组织。 保护组织: 初生保护组织结构:取新鲜白菜叶,撕取其下表皮制成临时装片观察双子叶植物表皮结构、气孔器;有的植物表皮上分布有表皮毛或腺毛;次生保护组织结构:取椴树茎或杨树茎横切制片观察周皮结构:木栓层(死细胞)、木栓形成层与栓内层。在局部区域木栓形成层向外分裂产生薄壁细胞,形成次生通气组织皮孔。 厚角组织:取蚕豆茎横切制片观察:表皮下方具棱角的部分即为厚角组织,其细胞壁在细胞的角隅处加厚,具叶绿体。 厚壁组织:取葡萄茎离析制片观察:红色的长梭形木纤维细胞,细胞壁:全部加厚、并大多木质化;新鲜梨果肉靠近中部的部分挑取一个沙粒状的组织置于载玻片上压碎,滴一滴碘液盖上盖玻片,制成临时制片观察:石细胞:颜色较暗,多边形,细胞壁异常加厚,细胞腔很小,具有明显的纹孔沟。 输导组织:取南瓜茎纵切制片观察:红色区域木质部:低倍镜下:多种类型的导管:花纹,穿孔;高倍镜下:螺纹导管,网纹导管。蓝色区域韧皮部:低倍镜下:口径较大的长管状细胞筛管细胞。高倍镜下:筛板,筛孔,联络索;细长的伴胞:细胞质浓,具细胞核。另在上述的葡萄茎离析制片:梯纹导管。 分泌结构:取各类叶片横切制片观察:叶表皮上有多细胞构成的腺毛结构,主脉薄壁细胞中有圆型空洞,即为分泌腔结构。5教学方式讲解观察材料的形态特点,以及观察中注意事项和要领,学生动手制片观察。采用永久切片进行观察辨别细胞分裂的主要方式和各时期特点。无丝分裂用甜酒新鲜材料观察出芽生殖;采用新鲜材料观察辨认三种主要贮藏物质存在形式及检验方式。先讲解各种组织的形态特点、存在部位,再进行各类组织永久制片或临时制片的观察。6考核要求能识别细胞(酵母菌)的出芽生殖及有丝分裂和减数分裂各时期特点。了解植物细胞贮藏物质的主要类型和贮藏方式。能识别各种组织,并了解其功能。7实践教学报告要求 绘洋葱根尖细胞有丝分裂各时期图。(必选) 列表比较细胞有丝分裂和减数分裂的异同点。(任选) 绘三种类型的淀粉粒图,并引线注明。(任选) 绘白菜叶表皮细胞及气孔器结构图,并引注各部分名称。(必选) 绘12个网纹导管(或梯纹导管)和螺纹导管细胞图。(任选) 绘12个石细胞结构图。(任选) 绘筛管细胞和伴胞结构图。(任选)实验三 植物营养器官形态结构的观察1实验的目的和要求 了解根尖分区及细胞特点,并加深理解根的生理功能。 了解根的内部结构特点,侧根发生及根瘤形态。 了解茎的构造与其功能的相关性。 了解叶片的外部形态和内部结构特征,理解叶片结构与功能的关系。 观察植物营养器官的变态类型和特点,了解其生理功能和生活环境的适应。2实验内容或原理 观察根尖分区:根冠、生长点、伸长区、根毛区(成熟区)。 比较观察单子叶和双子叶植物根初生结构。 观察双子叶植物根次生结构。 切片观察双子叶植物茎的初生构造和次生构造。 切片观察单子叶植物茎的构造。 切片观察双子叶植物和单子叶植物叶的构造特点。比较观察旱生植物叶片结构特征。 利用挂图、浸制或干制标本,观察根、茎、叶变态类型。3需要的仪器或试剂等 器具:显微镜、放大镜、镊子、根的结构模型。 试剂:蒸馏水、碘液 材料:豌豆根瘤浸制标本、棉花幼根横切面永久制片、棉花老根横切面永久制片、蜜橘老根横切面永久制片、黄瓜老根横切面永久制片、水稻根横切面永久制片、葱根横切面永久制片、洋葱根尖纵切面永久制片。棉花幼茎横切面永久制片、棉花老茎横切面永久制片、椴树茎横切面永久制片、杨树茎横切面永久制片、水稻茎横切面永久制片、竹茎横切面永久制片、各类型变态茎浸制或干制标本,棉花叶横切面永久制片、水稻叶横切面永久制片、夹竹桃叶横切面永久制片、松针叶横切面永久制片、各类叶片和复叶干制标本、各类型变态根浸制或干制标本、各类型变态茎浸制或干制标本、各类型变态叶浸制或干制标本,各类型变态根叶浸制或干制标本,营养器官变态挂图。