人体及动物生理学实验

1人体及动物人体及动物生理学实验生理学实验2实实 验验 题题 目目学时学时实验一实验一实验目的、要求、实验报告的书写、实验室规则；实验目的、要求、实验报告的书写、实验室规则；常用生理实验技术、生理仪器的使用常用生理实验技术、生理仪器的使用3实验二实验二 坐骨神经腓肠肌标本的制备坐骨神经腓肠肌标本的制备刺激强度和频率与骨骼肌收缩的关系刺激强度和频率与骨骼肌收缩的关系3实验三实验三 神经干复合电位的引导、传导速度的测定神经干复合电位的引导、传导速度的测定 3实验四实验四 血细胞计数与红细胞溶解血细胞计数与红细胞溶解 3实验五实验五 血红蛋白含量测定与血红蛋白含量测定与A B OA B O血型鉴定血型鉴定 3实验六实验六 蛙心起搏点的观察、蛙心起搏点的观察、 期前收缩与代偿间歇期前收缩与代偿间歇3实验七实验七 蛙类离体心脏灌流蛙类离体心脏灌流 3实验八实验八 人体动脉血压测定人体动脉血压测定; ;心音听诊心音听诊; ;心电图描记心电图描记; ;呼吸通气量测定呼吸通气量测定3实验九实验九家兔动脉血压的神经、体液调节家兔动脉血压的神经、体液调节 3实验十实验十家兔呼吸运动调节家兔呼吸运动调节; ;胸内负压测定胸内负压测定 3 实验目录实验目录3实验十一实验十一家兔离体小肠段平滑肌生理特性家兔离体小肠段平滑肌生理特性 3实验十二实验十二家兔尿生成的调节家兔尿生成的调节 3实验十三实验十三反射时的测定反射时的测定 反射弧的分析反射弧的分析3实验十四实验十四家兔大脑皮质运动区的刺激效应与去大脑僵直家兔大脑皮质运动区的刺激效应与去大脑僵直3实验十五实验十五视力、视野和盲点的测定视力、视野和盲点的测定3 总总 计计 45实验目录实验目录4实验一实验一人体及动物生理学实验人体及动物生理学实验常用仪器、设备及器械的使用常用仪器、设备及器械的使用 实验目的、要求、实验目的、要求、实验报告的书写、实验报告的书写、实验室规则；实验室规则；常用生理实验技术、生理仪器的使用。常用生理实验技术、生理仪器的使用。5生理学实验目的生理学实验目的o使学生正确使用生理学的基本实验仪器，初步掌握使学生正确使用生理学的基本实验仪器，初步掌握基本操作技术；基本操作技术；o使学生了解获得知识的基本方法和初步分析整理实使学生了解获得知识的基本方法和初步分析整理实验结果的能力，并借以验证和巩固理论课的某些基验结果的能力，并借以验证和巩固理论课的某些基本理论。本理论。o在实验过程中培养学生科学的思维方法、实事求是在实验过程中培养学生科学的思维方法、实事求是的科学态度和严谨的学风。的科学态度和严谨的学风。o通过实验逐步培养学生具有敏锐的观察力和分析能通过实验逐步培养学生具有敏锐的观察力和分析能力以及独立思考和解决问题的能力。同时培养学生力以及独立思考和解决问题的能力。同时培养学生的创新意识、科学素养和科研能力。的创新意识、科学素养和科研能力。 o通过书写实验报告，提高学生分析、归纳问题及文通过书写实验报告，提高学生分析、归纳问题及文字报答能力。字报答能力。6实验要求实验要求o实验前实验前，学生必须认真，学生必须认真预习实验指导预习实验指导，了解，了解实验的目的要求、实验设计原理、简要的操实验的目的要求、实验设计原理、简要的操作步骤和注意事项，还应复习与本实验有关作步骤和注意事项，还应复习与本实验有关的理论部分，以提高实验的目的性和主动性，的理论部分，以提高实验的目的性和主动性，达到进一步巩固有关理论知识的效果。达到进一步巩固有关理论知识的效果。7实验中实验中：o应认真听讲，按教师要求进行各项实验操作。仔细观察、应认真听讲，按教师要求进行各项实验操作。仔细观察、认真记录实验中出现的各种生理现象，并对引起生理现认真记录实验中出现的各种生理现象，并对引起生理现象的原因、意义进行分析和思考。象的原因、意义进行分析和思考。o实验用器材、物品要摆放整齐，便于操作。