交叉配血试验临床应用ppt课件

交叉配血试验 交叉配血试验 一 实验目的二 实验原理三 实验步骤四 方法学局限性五 临床意义六 临床新进展 实验目的 掌握凝聚胺交叉配血试验的原理 方法 结果判读熟悉交叉配血试验的临床意义 实验原理 交叉配血试验分两管 主侧 受血者血清 供血者红细胞次侧 供血者血清 受血者红细胞 实验原理 红细胞表面带有大量的负电荷 悬浮在电解质溶液中 会吸引大量阳离子 红细胞则被扩散的双层离子云所围绕 形成zeta电位 实验原理 凝聚胺技术首先利用低离子溶液 LIM 降低介质的离子强度 减少红细胞周围的电子云 如有红细胞抗原相应的血清抗体存在 则可促进红细胞抗原与血清抗体的特异结合 实验原理 再加入凝聚胺溶液 溶解后产生很多正电荷 中和红细胞表面带有的负电荷 红细胞zeta电位降低 缩短红细胞距离 无论是否有红细胞抗原相应的血清抗体存在 主 次侧管均可产生非特异性聚集 实验原理 最后加入悬浮液 具有中和凝聚胺阳离子的作用 使正常红细胞的非特异性凝集散开 红细胞抗原与相应血清抗体的特异性凝集仍然存在 实验步骤 一 取出供血者血浆及红细胞 并将冰冻血浆放入37 温箱解冻15分钟 实验步骤 二 受血者抗凝全血标本离心备用 3000r min 5min 实验步骤 三 将受血者血浆2滴加入主侧管 红细胞1滴加入次侧管 实验步骤 四 剪下供血者血袋上的血辫 将供血者红细胞1滴加入主侧管 血浆2滴加入次侧管 实验步骤 五 在主次侧各加入低离子溶液各0 65毫升 混合均匀 实验步骤 六 在主 次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液 混匀后3400r min离心10秒 弃去上清 观察红细胞的非特异凝集现象 弃上清 实验步骤 七 最后各加入悬浮液2滴 轻轻转动试管混匀并观察结果 实验步骤 八 如果在60秒内 主 侧管凝集均散开 说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集 配血相合 实验步骤 九 如果凝集不散开 则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应 配血结果不相合 如有疑问 可进一步镜检确认 实验步骤 十 同时对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查 实验步骤 十一 对受血者ABO和RH血型使用玻片法进行复查 临床意义 一 保证输血安全二 发现亚型和不规则抗体 方法学局限性 对罕见不规则抗体抗K敏感性低 临床新进展 流式细胞术基因分型技术卡式微柱凝胶法 卡式微柱凝胶法 卡式微柱凝胶法 戴安娜全自动配血系统 卡式微柱凝胶法可实现自动检测 二实验原理 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型 在ABO血型系统中 红细胞膜上抗原分A和B两种抗原 而血清抗体分抗A和抗B两种抗体 血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清 含有抗B抗体 与标准B型血清 含有抗A抗体 中 观察有无凝集现象 从而测知受试者红细胞膜上有无A或 和B抗原 在ABO血型系统 根据红细胞膜上是否含A B抗原而分为A B AB O四型 见下表 谢谢