4实验步骤1)根尖的分区取葱根尖纵切面永久制片在低倍显微镜下观察。根尖可分为四个区,由尖端开始:根冠区;分生区(生长点);伸长区;根毛区(成熟区)。2)双子叶植物根的内部结构 根的初生结构:取棉花幼根横切面永久制片置于低倍镜下观察,分清表皮、皮层和中柱(维管柱)三部分结构,而后转为高倍镜由外至内仔细观察。 根的次生构造:取棉花老根横切面永久制片置于低倍镜下观察,外为周皮,内为中柱(维管柱)。而后转为高倍镜由外至内仔细观察。另取黄瓜老根横切面永久制片观察,与棉花根相比其特点是: 维管束为三束,因此射线十分明显且较宽。 维管形成层不很明显。 韧皮纤维呈蓝色,细胞壁厚且成束存在,清晰可见。再取蜜橘老根横切面永久制片观察,其特点是: 周皮明显,韧皮部呈蓝色,但韧皮纤维呈红色。 次生木质部发达,导管数量多,口径大,排列紧密。 髓部细胞略有木质化增厚。3)单子叶植物根的内部构造 葱根:与棉幼根结构基本相似,但具有如下特点:皮层:较发达,内皮层有明显的五面增厚,横切面上呈马蹄形加厚,外切向壁不加厚。在木质部放射角处有通道细胞。初生木质部:具有5或6个放射角,既5或6束。导管被染成红色,十分明显。根的最中央被大导管占据,所以无髓部。 水稻根:取水稻老、幼根横切面制片观察。4)侧根的发生观察水稻根横切面制片,可见侧根的形成情况。5)根瘤观察紫云英植株及浸制的豌豆根瘤标本,可见其根上有许多膨大的小瘤,即根瘤。6)双子叶植物茎的构造 茎的初生构造:取棉花幼茎横切面永久制片观察,从内向外其结构为:表皮;皮层;维管柱:中柱鞘不明显,包括维管束、髓和髓射线。 茎的次生构造:取棉花老茎横切面于显微镜下观察:周皮:木栓层、木栓形成层、栓内层;皮层:不发达;维管柱:维管束:初生韧皮部、次生韧皮部、维管形成层、次生木质部、初生木质部、维管射线;髓射线:漏斗状。椴树茎横切面永久制片观察:周皮:数层,有皮孔; 皮层:有含晶异细胞; 木质部:清晰的年轮、髓及髓射线。杨树茎横切面永久制片观察: 周皮:细胞粉红色扁平砖形; 次生木质部:导管数量多,口径较大。7)单子叶植物茎的构造 取水稻茎横切面永久制片观察,其茎初生结构特点如下: 表皮:茎最外一层,外壁常有角质或硅质突起,并有少量气孔分布。 基本组织:薄壁细胞,厚壁细胞(机械组织),外轮维管束,内轮维管束,髓腔。 维管束:两轮,维管束鞘,“V”字形管束开口端:一个较大的孔纹导管,下部尖端:环纹或螺纹导管,原生木质部腔隙,木纤维、木薄壁细胞。韧皮部:筛管,伴胞。另取竹茎横切面永久制片观察:不具髓腔,维管束数量多,星散分布于薄壁细胞中。8)叶的形态观察浸制或干制标本,了解叶的形态、复叶类型、叶的组成和叶序的类型。9)双子叶植物叶片的构造取棉花叶横切面永久制片观察,显微镜下可见下列结构: 表皮; 叶肉:栅栏组织,海绵组织;侧脉(维管束):维管束鞘,木质部和韧皮部;分泌腔; 叶脉:主脉:机械组织、基本组织、木质部、薄壁细胞、韧皮部、形成层。10)单子叶植物叶片的构造取水稻叶横切面永久制片观察,与棉花叶相比其特点如下: 表皮:硅质突起,表皮毛;气孔器:2副卫细胞,2保卫细胞,孔下室;上表皮两叶脉之间:倒扇形泡状细胞(运动细胞)。 叶肉:不分化,细胞形状不规则,排列紧密,细胞壁具有内摺,细胞内含叶绿体多。 叶脉:主脉:多数维管束,薄壁细胞,厚壁细胞,大的气腔;侧脉:具维管束鞘。叶脉近表皮处:均有机械组织。11)旱生植物叶片的结构取夹竹桃叶横切面永久制片观察,其叶片适应干旱环境的特点是: 表皮:上表皮:23层厚壁细胞组成复表皮,角质层厚;下表皮:凹陷的气孔窝,气孔,窝内有表皮毛。 叶肉:栅栏组织极发达,近上、下表皮均有,多层。细胞间隙小,含叶绿体较多。 