体外诊断试剂的相关介绍和分析

体外诊断试剂相关介绍及分析1.体外诊断试剂的简介1.1体外诊断试剂相关概念n 生物制品是以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织等为起始材料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量制成的生物活化制剂。n 诊断试剂从一般用途来分，可分为体内诊断试剂和体外诊断试剂两大类。除用于体内诊断的如旧结核菌素、布氏菌素、锡克氏毒素等皮内用的诊断试剂等外，大部分为体外诊断试剂。n 体外诊断试剂是指对从人体内提取的样本（包括捐献的血液和组织）在体外进行检查的试剂、组合试剂、校准物品、对照材料等。体外诊断试剂可单独或与试验工具、仪器、器具、设备或系统组合使用。1.2体外诊断试剂的原理分类n 作用原理：体外诊断试剂是化学检测方法中最重要的部分，通过诊断试剂和体内物质在体外的化学反应来判断体内物质的性质和数量，通过和标准品的比较来判断人体的生理状态，主要应用在疾病的诊断上。1.2.1临床生化试剂临床生化试剂主要有测定酶类、糖类、脂类、蛋白和非蛋白氮类、无机元素类、肝功能、临床化学控制血清等几大类产品，主是用于配合手工、半自动和一般全自动生化分析仪等仪器检测，有单试剂、液体双试剂、干粉双试剂、化学法试剂、标准品等规格，同时各厂家都提供适用于检测室间、室内质控的质控血清系列。1.2.2免疫诊断试剂免疫诊断试剂在诊断试剂盒中品种最多，根据诊断类别，可分为传染性疾病、内分泌、肿瘤、药物检测、血型鉴定等。从结果判断的方法学上又可分为EIA、胶体金、化学发光、同位素等不同类型试剂，其中同位素放射免疫的试剂由于对环境污染比较大，目前在国际市场上已经被淘汰，国内还有少量使用。1.2.3分子诊断试剂分子诊断试剂主要有临床已经使用的核酸扩增技术（PCR）产品和当前国内外正在大力研究开发的基因芯片产品。PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短，可进行定性、定量检测，曾广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等的检测，但由于市场混乱和交叉污染等原因，卫生部严令禁止了荧光电泳定性类PCR试剂在临床的应用，目前国家食品药品监督管理局已经批准了少量已解决了交叉污染的杂交半定量和定量试剂盒。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶，综合了多种现代高精尖技术，被专家誉为诊断行业的终极产品，但成本高、开发难度大，目前产品种类很少，只用于科研和药物筛选等用途。1.3体外诊断试剂的国标分类2007年6月1日,SFDA起实施的体外诊断试剂注册管理办法（试行）进一步明确规定，除了依据药品管理法实施条例以及放射性药品管理办法等上位法或特别规章，对用于血源筛查的体外诊断试剂和放射性核素标记的体外诊断试剂产品作为药品监管外，其他体外诊断试剂产品全部按医疗器械注册管理。1.3.1按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂 一、临床血液学和体液学检验试剂二、临床化学检验试剂 三、临床免疫学检验试剂四、微生物学检验试剂五、组织细胞学检验试剂六、变态反应、自身免疫诊断检验试剂（盒）七、遗传性疾病检验试剂八、分子生物学检验试剂九、其它检验试剂（盒）1.3.2按药品受理和审评的体外诊断试剂*1.ABO血型定型试剂（盒）*2.乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂（盒）*3.丙型肝炎病毒（HCV）抗体试剂（盒）*4.人类免疫缺陷病毒HIV（12型）抗体试剂（盒）人类免疫缺陷病毒抗原/抗体诊断试剂（盒）*5.梅毒螺旋体抗体试剂（盒）6.