注意保持实实验用器材、物品要摆放整齐，便于操作。注意保持实验桌面的清洁卫生，随时清除污物。实验桌上不得放置验桌面的清洁卫生，随时清除污物。实验桌上不得放置与实验无关的物品。与实验无关的物品。o爱护仪器和实验动物，注意节约实验材料。不经教师许爱护仪器和实验动物，注意节约实验材料。不经教师许可，不得动用他人或他组的仪器用品，公用物品在使用可，不得动用他人或他组的仪器用品，公用物品在使用完后应放回原处，以免影响他人使用。完后应放回原处，以免影响他人使用。o遵守实验室规则。遵守实验室规则。o实验结束前请教师审查实验结果。如有错误，及时补救。实验结束前请教师审查实验结果。如有错误，及时补救。未经教师许可，学生不得擅自终止实验或离开实验室。未经教师许可，学生不得擅自终止实验或离开实验室。 8实验后实验后：o应将实验用具整理就绪，放回原处。所有手术器械、应将实验用具整理就绪，放回原处。所有手术器械、手术桌和其它手术用品擦洗干净，仪器用干布擦干净。手术桌和其它手术用品擦洗干净，仪器用干布擦干净。o实验用具如有破损或缺少，及时报告指导教师。做好实验用具如有破损或缺少，及时报告指导教师。做好实验室的清洁卫生工作。实验室的清洁卫生工作。o按教师要求妥善处理实验动物，不可自行处理。尤其按教师要求妥善处理实验动物，不可自行处理。尤其不能将为处死的动物随手丢弃。实验后，关闭水源、不能将为处死的动物随手丢弃。实验后，关闭水源、电源，经教师允许放可离开实验室。电源，经教师允许放可离开实验室。o整理实验记录，按教师要求书写实验报告并及时交给整理实验记录，按教师要求书写实验报告并及时交给教师批阅。如发现不合格要求的经指明问题，退回重教师批阅。如发现不合格要求的经指明问题，退回重写。写。9实验报告的书写实验报告的书写o实验报告是对实验的全面总结；是理论联系实际和实验报告是对实验的全面总结；是理论联系实际和应用知识的重要环节，是对学生撰写科学论文能力应用知识的重要环节，是对学生撰写科学论文能力的初步培养，可为今后的科学研究打下良好的基础。的初步培养，可为今后的科学研究打下良好的基础。 实验报告要文字简练、条理清楚、观点明确、实验报告要文字简练、条理清楚、观点明确、字迹清楚，正确使用标点符号。字迹清楚，正确使用标点符号。o实验报告有一定的格式：实验报告有一定的格式： o内容要求：实验题目、实验目的、实验原理、实验内容要求：实验题目、实验目的、实验原理、实验器材、实验步骤、实验结果、分析讨论、结论。器材、实验步骤、实验结果、分析讨论、结论。 重点强调实验结果的处理和分析讨论内容。重点强调实验结果的处理和分析讨论内容。10实验报告有一定的格式：实验报告有一定的格式：o姓名、班级、指导教师、学号、组别、日期姓名、班级、指导教师、学号、组别、日期o实验序号及实验题目、实验室、室温、气压、实验序号及实验题目、实验室、室温、气压、湿度、同组人、日期湿度、同组人、日期o实验题目实验题目o实验目的实验目的 o实验原理实验原理实验器材实验器材实验步骤实验步骤实验结果实验结果 分析及讨论分析及讨论 结论结论11o实验结果是实验报告中最为重要的部分，应将实验实验结果是实验报告中最为重要的部分，应将实验过程中所观察到的现象经过处理后的原始资料进行过程中所观察到的现象经过处理后的原始资料进行真实、正确、详细地描述。真实、正确、详细地描述。o有记录曲线的应进行合理的剪切、归类、在实验报有记录曲线的应进行合理的剪切、归类、在实验报告的适当位置进行粘贴，并加以标注和必要的文字告的适当位置进行粘贴，并加以标注和必要的文字说明，如曲线的序号、名称；施加刺激（药物）的说明，如曲线的序号、名称；施加刺激（药物）的标记。标记。o有的实验结果是数据，可绘制成图表进行表达。有的实验结果是数据，可绘制成图表进行表达。