叶脉:主脉为双韧维管束。12)裸子植物叶片的结构特点 取松针叶横切面永久制片观察:表皮细胞壁厚;气孔器:下陷,2保卫细胞,2副卫细胞;下皮层:表皮内方,几层厚壁细胞组成;叶肉:皱褶细胞,分布有树脂道。内皮层:叶片中央,一圈厚壁细胞,两束维管束;转输组织:内皮层和两束维管束之间,转输薄壁细胞和转输管胞组成。13)营养器官变态类型的观察观察标本及挂图,掌握营养器官变态类型、特征和代表植物。 根的变态类型 A、贮藏根: 肉质直根:观察萝卜等标本:由主根肥大而成,次生结构,三生结构,次生木质部厚;胡萝卜横切面:次生韧皮部发达。 块根:观察甘薯等标本。块根也是由次生生长和三生生长增粗的。B、气生根: 支柱根:观察玉米等标本。 攀缘根:观察常春藤等标本。 寄生根:观察兔丝子标本。 茎的变态类型A、地下茎变态类型: 块茎:观察马铃薯:由地下茎末端膨大而成,其上有顶芽,叶退化留有叶痕,其叶腋部是凹陷的芽眼,每个芽眼内可产生一至多个腋芽,芽眼下面有退化的鳞叶称芽眉。 根状茎:观察莲藕、竹鞭等:匍匐生于地下,形似根,具有明显的节和节间,节上有鳞片状叶,其内方有腋芽,节上生有不定根。 鳞茎:观察洋葱:圆盘状,鳞茎盘:下生有不定根,1顶芽,许多肥厚的鳞叶:叶腋有腋芽,最外围有膜质鳞叶。 球茎:观察荸荠:球形或扁球形,肉质,节和节间,干膜状鳞片叶,腋芽。B、地上茎变态类型: 茎(枝)刺:观察皂荚等标本:茎刺由腋芽发育而成,不易剥落。 茎卷须:观察葡萄、南瓜等标本:茎卷须由顶芽或腋芽变态而来,多发生在腋芽。 叶状枝(茎):观察竹节蓼等标本:茎扁化成绿色叶状体,叶完全退化或不发达。 肉质茎:观察仙人掌等标本:茎变得肉质多汁,而叶往往退化为刺。 匍匐茎:观察蛇莓等标本:茎细长,匍匐生于地面上,顶端生根出芽,节上生根。 叶的变态类型 叶卷须:观察豌豆等标本:复叶顶端的23对小叶变成了卷须。 鳞片叶:观察洋葱等标本:其鳞茎盘上的肉质和膜质叶都为鳞片叶。 叶刺:观察仙人掌等标本:肉质茎上具叶刺;观察刺槐叶:基部有一对变态托叶刺。 捕虫叶:观察茅膏菜、猪笼草标本:叶变态成为盘状或瓶状。 苞片和总苞:观察棉花:花萼外有3片苞片(副萼);玉米雌花序:基部具总苞。 叶状柄:如台湾相思树的叶片退化,而叶柄变态为扁平叶状体。5教学方式利用新鲜标本、浸制标本、挂图、永久片,通过讲解后观察,让学生掌握实验中的内容。6考核要求 掌握根尖的结构特点; 掌握根初生结构的特点:内皮层、凯氏带、本质部外始式等; 了解双子叶植物根由初生生长转入次生生长的原因和过程,掌握根次生构造; 掌握双子叶植物的出生于次生结构及单子叶植物茎的结构特点及其相互之间的区别; 掌握双子叶植物和单子叶植物叶的结构特点及区别;能够辨别日常生活中接触的食物有哪些属于变态器官,分别属于哪一类变态器官。7实践教学报告要求 绘棉花幼根横切面简图,并引线注明各部分名称。(必选) 绘棉花老根横切面详图,并引线注明各部分名称。(任选) 绘水稻、小麦或玉米一束维管束详图,并引线标注。(必选) 绘棉花老茎次生结构简图,并引线注明各部分名称。(任选) 绘棉花叶横切面结构部分详图(包括主脉),并引线标注。(任选) 绘水稻叶横切面结构简图,并引线注明各部分名称。(任选) 将所观察与了解的营养器官的变态类型列表归纳。(任选)实验四 植物生殖器官的形态结构观察1实验目的和要求 了解花的各个组成部分的形态结构和功能。 掌握花药及子房的基本结构及其特点。 了解被子植物花序类型、果实类型和结构,为学习被子植物分类知识奠定基础。 了解无胚乳和有胚乳种子(颖果)的构造。2实验内容或原理 新鲜花解剖,了解花的各个部分的形态结构。 观察百合、棉花、油菜等花药和子房的纵、横切面切片,掌握子房和花药基本结构。 