放免试剂(盒)注：以上带*号的五个品种，预期用途为血源筛查时按药品受理和审评，为临床诊断时，按第三类医疗器械进行管理。1.4体外诊断试剂的发展特点当前诊断试剂总体发展主要有以下特点：(1)免疫诊断试剂将会逐渐取代临床生化试剂，成为诊断试剂发展的主流。(2)诊断技术正在向两极发展。一方面是高度集成、自动化的仪器诊断，另一方面是简单、快速便于普及的快速诊断。(3)检验产品的种类将快速扩大。(4)产品更新应用加快，由于遗传工程、基因重组以及单克隆抗体等现代生物技术的不断应用和发展，使这些精确的诊断试剂能迅速由研究阶段进入临床阶段，缩短了开发时间。国际临床诊断试剂市场年增长速度约为35，目前还处于持续发展时期，美国FDA已批准的诊断试剂近700种，名列世界各国之首，但同世界卫生组织所属全球疾病统计分类协会最近宣布的全球已确知的12000种疾病相比，需求潜力非常大。 国内临床检验市场经过几年的快速发展，虽然一些重要的临床产品项目已经进入成熟期，国内市场发展速度有所减缓，但仍然有1520的增长速度。目前同国际上的几百种产品相比，国内市场还远没有得到开发，像肿瘤诊断和基因芯片试剂都具有巨大的市场潜力。即使从目前需求较大、发展比较成熟的几个病种来看，市场仍有很大的发展潜力。同时随着人们生活水平的提高和国家医疗体制的改革，市场规模必然会进一步扩大。2.临床常见疾病的体外诊断试剂2.1心血管诊断试剂2.1.1心血管疾病的概述根据国际疾病分类原则第九版（ICD-9）规定，心血管病主要包括高血压病、冠心病、肺心病、脑血管病、风湿热、慢性风湿性心脏病及动脉粥样硬化、栓塞等等。但不包括先天性心脏病。其中人们最关心的是死亡率和致残率最高的冠心病和脑血管病，这两种病又有共同的致病基础，即高血压、高脂血症、糖尿病、吸烟等等。因此，冠心病与脑血管病的预防有许多共同之处。心血管病是威胁人类健康的重要疾病，在西方发达国家患病率和死亡率逐步下降时，我国却呈越来越高发的态势。近年心血管病患病率上升很快，这种疾病已成为我国人口总死亡原因第一位。在西方发达国家，由于过去20 年来采取了很多有效预防措施，心血管病发病率已不断下降。但是我国的发病人数和死亡人数却不断增加，所以，我国要全力预防和治疗心血管疾病。2.1.2 预测心血管疾病危险的相关标志物心血管疾病目前已经成为全球致死率第一的疾病，学者们正致力于早期发现心血管疾病危险因素的研究。系统了解冠心病和动脉粥样硬化危险因素，对其进行干预治疗，具有非常重要的意义。综合近年的研究成果，对心血管疾病的危险有“预测”作用的血液中的物质有以下几类：（一）血脂因素1.总胆固醇（TC）冠心病患者血清TC 多数在5.06.5mmol/L。TC 水平越高。冠心病发病越多越早，血清总胆固醇每降低1%。冠心病的危险性可减少2%。多项临床试验表明：降低胆固醇有利于减少冠心病患者的死亡和减少心肌梗死的发生。2.低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)众多研究均表明LDL-C 升高是冠心病的主要病因，降低LDL-C 能降低近期发生心脏病危险40%，还可能降低10 年或更久的远期危险。因此急性冠脉综合征或介入治疗、搭桥手术的住院患者，入院时或24 小时内应测血脂，以便医生有针对性的治疗。3.高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)HDL-C 每下降0.03mmol/L(1mg/dl)，冠心病事件的相对危险性增加2%3%。当HDL-C1.0mmol/L(40mg/dl)时称为低HDL-C，这被认为是一项很强的独立的冠心病危险因素。相反，HDL-C1.55mmol/L(60mg/dl)则对心脏有保护作用。HDL-C主要受某些生活方式(如吸烟、肥胖、活动少等)的影响，并有一定的家族遗传性。4.甘油三酯(TG)有研究表明高TG 也是冠心病的独立危险因素。血清TG 升高常见于代谢综合征患者。