资源描述
胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取，产量低、成本高。而微生物生长迅速，容易控制。 于是科学家设想，若能将人的胰岛素基因导入微生物体内，并得以表达(biod)，就不仅能解决产量问题，还能大大降低生产成本，使药品价格大幅下降。设想设想(shxing)二二 能否(nn fu)让微生物产生出人的胰岛素等珍贵药物？第1页/共36页第一页，共37页。这些定向这些定向(dn xin)改造改造基因的设想能实现吗？基因的设想能实现吗？经过经过(jnggu)(jnggu)多年的努力，科学家多年的努力，科学家终于在终于在2020世纪世纪7070年代创立了可以定向年代创立了可以定向改造生物的新技术改造生物的新技术第2页/共36页第二页，共37页。第3页/共36页第三页，共37页。第4页/共36页第四页，共37页。 抗虫棉的培育抗虫棉的培育(piy)有哪些关键有哪些关键步骤？步骤？第5页/共36页第五页，共37页。第6页/共36页第六页，共37页。第7页/共36页第七页，共37页。DNA DNA 重组重组(zhn z)(zhn z)技术的基本技术的基本工具工具本节知识(zh shi)内容 1-1 DNA1-1 DNA重组重组(zhn z)(zhn z)技术的基本工技术的基本工具具专题一专题一 基因工程基因工程“分子手术刀分子手术刀” 限制酶限制酶 “分子缝合针分子缝合针” DNADNA连接酶连接酶 “分子运输车分子运输车” 基因进入受体细胞的载体基因进入受体细胞的载体 第8页/共36页第八页，共37页。黏性末端黏性末端平末端平末端4 4、切割方式：、切割方式：错切和平切错切和平切第9页/共36页第九页，共37页。ATGCATGC限制限制(xinzh)酶切割磷酸二酯键酶切割磷酸二酯键第10页/共36页第十页，共37页。限制性内切酶作用(zuyng)(zuyng)过程第11页/共36页第十一页，共37页。 1 1、大肠杆菌的一种限制酶（EcoR)EcoR)能识别GAATTCGAATTC序列，并在G G和A A之间切开形成(xngchng)(xngchng)黏性末端。 2 2、SmaSma能识别CCCGGGCCCGGG序列，并在C C和G G之间切割形成(xngchng)(xngchng)平末端 。常见(chn jin)的两种限制酶第12页/共36页第十二页，共37页。第13页/共36页第十三页，共37页。黏性末端黏性末端(m dun)(m dun)黏性末端黏性末端(m dun)第14页/共36页第十四页，共37页。第15页/共36页第十五页，共37页。第16页/共36页第十六页，共37页。基因(jyn)的针线：DNA连接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割第17页/共36页第十七页，共37页。ATGCATGC连接连接(linji)酶连接酶连接(linji)磷酸二酯键磷酸二酯键DNADNA连接酶的作用(zuyng)(zuyng)过程：二、分子二、分子(fnz)缝合针缝合针DNA连接连接酶酶第18页/共36页第十八页，共37页。 T磷酸二酯键1234512345 A第19页/共36页第十九页，共37页。作用作用(zuyng)部位：部位：第20页/共36页第二十页，共37页。连接连接(linji)(linji)黏性末端黏性末端连接连接(linji)(linji)黏性末端和平末端黏性末端和平末端分类分类(fn li)作用作用E.coli DNA连接酶连接酶种类：T4DNA连接酶第21页/共36页第二十一页，共37页。DNA聚合酶和聚合酶和DNA连接酶有何相同点和连接酶有何相同点和不同点？不同点？DNA连接酶连接酶DNA聚合酶聚合酶连接连接(linji)DNA链链连接连接(linji)部位部位双链双链在两在两DNADNA片断片断(pindun)(pindun)之间形成磷之间形成磷酸二脂键酸二脂键单链单链将将单个单个核苷酸加到核苷酸加到已存在的核酸片断已存在的核酸片断33末端形成末端形成磷酸二脂磷酸二脂键键第22页/共36页第二十二页，共37页。核苷酸分子核苷酸分子(fnz)(fnz)的连接的连接：ATGCATGCDNADNA聚合酶连接聚合酶连接(linji)(linji)单链单链DNADNA把单个脱氧核苷酸连接把单个脱氧核苷酸连接(linji)(linji)到到DNADNA片段上片段上第23页/共36页第二十三页，共37页。