生物制品及其应用ppt课件

生物制品及其应用 1 什么是生物制品 生物制品是根据免疫学原理 用微生物 细菌 病毒 立克次氏体以及微生物的毒素等 动物的血液 组织制成的 用以预防 治疗以及诊断人或物传染病的一类药品 其中包括 供预防传染病发生的菌苗 疫苗 类毒素 供治疗或紧急预防用的抗菌血清 抗病毒血清 抗病毒素 噬菌体 干扰素等 和供诊断传染病用的各种抗原抗体诊断液等 2 生物制品的分类 1 菌苗 疫苗和类毒素2 抗病血清3 诊断液 3 抗病血清 1 抗病血清是抗菌 抗病毒 抗毒血清的总称 2 凡是用细菌免疫马或其他大动物所取得的免疫血清 称为抗菌血清 3 凡是用病毒免疫马或其他大动物 所取得的免疫血清 称为抗病毒血清 4 凡是用细菌类毒素或毒素免疫马或其他大动物 所取得的免疫血清 称为抗毒素 或抗毒血清 4 诊断液 常用的诊断液可以区分为 1 抗原 用以检验动物血清中有无特异性抗体存在 2 诊断血清 诊断血清内有经标定的已知抗体 用以检查可疑畜禽组织内 有无该种疫病特异性抗原 病原微生物或其代谢物 存在 3 变态反应原 是利用病原微生物或其代谢产物 制成的一种具有特异性的诊断液 5 一 疫苗基础知识 6 一 免疫的历史 公元1100中国与印度对天花就已有认识天花接种由土耳其传入英国 称为variolation 死亡率仍高1790Jenner发现牛痘1880Pasteur发现死细菌可以预防再度感染 这种现象称为vaccination 疫苗于是产生 接着生产炭疽及狂犬疫苗1886热处理死毒疫苗出现 7 1923福尔马林处理白喉及破伤风菌素制成死毒疫苗1926发现佐剂可以增強类毒素的效果1960细胞培养小儿麻痹病毒疫苗 造成疫苗的大量制造 而造福人群建立稳定細胞株 用于生产疫苗 一 免疫的历史 8 疫苗是用于针对性预防某些传染病的生物制品 病原体 致病原性 生产力下降 临床症状 死亡免疫原性 机体产生特异性免疫反应 抵抗病原体的危害 将病原体杀死或致弱 疫苗 二 什么是疫苗 9 1 弱毒活疫苗 活苗 冻干苗 2 灭活疫苗 死苗 油苗 自家苗多数为灭活疫苗的一种3 多价苗与联苗4 基因缺失疫苗5 提纯的大分子疫苗6 核酸疫苗7 其它 合成肽疫苗 转基因植物疫苗 抗独特型疫苗 三 疫苗有哪些种类 10 优点 在体内繁殖 模仿自然感染 有完整免疫反应 体液免疫 细胞免疫 较少免疫剂量即产生足夠免疫效果免疫反应产生快 7天初步免疫反应 14天达高水平 缺点 动物体内少量自然抗体可中和疫苗 如母源抗体 降低免疫效果散毒 安全性问题运输保存不便 1 弱毒苗 11 猪瘟猪瘟细胞苗猪瘟组织苗伪狂犬丹毒 肺疫仔猪副伤寒猪乙型脑炎蓝耳病活疫苗 猪场常用的弱毒苗 12 进口弱毒苗因加耐热保护剂 一般在2 8oC保存 有效期为1 5年 国产弱毒苗保藏在 21oC以下 有效期一年 在 21 8oC 有效期要减半计算 因猪场一般无低温冰箱 故采购回的冻干弱毒疫苗均应减半计算有效期 弱毒苗的保存 13 优点 安全 一般不产生毒力 不会传播至未免疫动物较易生产 稳定性好 受抗生素 体内抗体影响较小缺点 在体内不复制 接种剂量为刺激免疫反应的全部剂量 通常需要2次以上注射7 14天开始产生 21天达到较高水平 副反应 局部和全身 过敏等 2 灭活苗 14 猪场常用的灭活苗 口蹄疫喘气病大肠杆菌萎缩性鼻炎细小病毒传染性胃肠炎 流行性腹泻蓝耳病灭活苗细菌性疾病灭活苗 链球菌 副猪嗜血杆菌 传胸 15 3 灭活苗的保存 一般灭活苗 油乳剂 保藏在2 8oC 有效期1 1 5年 16 疫苗在猪场的保存 17 4 疫苗佐剂 佐剂 于疫苗中可增强及加速免疫反应的物质加速免疫反应 增强记忆细胞的作用 延长免疫效期有时产生过敏等不良反应常用的佐剂有 