各种花序类型和果实类型标本的观察。 观察蚕豆种子和玉米颖果的解剖结构。3需要的仪器或试剂等 实验器具:显微镜、放大镜、镊子、花与果实的模型 实验材料:油菜子房横切面永久制片、百合子房横切面永久制片、棉花子房横切面永久制片、油菜花药横切面永久制片、百合花药横切面永久制片、十字形花科和豆科及禾本科植物新鲜花材料、花序和果实标本及挂图、蚕豆种子、玉米颖果。4实验步骤 花的构造 取油菜、白菜、萝卜的新鲜花解剖观察:十字形花冠,四强雄蕊。 取豆科植物(如紫云英)的新鲜花解剖观察:蝶形花冠,二体雄蕊。 取禾本科植物(如水稻)的新鲜花解剖观察:外稃,内稃,浆片,雄蕊,雌蕊。 小麦的麦穗:由小穗组成,每小穗外有2颖片,包括37朵小花,上部小花通常不孕。 花药的结构 百合花药:取幼嫩百合花药横切面永久制片观察雄蕊花药结构:药隔,药隔维管束, 4个花粉囊:表皮,药室内壁,中层,绒毡层:最内层,花粉母细胞;成熟花药:表皮,药室内壁纤维层,中层和绒毡层痕迹,大量成熟的花粉粒。 油菜花药:油菜花药横切面结构与成熟百合花药横切面结构相似。 子房的结构 油菜子房:取油菜子房横切面永久制片观察:2心皮组,假隔膜,假两室,腹缝线,侧膜胎座,背缝线,背束。 百合子房:取百合子房横切面永久制片比较观察:3心皮,3室,中轴胎座,胚珠。 棉花子房:取棉花子房横切面制片观察:4心皮,中轴胎座,每室2胚珠。 花序类型的观察 总状花序类(无限花序): A总状花序:观察油菜、萝卜或荠菜等植物的花序。B圆锥花序(复总状花序):观察女贞、水稻等植物的花序。C穗状花序:观察车前、马鞭草等植物的花序或小麦的小穗。D复穗状花序:观察小麦花序,它的花序总轴每一个分枝为穗状花序。E肉穗花序:观察玉米的雌花序。F葇荑花序:观察柳树、桑树、枫杨等植物的花序 G伞房花序:观察梨、棠梨等植物的花序。H伞形花序:观察樱桃、韭菜、薤子等植物的花序。I复伞形花序:观察胡萝卜、芹菜的花序。J头状花序:观察向日葵、金盏菊等植物的花序。K隐头花序:观察无花果等植物的花序。 聚伞类花序(有限花序): A单歧聚伞花序:卷伞花序:观察附地菜的花序;蝎尾状聚伞花序:唐菖蒲的花序。B二歧聚伞花序:观察卷耳、繁缕的花序。C多歧聚伞花序:观察泽漆的花序。 果实类型和结构的观察 单果:一朵花中仅有一枚雌蕊,形成一个果实。果皮可分为外、中、内三层。A. 肉质果:果实成熟后果皮或果实其他部分肉质多汁。a. 浆果:观察葡萄、番茄、茄子果实浸制标本;b. 柑果:观察柑橘类植物果实果;c. 瓠果:观察葫芦科植物瓜类果实的横切面或纵切面;d. 梨果:观察苹果、梨的果实;e. 核果:观察桃、李、梅、杏枣等果实。B. 干果:果实成熟时,果皮呈干燥状态。有的开裂,称裂果;有的不开裂,称闭果。a. 裂果:果实成熟后果皮开裂。因构成果实的心皮数目和开裂方式不同分为:蓇葖果:观察梧桐、小乌头的花;荚果:观察豆类植物的花;角果:观察十字花科植物的花;蒴果:观察棉花:背裂,牵牛花:腹裂,车前草:盖裂,罂粟:孔裂。b. 闭果:果实成熟后果皮不开裂。分为:瘦果:由13心皮组成,内含一粒种子,成熟时果皮、种皮分离,如向日葵;颖果:观察水稻、玉米等;坚果:观察板栗;翅果:观察三角枫、臭椿; 双悬果:观察芹菜、胡萝卜; 聚合果:观察莲:聚合坚果;八角:聚合蓇葖果;草莓:聚合瘦果;悬钩子:聚合核果。 聚花果(复果):观察:桑椹、菠萝、无花果。 种子的结构观察 无胚乳种子:取浸泡后成为湿软状态的蚕豆种子观察:种皮,种脐,种孔,种脊。剥开种皮:胚根,两片子叶,胚轴,胚芽。 