（二）动脉炎症因素近年来，越来越多的专家将注意力集中在动脉的炎症反应上，甚至有研究者提出“动脉粥样硬化从根本上来说就是一种炎症性疾病，这正是今后治疗的主要方向。”目前已经开始了对一些炎症生成蛋白的常规检查，年龄较大的人将在检测血脂和血压的基础上，开始对变异基因和炎症相关蛋白的检测。也许在不远的将来，心血管疾病的高危人群将针对基因的异常进行治疗。如果以上这些能够实现，冠脉疾病将在20 年后变为历史。1.超敏C 反应蛋白（hs-CRP）在正常情况下以微量形式存在，当机体有炎症、创伤和冠心病事件时则会明显增加。在多危险因子国际试验（MRFIT）中观察到hs-CRP 水平与冠心病猝死有很强的相关关系；对早期无症状患者，前瞻性的研究显示，hs-CRP 水平增加与冠脉事件、中风及周围血管病相关联，是一种独立的危险因素。近年来用新的敏感方法检测血浆hs-CRP，发现其轻度升高也可增加不稳定性心绞痛患者冠脉事件发生的危险。2.血浆纤维蛋白原（Fib）Fib 在肝脏合成，是与血液凝固有关的血浆蛋白。Fib 增加是机体的一种非特异性反应，常见于有炎症时。近年来研究发现Fib 为冠心病的独立危险因子之一，在急性冠脉综合征（ACS）时血浆中的Fib 即增高，且与病情相关。Fib 是凝血反应中的关键因子，其在粥样硬化斑块的形成和破裂及血栓形成起重要作用。在急性冠脉综合征时测定和随访Fib 具有重要的价值。3肌酸激酶-同工酶（CK-MB）近年来用单克隆抗体、酶免疫荧光测定CK-MB，在急性心肌损伤出现胸痛后24 小时，敏感性可达90%。是临床作为心肌损伤的标志物之一，甚至作为生化诊断的金标准。4. 肌钙蛋白（cTnT 和cTnI）肌钙蛋白为心肌收缩与舒张所必需，其敏感性与特异性比CK-MB 高，因为该蛋白不存在于身体其它部位。急性心肌梗塞诊断中，心肌肌钙蛋白（cTn）是目前认为较好的确定标志物。（三）其它因素1. 胰岛素抵抗胰岛素抵抗是糖尿病的主要病理生理特征，同时也是高血压、冠心病、肥胖及急性冠脉综合征发生的独立危险因素。治疗胰岛素抵抗有利于降低冠心病的发病危险。2. 瘦素瘦素是一个测定人体脂肪量很好的血液标志物。已知身体超重是患心血管疾病的危险因素，血中瘦素水平比体重指数（BMI）能更好地反映肥胖程度，因为瘦素作用于脂肪代谢，并与胰岛素抵抗的其他标志物相关，而与总肥胖程度无关。因此瘦素水平升高则发生冠脉事件的危险升高。2.2中国肝炎系列诊断试剂2.2.1中国肝炎发病情况根据近年来全国各地报告，在筛查中孕妇乙肝表面抗原（HBsAg）阳性率约为5-10%，有三分之一孕妇HBeAg 同时为阳性（即大三阳）。大三阳的孕妇，其所生子女中在半年内成为乙肝病毒携带者的达63-90%。其余三分之二仅HBsAg 阳性孕妇所生子女随访10 年，HBsAg 的总感染率为72.2%。而HBsAg 阴性孕妇的子女总感染率较低，但仍达36.8%。显而易见，由于小儿受母婴传播和水平传播两个因素影响，使小儿乙肝发病的形势严峻。发病率仍以甲型肝炎为多，其次为乙型肝炎，然后是丙型肝炎和戊型肝炎，丁型肝炎在儿童中可能很少。2.2.2“两对半”等肝炎病毒标志物肝炎分许多型，其病毒种类也不同，检测它们的标志物对肝炎诊断和治疗很有帮助。下面就常见的几型顺序介绍：（一）乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg、HAA), 这项化验是判断是否患有乙型肝炎或是否携带乙型肝炎病毒的一项参考指标。以下的五项试验(HBsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb、HBcAb)经常组合在一起，被称为乙肝五项，俗称为“两对半”。当出现阳性结果时，表示肝脏中有乙型肝炎病毒存在和/或复制。乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb) 这项化验是判断患者是否曾被HBV 感染，或注射乙肝疫苗后机体是否产生对HBV 的免疫力的一项参考指标。