氢氧化铝 矿物油 卡介苗 18 5 免疫途径 非注射途径经口投喂 口 鼻腔喷雾 点眼 皮肤注射途径肌肉皮下皮内腹膜内卵内或胚胎内靜脉内 19 6 免疫策略 通常注射2次 年度追加注射新生幼畜通常由母畜免疫而获得母源抗体以整群动物的免疫整齐度考察效果 可预防大爆发 全面接种为保护的必要条件 20 四 影响免疫效果的因素 1 品种和动物类别因素2 年龄 幼畜弱毒疫苗有较强感受性 尤其是胎儿 母源抗体衰退时的 空窗期 也是一高危险期 老化 退行性 及免疫老化动物3 营养 免疫反应依赖充足营养以产生抗体4 环境因素应激 高温 潮湿 寒冷 拥挤 运输 断奶等均会影响免疫效果5 操作 稀释方法 注射操作紧急疫苗接种 有时也可促进免疫反应 21 五 疫苗的不良反应 立即反应 3 5分钟产生 痛觉 物理刺激 生理刺激 pH 滲透压变化 疫苗内容物刺激快速过敏反应休克延迟反应 数日至数周或月年内发生 局部肿胀 水肿 脓肿 肉芽肿 肉瘤暂时性精神不佳及食欲减退 24 72小时 肾小球肾炎 3型变态反应 抗原 抗体复合物沉积于肾小球 毒力恢复 基因重组免疫抑制污染疫苗持续感染 排毒 22 六 免疫失败的原因 1 疫苗质量问题2 保存问题 温度对疫苗效价的影响3 使用操作不当 免疫策略不当4 人为错误 器械错误 抗原或血清型选择不当5 母源抗体干扰或影响免疫反应 无法产生保护6 动物本身的免疫抑制问题 遗传 药物 疾病 应激 7 胚胎或子宮内已经感染暴露 造成个体对抗原的免疫耐受 从而导致免疫无效 23 二 常用疫苗菌苗 24 1 猪瘟疫苗 猪瘟兔化弱毒冻干苗 采用感染兔化弱毒的乳兔的组织制作而成 则为猪瘟兔化弱毒乳兔组织冻干苗 断奶后仔猪免疫 免疫期可达六个月到一年半 猪瘟脾淋苗 采用兔的脾脏 淋巴制作而成则为猪瘟脾淋苗猪瘟兔化弱毒牛体反应冻干苗 系采用接种过猪瘟疫苗牛的组织制作而成 猪瘟兔化弱毒细胞培养冻干苗 利用接种过猪瘟兔化苗动物的细胞经培养研制而成 25 2 猪伪狂犬病疫苗 1 猪伪狂犬常规弱毒苗 2 猪伪狂犬灭活苗 3 猪伪狂犬基因缺失弱毒苗缺TK基因 1种或几种糖蛋白 4 猪伪狂犬基因缺失灭活苗只缺糖蛋白 伪狂犬病毒已发现11种糖蛋白gE gB gC等 病毒基因组成相关 除此之外还有几种酶也与病毒毒力密切相关 其中胸苷激酶 TK 是伪狂犬最主要的毒力基因之一 目前缺失的糖蛋白基因主要为gE和gG基因 也有缺失gC和gB基因的 但要注意一个问题一个猪场最好只使用一种基因缺失苗 有研究同时接种两种不同的基因缺失苗后 病毒会发生基因重组现象 26 3 猪传染性胃肠炎 猪传染性胃肠炎 TGE 猪流行性腹泻 PED TP二联疫苗猪传染性胃肠炎是由TGE病毒引起的猪的一种急性胃肠道传染病 猪流行性腹泻是由PED病毒引起的猪的一种高度接触性肠道传染病 该病10日令内仔猪死亡率100 成年猪几乎不死 我国哈兽研成功研制的 TP二联灭活苗经后海穴接种 灭活苗主动免疫保护率为96 被动免疫保护率为85 1 TP二联弱毒苗了 主动免疫率保护率为97 7 被动免疫保护率为98 27 4 猪繁殖呼吸综合症 猪繁殖呼吸综合症 PRRS 猪兰耳病疫苗 有减毒苗和灭活苗 PRRS是一种高度接触性传染病 可通过接触 空气 精液 胎盘等传染 病毒为单股正链病毒 有严格的宿主专一性 病毒增殖具有抗体依赖性增强的作用 即在亚中和抗体水平存在的情况下 病毒在细胞上的复制能力反而增强 所以讲疫苗免疫效果不好 国内外使用减毒疫苗毒苗而在猪群中引起多起PRRS的爆发 目前PRRS主要存在的问题 是以持续感染 亚临床感染 免疫抑制 易继发感染为流行特点 给本病防制带来一定的困难 28 5 猪流行性乙型脑炎 猪流行性乙型脑炎 有弱毒苗和灭活苗 