有胚乳种子:取浸泡后的玉米种子(即颖果)进行观察:果柄,脐;用刀片垂直颖果宽面沿胚之正中纵切成两半,用放大镜观察切面:一层愈合的果皮和种皮;大部分是胚乳(切面上加一滴碘液,胚乳部分马上变成蓝色;胚在基部一角,遇碘呈黄色);胚:上部有锥形胚芽(外有胚芽鞘),下部有锥形的胚根(外有胚根鞘),位于胚芽和胚乳之间的盾状物为盾片,胚芽与胚根之间和盾片相连的部分为胚轴。5教学方式 花的组成部分:带学生动手解剖各种具代表性的新鲜花。 观察多种花药和子房切片,然后绘图,描绘其结构。 花序类型和果实类型通过讲解和观察挂图、实物进行了解。 带学生动手解剖真果和假果,了解其结构。 带学生动手解剖有胚乳种子和无胚乳种子,了解其结构。6考核要求学会以花程式描述花的结构;掌握花药与子房的基本结构。了解各种花序类型和果实类型。联系实际把各种果实归类,了解它的实用价值。了解两类不同类型的种子的结构。7实践教学报告要求 写出油菜花(十字花科植物)和紫云英花(豆科植物)的花公式。(必选) 绘百合未成熟花药横切面详图,并引线注明。(必选) 绘油菜子房和棉花子房横切面简图,并引线注明。(任选) 联系实际把各种果实归类,了解果实的类型及其结构特点及其实用价值。(任选) 绘出各类花序的模式图。(任选) 绘蚕豆种子和玉米颖果的结构图,并引线注明各部分名称。(必选)实验五 植物代表类群的特征观察1实验的目的和要求 低等植物代表类群的特征观察:了解低等植物各类群的主要特征、形态结构、生活习性、生殖方式及与人类的关系;掌握低等植物的生活史,进而了解低等植物进化地位与世代交替的含义;了解和识别低等植物的常见种类,学习观察和鉴定低等植物的基本方法。 高等植物代表类群的特征观察:通过观察,了解高等植物不同类群的形态结构特征及生活史特点,进而了解它们对陆生生活的适应结构和植物界进化中所处的位置;了解高等植物的常见种类识别方法,学习观察和鉴定苔藓植物、蕨类植物及种子植物的基本方法,了解其经济价值;通过低等植物与高等植物的比较观察,明确整个植物界的进化趋势。2实验内容或原理 观察蓝藻、裸藻、绿藻、硅藻、红藻、褐藻等藻类植物的形态特征。 观察真菌尤其是伞菌的形态及结构特征 观察三种类型的地衣的形态结构特征。 观察苔藓、蕨类和裸子植物的孢子体、配子体及生殖器官的结构并了解其生殖方式和生活史。3需要的仪器或试剂等 器具:显微镜、解剖镜、放大镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸水纸、纱布块。 试剂:蒸馏水等。 材料:新鲜地木耳、眼虫藻永久制片、水绵新鲜材料、水绵结合生殖永久制片、硅藻装片、海带藻体标本、紫菜藻体标本、池塘水、黑根霉装片或生霉的面包(馒头)、青霉装片或生霉的橘皮、新鲜蘑菇、地衣植物标本;新鲜地钱标本、新鲜葫芦藓标本、地钱精子器切片、地钱颈卵器切片、真蕨原叶体装片、苏铁大小孢子叶球干制或浸制标本、新鲜真蕨标本(如铁芒萁、海金沙、井栏边草、鳞毛蕨)、新鲜水生蕨类(如青萍或紫萍、槐叶萍、满江红等)标本、湿地松雌球果标本。4实验步骤 藻类植物 蓝藻:念珠藻:多细胞群体藻类,原核生物。取新鲜地木耳观察:外形为蓝绿色胶质片状。用镊子撕取一小块胶质,置于载玻片上,用另一片载玻片将材料压碎,滴一滴水加盖玻片。低倍镜下:植物体外围有很厚的胶质鞘,内有许多念珠状细胞组成的单列藻丝;高倍镜下:在丝状体细胞中可看见有几个大型的异形细胞:壁厚,与营养细胞相连处有球状加厚的节球,细胞质呈淡黄绿色。 裸藻:取一滴含有裸藻(眼虫藻)的池塘水或永久制片,在显微镜下观察:单细胞,呈梭形,前端钝圆、后端尖削。虫体内有一个红色眼点,还有许多叶绿体。虫体前端还有一根鞭毛,可在水中旋转式游动。 绿藻:水绵:多细胞不分枝的丝状体。取少量丝状体作临时制片观察:许多圆筒形细胞上下连接,每个细胞内有一至数条带状叶绿体(载色体),螺旋状悬浮于细胞质中,每条叶绿体上有一列发亮小颗粒,为蛋白核。