当出现阳性结果时，有以下两种情况：第一，过去曾发生HBV 自然感染，目前对HBV 有一定的免疫力，常伴有HBcAb阳性。第二，由于接种乙肝疫苗而产生的保护性抗体，此时通常仅HBsAb 单项阳性。乙型肝炎病毒e 抗原(HBeAg) 这项化验是判断患者是否正患乙型肝炎及传染性强弱的一项参考指标。当出现阳性结果时，表示患者正患乙型肝炎，或者患者体内有HBV 活跃复制，传染性强。乙型肝炎病毒e 抗体(HBeAb)这项化验是判断患者是否曾经或目前正患乙型肝炎及传染性强弱的一项参考指标。当出现阳性结果时，表示患者有HBV 感染，或者说明患者体内HBV 复制由活跃进入低复制或非复制期，传染性降低(与HBeAg 阳性时相比较)。乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)这项化验是判断患者是否曾经感染过或现在正在患乙型肝炎的一项参考指标。血清中HBcAb 有两种组分，lgM 型和IgG 型。当出现HBcAbIgM 阳性结果时，表明患者为急性原发性HBV 感染。表示：患者是一个乙型肝炎患者。HBCAblgM 在HAV 原发性感染的早期，通常在血清中持续大约312 个月左右，以后即使再暴露于HBV，通常也无HBcAblgM上升的现象。当出现HBcAbIgG 阳性结果时，表明：患者曾经被HBV 感染。HBcAbIgG 不是一种保护性抗体，因而不能中和HBV 的感染性。HBcAbIgG可以长期存在，甚至终生能检出。（二）丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒(HCV)抗体(HCVAb)这项化验是判断患者是否曾经感染过或现在正在患丙型肝炎的一项参考指标。针对HCV 基因的不同功能区有不同的抗体，其中最主要的抗体是HCVAbCore。其中又分为IgM 型和IgG 型。但目前普遍认为只有IgG 型HCVAbCore 是诊断HCV 感染的可靠指标。这种抗体一旦出现，将长期持续存在。此实验用于判断是否患有内型肝炎，或是否曾经感染过内型肝炎病毒。（三）其它肝炎病毒甲型肝炎病毒(HAV)抗原(HAVAg)这项化验是确诊是否患有甲型肝炎的指标。当出现阳性结果时，表示：患者被HAV 感染；表示患者可能有传染性；由于HAV 感染后排毒的规律，在潜伏期末患者粪便已大量排毒，并达到高峰，发病后开始下降并迅速减低，通常于临床发病34 周后，已难以从粪便中检出HAVAg，因而应结合其他检测项目进行诊断。甲型肝炎病毒抗体(HAVAb) 这项化验是判断是否患有或曾经患有甲型肝炎的指标。血清中HAVAb 含有多种组分，其中主要为IgM 型和IgG 型。当出现HAVAbIgM 阳性结果时，表明患者为HAV 近期感染。丁型肝炎病毒(HDV)抗体(HDVAb) 这项化验是确诊是否患有丁型肝炎的指标。当出现阳性结果时，表示肝脏中有HDV 存在和/域复制。HDVAb分为lgM 型和IgG 型。戊型肝炎病毒(HEV)抗体(HEVAb)这项化验是确诊是否患有戊型肝炎的指标。当出现阳性结果时，表示患者为HEV 感染。HEVAb 分为IgM 型和IgG 型。庚型肝炎病毒(HGV)抗体(HGVAb) 这项化验是确诊是否患有庚型肝炎的指标。当出现阳性结果时，表示患者为HGV 感染。2.3肿瘤标志物检测试剂2.3.1中国肿瘤发病情况分析目前，我国每年新发生的各种恶性肿瘤大约150 万人，死亡约130 万人，大约占死亡总人数的18%。按这个死亡水平计算，全国每一分钟就有25 人死于癌症，每天将有3600 人被癌症夺走生命。通过恶性肿瘤死亡率几十年来动态变化可以看出，随着我国经济的发展、人民生活水平的提高、行为生活方式的改变以及人口老龄化等原因，我国人口的死因谱已发生了很大变化。恶性肿瘤分类构成在城乡有分布的差异，由于城市在经济、卫生、生活条件等方面较农村为优，因此，在食管癌、胃癌、肝癌、宫颈癌等方面，城市死亡率低于农村。