医院检验中心血小板抗体测定PAIgGPAIgMPAIgA操作规程

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医院检验中心血小板抗体测定(PAIgG, PAIgM, PAIgA)操作规程( 1)试剂1)鼠抗人 IgG 多抗cat NO 0279蒸馏水复溶后分装,每支50ul ,置 - 30贮存2)鼠抗人IgM 多抗cat NO 0285同上3)鼠抗人IgA 多抗cat NO 0278同上4) FITC 羊抗鼠荧光单抗cat NO 0279按说明书复溶,置 - 30贮存( 2)方法血小板固定: 取富含血小板的血浆0.4ml 加 1mlTEN缓冲液中。再取上述稀释血浆0.4ml 加等量 2%的多聚甲醛,室温固定15 分钟。洗涤:在已固定的血小板试管中加2mlTEN缓冲液, 3000转/ 分,离心 5 分钟,洗涤 2 次。弃上清液, 加 TEN缓冲液 0.4ml 。测定:测定管中分别加入IgG、IgM、 IgA 单抗 50ul ,将固定血小板50ul 分别加入测定管和对照管。室温20 分钟,用 2mlTEN 3000 转 / 分离心 5 分钟洗涤一次后,再加0.6mlTEN。上机:用各自的阴性对照。阴性对照值在1.0 左右,计数 1 万个血小板。(3)参考范围PAIgG 6.3-20.3%PAIgM 2.6-14.5%
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