细胞核不易辨认。另取水绵接合生殖永久制片显微镜下观察:二条平行靠近的丝状体,多个横向的接合管,原生质体收缩形成配子,一条丝状体的配子已经通过接合管进入了另一条丝状体,并形成了合子。 硅藻:取一滴池塘水制成临时装片或取硅藻装片观察:形状多样:有舟形、圆形、新月形、弓形、方形或其他形状;细胞壁:由两个瓣片套合而成。高倍镜下:瓣面上有花纹,细胞核1,一至几个金褐色的载色体,有的还具蛋白核。 红藻:取紫菜藻体标本观察:鲜紫红色的片状体,边缘波状,很薄,由单层或双层细胞组成。 褐藻:取海带藻体标本观察:植物体(孢子体)大型,深褐色,可分为狭长带片、短柱形的柄和假根状的固着器三部分。 真菌 黑根霉:取黑根霉制片观察:匍匐生长的菌丝(无隔)、垂直向上的孢子囊梗、孢子囊(内有黑色孢子)和向下生长的假根。 青霉:取青霉制片观察:横隔菌丝,在菌丝上生有长而直立的分生孢子梗,然后分生孢子梗经23次分枝,产生具横隔的分生孢子小梗,分生孢子小梗顶端产生多个圆形的、成串的分生孢子。 酵母菌:见实验二(略)。 伞菌:蘑菇子实体:伞状,可分为菌盖和菌柄两部分。伞盖上有许多菌褶,其上着生担子和担孢子,可进行孢子繁殖。菌柄上有的种类有菌环。 地衣植物(观察标本) 壳状地衣:原植体(植物体)紧贴基物(如石头),难以分开。 叶状地衣:原植体呈扁平状,有背、腹之分,以假根或脐固着于基物上,易于采下。 枝状地衣:原植体直立成枝状或丝状,或成悬垂分枝状。 苔藓植物 苔类:取新鲜地钱观察:二叉分支的叶状体,胞芽杯,其内产生胞芽;叶状体腹面:有假根和鳞片。雌雄异体,雌、雄配子体上产生雌器托、雄器托。雌器托顶盘有若干条指状深裂,颈卵器着生其上。取地钱颈卵器切片用低倍镜观察:指状芒线下方倒悬挂着瓶状颈卵器。高倍镜下:颈卵器:颈部和腹部,外面的壁细胞,里面的颈沟细胞、腹沟细胞与卵细胞。雄器托顶盘边缘浅波状,精子器着生在顶盘的小孔中。取地钱精子器切片用低倍镜观察:椭圆形精子器陷于顶盘中,精子器外壁有一层薄壁细胞构成,内部充满精细胞。孢子体:寄生,由孢蒴、蒴柄和基足三部分组成。 藓类:取新鲜葫芦藓观察:高13 cm ,茎叶分化,假根,雌雄同株不同枝。雌枝顶端具顶芽状雌器苞,其中有数个颈卵器和隔丝;雄枝顶端产生小花状雄器苞,内含许多精子器和隔丝。孢子体:寄生,可明显分为孢蒴、蒴柄和基足三部分。孢蒴梨形,内生孢子;蒴柄极长;基足插生于配子体内。 蕨类植物 在示范桌上和校园内认识一些常见的大型叶陆生真蕨植物:铁芒萁、海金沙、井栏边草、鳞毛蕨等。水生蕨类:四叶萍、槐叶萍、满江红等。了解蕨类植物的形态特点。 观察真蕨原叶体(配子体)装片。显微镜下原叶体小、很薄,为绿色、略呈心形的叶状体,有背、腹面。腹面有假根,假根附近有精子器,在心形凹陷处有几个颈卵器。 观察真蕨孢子囊群装片。在井栏边草或鳞毛蕨等叶背面具有褐色孢子囊群的地方刮取一点材料,制成临时装片。显微镜下观察一个孢子囊结构:孢子囊柄,孢子囊壁,环带,唇细胞,孢子。 裸子植物 苏铁及大小孢子叶球:观察大小孢子叶干制或浸制标本。常绿观赏乔木,大型羽状深裂的复叶,顶生小孢子叶球:圆柱形,螺列许多小孢子叶:鳞片状,有许多小孢子囊;顶生大孢子叶球:密被黄褐色绒毛,上部羽状分裂,下部长柄上生有26个胚珠。 湿地松雌球果:呈卵圆形,栗褐色、质地坚硬。雌球花:大孢子叶(珠鳞、种鳞),鳞盾,鳞脐;种鳞的腹面有两枚具翅的种子。 银杏:高大落叶乔木,长、短枝,叶扇形,二叉叶脉;种子核果状。雌雄异株。 马尾松:常绿乔木,具长、短枝,两枚细长的针叶簇生在短枝上,每束针叶基部被宿存的叶鞘所包。