以食管癌表现最明显，农村死亡率为城市的2 倍多。但在另一方面，城市受环境污染和其他方面因素的影响，肺癌、乳腺癌、膀胱癌、肠癌等的死亡率也大大高于农村。2.3.2常用肿瘤标志物及主要临床意义1.SCCA 鳞状细胞癌相关抗原 (1.5ng/ml)对宫颈鳞癌、肺和头颈部鳞癌诊断和疗效监测，复发监测有重要意义。2.NSE 神经元特异性烯醇化酶 (0-13ug/L)在SCLC、神经母细胞瘤、APUD 系统肿瘤均可增高。3.TPA 组织多肽抗原(0-1ug/L)它为角蛋白8、18、19 片段，可反映肿瘤增殖状态，用于膀胱癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌、宫颈癌、卵巢癌和肝胆肿瘤的辅助诊断。4.TPS 组织特异性多肽抗原(80u/L)它为角蛋白18 片段M3 抗原决定簇，是反映肿瘤细胞分裂和增殖活性的特异指标。与反映肿瘤容量的标志物CA153、CA125、CA199、CEA、PSA 等联用，既可反映肿瘤增殖活性，亦可反映瘤负荷大小，在乳腺癌、卵巢癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、肝癌和胃肠道肿瘤均可增高。5.Cyfra21-1 (0-6ng/L)它为细胞角蛋白19 片段。Cyfra21-1 对鳞癌敏感性76.5%，腺癌47.8%、小细胞肺癌（SCLC）42.1%。在肺鳞癌：I、II、III、VI 期分别为60%、88.8%、80%和100%。在恶性胸水和间皮瘤，诊断的敏感性和特异性也较高。6.CA72-4 肿瘤相关糖蛋白 (0-6 u/ml)它是乳腺癌、胃肠道癌和卵巢癌的标志物。在胃癌和卵巢癌敏感性45-50%，特异性几乎100%。7.CA242 唾液酸化鞘糖脂抗原(0-20u/ml)它对胰腺癌和胆道肿瘤的诊断较CA199 更具特异性。在结直肠癌、胃癌、卵巢癌、子宫癌、肺癌、头颈部肿瘤等有较高敏感性和特异性。8.CA199 低聚糖类肿瘤相关抗原(0-37u/ml)这是胰腺癌敏感标志物，与AFP、CEA 联用对胃肠道肿瘤的诊断更有价值。在卵巢癌、淋巴瘤、胃癌、肺癌、食道癌和乳腺癌阳性率约30%。9.CA153 粘蛋白样大分子抗原 (0-30u/ml)在非转移性乳腺癌有30-40%增高，而转移性乳腺癌有70-80%增高。在肺癌、卵巢癌、胰腺癌、结直肠癌均可升高。10.CA125 粘蛋白样糖蛋白复合物(0-35u/ml)在卵巢癌敏感性46%，特异性99%，主要为浆液性卵巢癌。在胰腺癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胃肠道恶性肿瘤、子宫癌均增高。11.PSA 前列腺特异性抗原(0-4ng/ml)它是前列腺疾病的最佳标志物，大于10ng/ml 时前列腺癌敏感性为99%。前 列腺肥大、急性前列腺炎亦可增高，F-PSA/PSA 比值有助于鉴别诊断。12.F-PSA 游离型PSA（0-1ng/ml）F-PSA/PSA 比值对前列腺癌与前列腺良性病变有重要鉴别诊断意义，PSA 浓度越高，F-PSA/PSA 比值越小，前列腺癌可能性越大。13.MG7-Ag 胃癌抗原（3.60.7u/ml）55%的胃癌 MG7-Ag 升高，5%假阳性。14.CEA 癌胚抗原（0-5ng/ml）在结直肠癌，CEA 升高与分期相关，术前水平与术后复发时间及生存期相关。在乳腺癌、肺癌、胰腺癌和前列腺癌也可升高。在脑膜瘤患者脑脊液中CEA100%升高。15.AFP 甲胎蛋白（25ng/ml）它是肝细胞和生殖细胞肿瘤的标志物，与HCG 和TPS 联合应用，有助于生殖细胞肿瘤和肝癌的鉴别诊断。16.HCG 人绒毛膜促性腺激素（3ug/L）可用于妊娠诊断；滋养层恶性肿瘤敏感性100%，非精原睾原癌70%，精原细胞瘤10%；绒毛膜上皮癌，HCG 阳性，AFP 阴性；内胚窦瘤（卵黄囊肿瘤）则AFP 阳性，HCG 阴性。