三、分子运输车基因(jyn)进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行内进行(jnxng)(jnxng)表达，首先得将这个基因送到乙生物表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入受体细胞的工具就是载的细胞内去！能将外源基因送入受体细胞的工具就是载体。体。1 1、基因工程、基因工程(jyn gngchng)(jyn gngchng)的载体被喻为：的载体被喻为：分子运输车分子运输车2 2、基因工程的载体来源、基因工程的载体来源：作为基因工程的载体需要怎样的条件呢？作为基因工程的载体需要怎样的条件呢？第24页/共36页第二十四页，共37页。第25页/共36页第二十五页，共37页。作为(zuwi)载体的必要条件1. 1.能自我能自我(zw)(zw)复制复制能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；复制并表达；2.2.有一个至多个限制酶切位点有一个至多个限制酶切位点能与目的基因结合能与目的基因结合3.3.有遗传标记基因有遗传标记基因便于观察便于观察4.4.对受体细胞无害、易分离对受体细胞无害、易分离安全、比较容易得到安全、比较容易得到第26页/共36页第二十六页，共37页。第27页/共36页第二十七页，共37页。课本(kbn)知识回顾 1、基因工程又叫做(jiozu) 或 。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种 提取出来，加以 ， 然后放到另一种生物的细胞里， 改造生物的遗传性状。基因拼接(pn ji)技术DNA重组技术基因修饰改造定向地第28页/共36页第二十八页，共37页。2、DNA 重组重组(zhn z)技术技术的基本工具的基本工具“分子(fnz)手术刀” “分子(fnz)缝合针” “分子运输车”限制（性核酸内切）酶DNA连接酶基因进入受体细胞的载体第29页/共36页第二十九页，共37页。原核生物中分离(fnl)纯化出来特定的核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端平末端第30页/共36页第三十页，共37页。1、种类：、种类：2、作用、作用(zuyng)部位：部位：两类两类连接连接(linji)黏黏性末端性末端Ecoli DNA连接酶T4 DNA连接酶磷酸二酯键连接黏性末端和平末端连接黏性末端和平末端第31页/共36页第三十一页，共37页。通常有三种:作为(zuwi)载体的条件： 在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒都是在 质粒噬菌体衍生物动植物病毒(bngd)天然质粒人工改造的能自我复制；有切割位点；能自我复制；有切割位点；有遗传标记基因；对受体细胞无害、易分离有遗传标记基因；对受体细胞无害、易分离基础上进行过第32页/共36页第三十二页，共37页。1、在基因工程中，切割运载(ynzi)体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ）同种限制酶 B. 两种限制酶同种连接酶 D. 两种连接酶第33页/共36页第三十三页，共37页。练习练习第34页/共36页第三十四页，共37页。练习练习第35页/共36页第三十五页，共37页。感谢您的欣赏(xnshng)！第36页/共36页第三十六页，共37页。NoImage内容(nirng)总结胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物(dngw)的胰腺中提取，产量低、成本高。“分子手术刀” 限制性核酸内切酶。“分子缝合针” DNA连接酶。“分子运输车” 基因进入受体细胞的载体。“分子手术刀” 限制酶。“分子缝合针” DNA连接酶。基因进入受体细胞的载体。一、“分子手术刀” 限制性核酸内切酶。二、分子缝合针DNA连接酶。三、分子运输车基因进入受体细胞的载体。感谢您的欣赏第三十七页，共37页。
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