小孢子叶球(雄球花):长椭圆形,成熟时黄褐色,小孢子叶:背面有2小孢子囊(花粉囊),内生花粉;大孢子叶球(雌球花):卵圆形,紫红色,珠鳞基部有2胚珠,苞鳞与珠鳞分离。大孢子叶球成熟时变为球果,栗褐色质地坚硬。 圆柏:圆柏也为常绿乔木,树冠圆锥形,叶片有鳞形及刺形。雌雄异株或同株。 水杉:我国特有珍稀的孓遗植物,落叶大乔木,叶片线形,扁平,交互对生,球花单性,雌雄同株。观察校园内常见的种类:池杉、柳杉、雪松、金钱松、罗汉松、湿地松、侧柏等。5教学方式讲解、观察相结合。新鲜标本、干标本、鲜材料装片、永久切片相结合进行观察了解。6考核要求 掌握藻类特点及常见类型、真菌的形态结构特征及地衣的类型。7实践教学报告要求 绘念珠藻一段丝状体结构图,并引线注明各部分名称。 绘水绵梯形结合生殖图,并引线注明各部分名称。 绘蘑菇子实体结构图,并引线注明各部分名称。 绘地钱配子体和葫芦藓配子体与孢子体外形图,并引线注明。 绘蕨原叶体简图,并引线注明。六、实验考试1考试的目的和要求了解实验教学效果。要求学生考试时遵守考试原则,考出自己的真实水平。2考试的内容 徒手切片与显微操作。 判别植物各种器官、组织结构。 腊叶标本与切片标本制作情况。 植物识别能力。3考试的方式在监考老师的监督下,完成规定的实验操作,辨认植物标本,以及利用显微镜识别各种植物切片。操作部分,老师当场给分,书面部分写出识别结果,交老师评分。七、实验教材及主要参考资料蒋道松主编,植物学实验指导,自编教材(2003年),湖南农业大学教务处八、教改说明及其他 因各专业学时与要求有所不同,因此,具体使用时,实验内容可作出适当调整。课程负责人:学院 二八年一月生物化学与分子生物学实验技术课程教学大纲(本大纲对应于2007年版专业人才培养方案)实验课程号: 20571B2学时:32 学分:1.5分适用对象:植保、植科、园艺、农学、农资、生态、茶学、草业、中药等课程属性:必修先修课程:无机及分析化学、基础化学实验、有机化学、生化及分子生物学考核方式:笔试闭卷考试使用教材及主要参考书:杨虹琦主编,生物化学实验教程,湖南农业大学自编教材,1999俞建瑛主编,生物化学实验技术,化学工业出版社,2005周先碗主编,生物化学仪器分析与实验技术,化学工业出版社,2002郝福英主编,生命科学实验技术,北京大学出版社,2004王镜岩主编,生物化学,高等教育出版社,2002李庆章主编,生物化学,中国农业出版社,2004阎隆飞主编,分子生物学,中国农业大学出版社,1997王关林主编,植物基因工程,科学出版社,2002刘约权主编,现代仪器分析,中国农业科技出版社,1998一、课程的性质与任务生物化学与分子生物学实验技术(以下简称为生物化学实验技术)在生命科学的发展中起着非常重要的基础作用,它与农业、林业、食品、医药和环保等领域都有着十分广泛而又密切的联系,并且已成为生命科学研究中的最基础手段之一。因此,生物化学实验技术是大学本科生物类、农学类、园林类、食品类等专业的必修实验课程。 生物化学实验技术课程主要是培养学生在生物化学方面的实践能力和创新能力。它的作用不仅仅是以形象生动的实验现象帮助学生加深理解与掌握生化理论知识,而且是培养学生将生化理论知识应用于生产实践,提高学生的动手操作能力,提高在实践中发现、分析和解决问题的能力,提高开拓创新精神的有效途径。二、实验的目的与基本要求通过生物化学实验技术课程教学,应该使学生初步掌握生物化学常用实验基本操作技术;同时增加感性认识,巩固生化理论知识;培养学生严肃认真、实事求是的科学态度和作风;提高学生分析和解决问题的能力;在生化实验上具备一定的独立创新和设计能力。