17.2MG 2 微球蛋白(0-6ng/ml)与浆细胞瘤数量成正比，并与骨髓瘤分期相关。还在其它几种血液肿瘤（慢粒、淋巴瘤）和多种实体肿瘤（如胆管癌、肝癌、胃癌、结直肠癌、肺癌、食管癌、膀胱癌等）及某些非肿瘤疾病 （肾脏疾病、肝炎、肝硬化、风湿性关节炎等）也可增高。18.Her-2/neu 表皮生长因子受体-2又称CerbB2，在20-30%乳腺癌高表达， Her-2 高表达病人对内分泌治疗不敏感，易复发、易转移。在卵巢癌也有高表达，且提示预后不良。19.S100 血清100 蛋白在许多恶性黑色素瘤晚期患者明显升高，且能反映疗效和转归并能早期预告复发和转移。在神经系统损伤和炎症时，也可增高。20.EB 病毒抗体 IgA/IgG/IgM抗EB 病毒早期抗原的抗体，可以反映EB 病毒的感染和致癌性，故常用于鼻咽癌、Burkitt 淋巴瘤辅助诊断依据。2.3.3 肿瘤标志物检测的几种方法标记免疫分析是一大类超灵敏度、高特异性检测技术的总称，因其具有许多独特优点，已成为基础医学研究及医学检验的重要技术手段。它们的基本原理相同，只是依标记物的不同而最终测量到的信号各异。已被广泛应用的检测方法主要有：放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）、时间分辨荧光免疫分析（TFIA）和化学发光免疫分析（CLIA）。1 放射免疫分析 放射免疫分析自20 世纪60 年代问世以来，在生物医学各个领域得到了广泛的应用。20 世纪90 年代，RIA 技术研究的主要进展是试管固相法。有学者将试管固相法称之为第四代RIA。固相RIA 和免疫放射测量法（IRMA）的灵敏度、特异性、稳定性及测量范围均优于液相竞争法；尤其是不需要使用离心机进行分离，简化了操作步骤，提高了检测的精密度。活化试管RIA和IRMA 技术系共价键结合，包被均一，稳定性好，实现了分析技术一步法，易于实现自动化分析。2 酶免疫分析 由于RIA 和IRMA 有着自身固有的、难以克服的缺陷，Engvall 和Vanweemen 各自领导的研究小组分别以酶代替同位素，于1971 年创立了酶免疫分析技术(EIA)。因其标记物制备简单，有效期长，对环境无污染等特点，EIA 技术得到了迅速的普及和发展。20 世纪90 年代后期，在EIA 中引进了放大系统，主要是生物素亲和素系统的应用，使测定的灵敏度赶上或超过了RIA。（1）酶联免疫荧光测量法（ELIFA）同时兼具酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光免疫分析（FIA）两种方法的优点，其灵敏度较传统的ELISA 明显提高，最小检出值达10-15mol/L。（2）增强发光酶免疫分析法（ELEIA）是20 世纪80年代后期发展起来的新型免疫分析技术，其特点是：酶促增强发光信号，且发光信号保持稳定，该方法的最小检出值达10-20mol/孔。3 化学发光免疫分析 1981 年，Pannagli 将化学发光原理与免疫反应结合起来，建立了化学发光免疫分析法（CLIA）。这种方法虽然灵敏度可以达到放免的水平，但是影响检测结果的因素较多，稳定性较差，而且在发生化学反应之后，样品的发光无法再现。为了克服这一方法学上的缺陷，有的学者着手研究发光稳定剂，以便使发光信号的持续时间延长。最近的研究结果证明，使用甲基吖啶酯标记抗体更为理想，因不必加催化剂，所以受外界因素的干扰少，且操作简单，稳定性高，标记蛋白后不影响发光信号的产生。目前，在这一领域全自动测定仪器的研制发展很快，极大地提高了该方法的分析效率和普及推广。近年来，免疫电化学发光（IECL）技术正在快速发展。这一方法具有灵敏、快速、稳定、选择性强、重现性好、易于操作、方法灵活多样的优点。它是集电化学发光、生物素抗生物素、免疫分析，并由固相免疫分析发展起来的磁微球等技术于一体，是众多学科交叉的研究领域。