实验结果实验结果12图图 洋葱液对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响洋葱液对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响13浓度浓度(g/ml)幅度幅度(g)频率频率(次次/min)加药前加药前加药后加药后加药前加药前加药后加药后0.601.251.862.500.410.1970.400.2410.410.2630.410.2370.550.247*0.610.253*0.650.239*0.670.282*12.830.99113.150.98313.201.07813.100.95013.201.14113.200.91513.601.06813.200.915表表1 不同浓度洋葱液对家兔离体小肠平滑肌活动的影响不同浓度洋葱液对家兔离体小肠平滑肌活动的影响 * p0.05有显著意义；有显著意义； * p0.01有非常显著意义有非常显著意义14讨论和结论讨论和结论o讨论和结论是实验报告中最具有创造性的工作部分，讨论和结论是实验报告中最具有创造性的工作部分，是学生独立思考、独立工作能力的具体体现，因此是学生独立思考、独立工作能力的具体体现，因此应该严肃、认真，不能盲目抄袭书本和他人的实验应该严肃、认真，不能盲目抄袭书本和他人的实验报告。报告。o进行实验结果的讨论，首先要判断实验结果是否为进行实验结果的讨论，首先要判断实验结果是否为预期的，然后根据已掌握的课堂理论或查阅资料所预期的，然后根据已掌握的课堂理论或查阅资料所获得的知识，对实验结果进行有针对性的解释、分获得的知识，对实验结果进行有针对性的解释、分析，并指出其生理意义。析，并指出其生理意义。o如果出现和预期的结果相矛盾的地方，也应分析其如果出现和预期的结果相矛盾的地方，也应分析其产生的原因。产生的原因。15实验结论实验结论o实验结论是从试验结果中进一步归纳出来的实验结论是从试验结果中进一步归纳出来的一般性、概括性的推理，即对本次实验所能一般性、概括性的推理，即对本次实验所能验证的概念、原理或理论的简明总结。验证的概念、原理或理论的简明总结。o结论应与本次实验的目的相呼应。结论应与本次实验的目的相呼应。o结论的书写要简明扼要，概括性强，不必要结论的书写要简明扼要，概括性强，不必要再罗列具体的结果，所引用的课外参考资料再罗列具体的结果，所引用的课外参考资料应注明出处。应注明出处。16实验室规则实验室规则o遵守纪律，因故外出或早退应向老师请假。进实验室必遵守纪律，因故外出或早退应向老师请假。进实验室必须穿实验服。实验时应严肃认真，不进行与实验无关的须穿实验服。实验时应严肃认真，不进行与实验无关的活动。活动。o实验者必须先熟悉仪器使用要点，仪器损坏或失灵，应实验者必须先熟悉仪器使用要点，仪器损坏或失灵，应请老师修理或调换。违章操作致使仪器损坏者，应按章请老师修理或调换。违章操作致使仪器损坏者，应按章赔偿。赔偿。o实验器械，用后洗净擦干，如数归还。若有损坏或遗失，实验器械，用后洗净擦干，如数归还。若有损坏或遗失，应及时报告，酌情赔偿。应及时报告，酌情赔偿。o爱护公物，节约器材、药品和动物。实验物品不得擅自爱护公物，节约器材、药品和动物。实验物品不得擅自带离实验室。带离实验室。o实验结束，将本组实验器材和桌凳收拾干净，将动物尸实验结束，将本组实验器材和桌凳收拾干净，将动物尸体及污物投放指定处。实验室由各组轮流打扫，保持整体及污物投放指定处。实验室由各组轮流打扫，保持整洁。洁。17四、生理学实验常用仪器、设备的使用四、生理学实验常用仪器、设备的使用 o生理学常用刺激器材及使用方法生理学常用刺激器材及使用方法 1.1.刺激器（刺激参数刺激器（刺激参数刺激强度、时间、频率）刺激强度、时间、频率） 2.2.刺激电极刺激电极 3.3.锌铜弓锌铜弓 o生理学常用记录器材及使用方法生理学常用记录器材及使用方法 1. 1.