三、实验项目一览表生物化学及分子生物学实验技术实验项目一览表序号实验项目名称实验类型实验要求适用专业学时1蛋白质含量测定验证性必做生物类42蛋白质构像变化的紫外光谱检测设计性选做生物类43醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白验证性必做生物类44糖含量的测定验证性必做生物类45谷物总淀粉测定验证性必做生物类46核酸含量测定综合性必做生物类47淀粉酶活及动力学设计性必做生物类88过氧化氢酶固定化及酶活测定设计性必做生物类49核黄素含量测定综合性必做生物类410凝胶柱层析分离核黄素和血红蛋白设计性必做生物类411SDS电泳测定蛋白质分子量综合性选做生物类1212植物组织总DNA提取与纯度鉴定综合性选做生物类1213质粒的提取、酶切与鉴定综合性必做生物类1214PCR基因扩增及鉴定综合性选做生物类12四、实验项目的具体内容:实验一 蛋白质含量测定考马斯亮兰G250法1本次实验的目的和要求学习考马斯亮兰染料结合法测定蛋白质的原理和方法;学习7217230型分光光度计的使用方法;掌握低速离心机使用方法。2实验内容或原理考马斯亮兰G250是一种染料,能与蛋白质稳定结合,结合蛋白质后变为青色,在595nm处有最大吸收,在一定蛋白质浓度范围内(01000g / ml),蛋白质染料结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比,故可用于蛋白质的定量测定。3需用的仪器或试剂等仪器:721或7230型分光光度计、离心机、50ml容量瓶等玻璃器皿试剂:牛血清白蛋白(1000g/ml)、考马斯亮兰G250溶液、0.1mol / L NaOH溶液、70乙醇材料:小麦粉或大米粉4实验步骤 蛋白质标准曲线或回归方程的制作; 蛋白质的提取; 考马斯亮兰法测定蛋白质含量。5教学方式学生课前结合生物学实验室网站资源自学预习;教师在课堂里通过黑板或多媒体讲解实验,并对关键步骤进行示范操作;最后学生在教师的指导监督下,完成实验操作和实验报告。6考核要求 掌握考马斯亮兰测定蛋白质含量的原理和方法。 怎样根据蛋白质的溶解性选择溶剂。 熟悉标准曲线或回归方程的制作方法。7实验报告要求实验项目和步骤填写完整;有原始数据,结果符合真实值;有适当的实验现象描写和实验结果分析;字迹工整,书写整洁。实验二 pH对牛血清蛋白构象影响的紫外光谱分析1本次实验的目的和要求理解蛋白质构象变化的实质及其研究方法;了解紫外-可见双光束分光光度计的使用。2实验内容或原理蛋白质的紫外吸收光谱主要是由于芳香族氨基酸色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸残基的生色团作用产生,蛋白质的紫外吸收光谱中,一般210nm处的峰是肽键的强吸收峰,280nm附近的峰是酪氨酸残基的吲哚环、色氨酸残基的酚基的吸收峰。大多数蛋白质在280nm波长附近有一个吸收峰。蛋白质的紫外光谱会受到溶剂的pH值影响,因为溶剂的pH值影响生色团的解离状态,从而引起蛋白质构象变化,改变其吸收光谱,因此利用紫外光谱法可以初步考察蛋白质的构象变化。3需用的仪器或试剂等仪器:具塞试管、移液管、水浴锅、紫外-可见双光束分光光度计。试剂:0.1 mol/L pH=5813 的NaH2PO4缓冲液 ;0.1mg/ml 酪氨酸和 色氨酸 ;10 mg/ml。材料:牛血清蛋白(BSA)。4实验步骤 样品在不同pH值的缓冲液下处理; 紫外光谱检测、分析。5教学方式学生课前结合生物学实验室网站资源自学预习;教师在课堂里通过黑板或多媒体讲解实验,并对关键步骤进行示范操作;最后学生在教师的指导监督下,完成实验操作和实验报告。6考核要求 理解蛋白质构象变化的实质及其研究方法; 了解紫外-可见双光束分光光度计的使用; 提交实验
展开阅读全文