IECL 分析方法多样，广泛地应用于抗原、半抗原和抗体的免疫检测，其线性范围也较宽，符合临床检验的需要。IECL 技术的发展趋势在于合成新的发光标记物，优化标记技术和免疫分析方法。3.体外诊断试剂的发展方向3.1 国内体外诊断试剂的产业化现状目前，国内临床诊断试剂市场规模已经发展到每年30 亿-40 亿元人民币的销售额，其中传统的临床生化和免疫诊断是最大的两个细分市场，约占到整个体外诊断试剂的60%左右，其它血液、尿液分析、微生物等市场分额相对较小，而分子诊断（PCR 诊断试剂）发展迅速，市场份额快速提高。目前国内主要的诊断试剂生产企业有80多家，其中销售额较大的有科华生物、复兴医药、中生北控、上海容盛、华美生物等。同国外公司相比，国内的企业普遍规模小、品种少，发展不均衡。大多数的生产企业的产品往往只是集中在一两个细分市场，无法提供全系列诊断产品服务和技术支持。另外，国外也有许多公司在中国内地设销售机构直接销售产品，但主要是价格较高的封闭式仪器和试剂为主。3.2诊断试剂的研究和发展方向我国诊断试剂制药产业的研发方向结合传统医药的优势，发展重点应针对肿瘤、心血管系统、艾滋病及免疫缺陷等重大疾病。我国作为一个12 亿人口大国，每年人口净增1700 万，进入2000 年，60 岁以上的人口达到1 亿左右，这对我国诊断试剂制药业发展提供了巨大的市场需求，因而诊断试剂制药在国内具有广阔的市场前景：其一，随着药品管理体制改革，非处方药市场和农村市场前景看好；其二，与化学药和原料药生产相比 ，诊断试剂具有独特的技术壁垒；其三，一旦开发的新药获市场认同，那么在生命周期内它将为生产者带来巨额经济效益。目前，我国已经制定了明确的生物制药产业发展规划和产业技术政策，政府从上到下对生物技术研究开 发的支持和政策扶持；国内各大企业（包括民营企业）对生物技术的关注和资金投入；我国金融界积极参与 生物技术产业发展，尤其是许多有实力的公避开都有参与了生物技术的开发；而我国生物技术产业领域目前已经汇集了一批自己培养和从国外归来具有高学历、高素质的科学家和企业家，这四方面的因素对于我国生 物技术产业的快速发展起到了很重要的作用。由于诊断试剂产业投资回报周期为5 年至8 年，而我国进入生物工程领域的时间尚短，回报的周期尚未到来。预计到二十一世纪的前几年将是我国诊断试剂产业的收获季节。3.3诊断试剂产品的定位方向目前市场上的诊断试剂盒主要在生化和胶体金方面有很大的市场前景。因此我公司可以向这两个大方向发展。在国内市场，诊断试剂的年市场容量大约是3040 亿元人民币，其中：生化产品约占30%，即10 亿人民币左右的市场潜量，并且每年都以两位数以上的速度增长。 生化试剂盒方面主要的市场是缺血性冠状动脉疾病、肝胆系统疾病和呼吸系统疾病。可以在短期内拓展生化试剂盒的产品线。一方面可以分摊临床销售的开拓费用，增加销售额；另一方面可以使InTec跳出酶联免疫试剂生产销售厂家的定位，成为医院的体外诊断专业合作伙伴。1.缺血性冠状动脉疾病近年来随着免疫自动化仪器的引进,我国大医院多已开展了新的缺血性冠状动脉疾病诊断组合即肌红蛋白、肌钙蛋白T 或I、CK-MB 质量，由于这三项指标在AMI 发病时升高的时间窗不同，且特异性与灵敏度高，故三者联用有可能监测心梗早期发病直至发病数天的全过程，并对溶栓疗效判断提供有价值的信息，肌钙蛋白T 还可用于不稳定心绞痛的监测，可望成为预防AMI发生的警示指标。2.肝胆系统疾病现今关于胆汁酸检测的方法学发展到第四代试剂盒，测定灵敏度进一步提高并实现了检测管道无污染。3.呼吸系统疾病IgG、IgM、IgA、IgE的测定在全国气管炎会议上报告并在国内推广。常用的胶体金诊断试剂盒有肝炎检测系列，性病检测系列，肿瘤疾病检测系列，优生优育检测系列和毒品类。我公司可以采取制造高质量的产品，差异化策略，树立优秀的品牌形象并给予充足的市场资金投入，以最高的价格，从市场中一层一层地收益。21