又称日本乙型脑炎 是由流行性乙脑病毒引起的一种人畜共患的传染病 可引起后备母猪的流产 死胎 木乃伊胎 本病由蚊虫传播感染 有明显的季节性 防制 无特殊治疗方法 要求每个猪场每年3 4月初 在蚊虫未出现之前免疫 免疫对象是后备母猪 1 2胎的青年母猪 所有的公猪 29 6 猪细小病毒 猪细小病毒是导致易感母猪发生繁殖障碍的主要传染病之一 猪细小病毒属于细小病毒科细小病毒属的自主型细小病毒 主要表现为受感染的母猪 特别是初产母猪以及血清学阴性的经产母猪发生流产 产死胎畸形胎木乃伊 弱仔及屡配不孕 疫苗 有灭活苗和弱毒苗 五月龄注射一次 过一个月再注射一次 即配种前一个月注射 30 7 猪流行性感冒 该病是由猪流感病毒引起的猪的一种急性 高度接触性呼吸道传染病 临床上以突然发病 发热 咳嗽 呼吸困难 衰竭然后迅速康复 猪流感无特效药 只有对症治疗 疫苗 猪流行性感冒灭活苗 国外已经研制成功 国内已经进入疫苗审批程序 31 8 猪链球菌病 该病是由各种致病性链球菌感染引起的一种人畜共患的传染病 败血症 化脓性淋巴结炎 脑膜炎 关节炎为主要特征 猪链球菌型菌珠可导致人类的脑膜炎 败血症 心内膜炎 严重可致人死亡 防制 抗生素有一定效果 弱毒苗是由C群链球菌制备的 灭活苗是由链球菌二型菌株制备的 也可用本场分离的菌株制备的灭活苗效果更好 32 9 大肠杆菌病 仔猪黄痢 早发性大肠杆菌病 五日龄内发生 有高发病率和死亡率 仔猪白痢 迟发性大肠杆菌病 10 30日龄内仔猪发生 仔猪水肿病 刚断奶或生长最快的育肥猪防制 可用抗生素治疗 可用疫苗进行被动免疫 母猪产前35天和15天 各分别注射疫苗 常用的有 A 仔猪大肠杆菌三价灭活苗 带有K88 K99 987P菌毛抗原 im B 仔猪大肠杆菌K88 K99双基因工程灭活苗 耳根或im C 仔猪大肠杆菌K88 LTB双基因工程灭活苗 im或口服 33 10 猪支原体肺炎 猪喘气病 该病又称地方性流行性肺炎 是由猪肺炎支原体引起的一种慢性接触性呼吸道传染病 症状 咳嗽 气喘 防制 抗生素只能对症治疗 不能消除病根 疫苗 A 中监所经20多年研制成功的猪支原体肺炎乳兔化弱毒冻干苗 该苗接种的猪 2个月内定期X光透视 肺部无反映率83 8 100 同居猪不感染 不影响增重 每头猪5毫升 右胸腔注射 攻毒后保护率80 B 江苏农科院研制成 168株无细胞培养弱毒苗 1毫升肺穴内免疫 保护率80 程序 成年公母猪一年一次 仔猪7 15日龄一次 后备配种前一次 34 11 猪传染性萎缩性鼻炎 AR 猪AR是由支气管败血波氏杆菌和产毒素多杀性巴氏杆菌引起的一种慢性呼吸道传染病 其特征为 鼻炎 颜面变形 鼻甲骨下卷曲萎缩 打喷嚏 流鼻血 防制 可用抗生素治疗 疫苗 A 支气管败血波氏杆菌 项菌灭活菌苗 B 支气管败血波氏杆菌 D型产毒素多杀性巴氏杆菌灭活二联苗 方法 商品猪场用于母猪 小猪被动免疫 in 种猪场母仔猪同用 in 滴鼻 35 12 仔猪副伤寒 仔猪副伤寒是由沙门氏菌属中的细菌引起仔猪的传染病 急性病例为败血症变化 慢性病例为大肠坏死性炎症及肺炎 大多数发于1 4月龄的猪 属革兰氏阴性菌 防制 抗生素有一定效果 疫苗 仔猪副伤寒活疫苗用20 氢氧化铝稀释 方法 im有反应 大 口服反映轻微 36 13 猪传染性胸膜肺炎 该病是由胸膜肺炎放线杆菌引起猪的一种高度传染性呼吸疾病 以急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征 急性型呈高死亡率 防治 抗生素有预防作用 对慢性猪治疗效果不佳 疫苗 A 传染性胸膜肺炎灭活苗 B 本场自家菌苗效果更好 37 14 猪巴氏杆菌病 猪肺疫 病原体是多杀性巴氏杆菌 革兰氏阴性菌 经呼吸道或消化道途径进入健康猪体引起发病 急性病例为出血性败血症 咽喉炎肺炎症状 防制 抗生素有一定效果 疫苗 A 猪肺疫氢氧化铝苗 B 猪多杀性巴氏杆菌A型活疫苗 CA株 C 猪多杀性巴氏杆菌苗679 230弱毒株或C20弱毒株制成的口服猪肺疫弱毒冻干菌苗 方法 in im 口服 38 三 猪场自家组织苗制作与使用方法 39 自家组织苗的制作 动物的选择 哺乳 保育猪 有明显临床症状 毛松 消瘦 苍白 腹式呼吸 眼分泌物多 解剖见肺脏前2 3有实变为宜 病料的采集 肺脏 脾脏及相应淋巴结 肺门淋巴结 颌下淋巴结 腹股沟淋巴结等 40 病料采集后 应将较大的筋脉彻底切离 称重 将病料放入组织粉碎机内打成浆状 可加适量生理盐水 稀释液的准备 2000ml可稀释700 750g组织匀浆 1 20 铝胶生理盐水2 分析纯福尔马林5 约10ml 3 叠氮钠0 5 约1ml 三种混合摇匀 待用 注 福尔马林由40 分析纯甲醛加60 注射用水配备 叠氮钠5克加15注射用水配备 病料的处理 41 自家组织苗的制作 1 将加工处理好的组织浆放入稀释液内 充分搅拌均匀 双或三层纱布过滤 得滤液约2000ml 滤渣约700 750g 无害化处理废弃 2 滤液室温保存24小时后 加入与福尔马林等量10 硫代硫酸钠终止灭活 3 将所得滤液分装 加反口胶塞及铝盖封装 可用100mL 瓶 20ml 瓶等包装 灭活 将包装好的疫苗静置24小时后方可使用 42 自家组织苗使用方法 1 全场免疫做基础免疫 种公 母猪及后备种猪3ml 头 哺乳仔猪1 1 5ml 头 保育猪2ml 头2 母猪在基础免疫一个月后开始作产前4W免疫 3ml 头 3 仔猪7 9天龄首免1 1 5ml 头 两个星期后二免2ml 头 43 制作组织苗器械及试剂 DS 1高速组织捣碎机 1台 上海医用仪器 10000 12000转 分 试剂 分析纯甲醛 1瓶分析纯硫代硫酸钠1瓶叠氮钠 1瓶其它仪器 砧板及手术刀柄 剪刀1 2kg台称 1台100g天平称 1台2000ml塑料杯 5个150ml广口瓶 棕色 3个200ml玻璃烧杯 2个10000ml大白口瓶 2个玻棒 2支2ml及5ml玻璃移液管 各2支橡皮吸球 2个医用纱布 3卷 44 四 自家血清的制作与应用 45 自家血清的制作 1 选老龄健康母猪或超100公斤健康肉猪做抽血对象 2 采用颈动脉抽血 尽量减少操作感染 3 血清收集后 每500ml加入160万青霉素 放2 7 C保存 4 使用前计好需要血清量 抽取血清 每500ml血清再加入5 恩诺沙星10ml 摇匀后马上使用 46 自家血清采集 47 自家血清的使用 1 一般按照每公斤体重注射0 5 1 0ml 2 仔猪2周龄每头腹腔注射4 5ml 仔猪断奶当天 每头腹腔注射6ml 3 另对病残猪隔天腹注血清一次 连用3 4次 6ml 头 四 自家苗和自家血清的优缺点 49 自家苗的用途 1 具有特异性 特异性菌株 抗原针对性强对某些产生毒素的细菌有效 传染性胸膜肺炎 副猪嗜血杆菌 链球菌 对圆环病毒病有控制作用 对蓝耳病无效2 快速产生免疫 水剂佐剂 常可迅速控制疾病3 免疫期短 50 自家苗的不足 血清潜在的危险 1 供体血清携带的其它病原2 血清样本的污染3 内毒素的产生 如血清样本储存中产生的破伤风梭菌毒素 51 制作过程 常常是作坊式的生产 病料选择随意性大 无法保证抗原含量的稳定性 自家苗的不足 血清潜在的危险 52 结论 1 在特殊情形之下 自家苗 自家血清可以作为控制疾病的一个手段圆环病毒病持续困扰某些细菌性疾病爆发2 存在风险的操作3 对蓝耳病的爆发无效4 对后期生产性能有负面影响5 疾病稳定后 应停止自家苗免疫 53 谢谢 54