生物机能实验信号采集处理系统生物机能实验信号采集处理系统(BL-420) P25-26(BL-420) P25-26 2. 2.打印机打印机 3.3.多导生理记录仪多导生理记录仪 o其它：其它： 1.1.万能支台万能支台 2.2.张力换能器张力换能器 3.3.血压换能器血压换能器 4.4.记滴器记滴器18生物机能实验信号采集处理系统生物机能实验信号采集处理系统(BL-420)(BL-420)o掌握开机与关机、实验工作界面进入与退出的操作方法；掌握开机与关机、实验工作界面进入与退出的操作方法；o掌握通道的选择输入方法与不同生理信号的输入方法；掌握通道的选择输入方法与不同生理信号的输入方法；o掌握选择扫描速度的方法并认清横坐标表示的时间信号；掌握选择扫描速度的方法并认清横坐标表示的时间信号；o掌握控制扫描开关（开、暂停与停止实验）的方法，并学掌握控制扫描开关（开、暂停与停止实验）的方法，并学会保存实验记录、反演记录、剪辑、复制实验结果的方法；会保存实验记录、反演记录、剪辑、复制实验结果的方法；o学习刺激器参数设置中，各项刺激参数的调节方法与刺激学习刺激器参数设置中，各项刺激参数的调节方法与刺激标记的使用方法；标记的使用方法；o学习编辑实验标记的方法；学习编辑实验标记的方法；o学习生理信号的显示与记录方法。学习生理信号的显示与记录方法。19五、生理学实验常用手术台、手术器械的使用方法五、生理学实验常用手术台、手术器械的使用方法 1.手术台：兔、狗、鼠手术台：兔、狗、鼠202.2.手术器械的种类及使用（实验指导手术器械的种类及使用（实验指导P4-8P4-8）（1）手术刀：主要用于切开皮肤或脏器。）手术刀：主要用于切开皮肤或脏器。 执刀方法执刀方法-执弓式、执笔式、握持式、反挑式执弓式、执笔式、握持式、反挑式（2）手术剪：主要用于剪皮肤或肌肉等粗软组织。）手术剪：主要用于剪皮肤或肌肉等粗软组织。 分类：尖头剪、钝头剪，直剪、弯剪，剪毛剪，眼科剪分类：尖头剪、钝头剪，直剪、弯剪，剪毛剪，眼科剪（3）手术镊：主要用于夹持或牵拉切口的皮肤或肌肉组织。）手术镊：主要用于夹持或牵拉切口的皮肤或肌肉组织。 分类：分大、中、小、眼科镊，圆头、尖头，直头、弯头，有齿、无齿。分类：分大、中、小、眼科镊，圆头、尖头，直头、弯头，有齿、无齿。 持镊姿势：类似于执笔式。持镊姿势：类似于执笔式。（4）金冠剪：可用于剪开皮肤、内脏、肌肉、骨骼及绳线等。持剪姿）金冠剪：可用于剪开皮肤、内脏、肌肉、骨骼及绳线等。持剪姿 势同一般手术剪。势同一般手术剪。（5）毁髓针）毁髓针（6）玻璃分针：专用于分离神经与血管的工具。尖端圆滑，直头或弯头。）玻璃分针：专用于分离神经与血管的工具。尖端圆滑，直头或弯头。 持玻璃分针的姿势同执笔式。持玻璃分针的姿势同执笔式。（7）止血钳：直止血钳、弯止血钳）止血钳：直止血钳、弯止血钳（8）其他：持针器、咬骨钳、颅骨钻、缝针、动脉夹等）其他：持针器、咬骨钳、颅骨钻、缝针、动脉夹等21六、生理学实验常用溶液及配制方法六、生理学实验常用溶液及配制方法1.常用盐溶液：（常用盐溶液：（P210） 生理盐水（两栖类生理盐水（两栖类6.57.0、哺乳类）、任氏液、哺乳类）、任氏液、 台式液、洛（乐）氏液台式液、洛（乐）氏液 2.常用动物麻醉药物剂量和使用方法常用动物麻醉药物剂量和使用方法 （P8-10）o局部麻醉：局部麻醉：0.5%1.0%盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因、2%盐酸可卡因盐酸可卡因o全身麻醉：乙醚、全身麻醉：乙醚、2%3%戊巴比妥钠、戊巴比妥钠、20%25%氨氨基甲酸乙酯（乌拉坦）、苯巴比妥钠基甲酸乙酯（乌拉坦）、苯巴比妥钠3.常用抗凝剂的配制：常用抗凝剂的配制： 肝素、草酸钠、柠檬酸钠肝素、草酸钠、柠檬酸钠22七、动物实验的基本操作技术七、动物实验的基本操作技术1.1.常用动物的捕捉方法常用动物的捕捉方法 2.2.常用动物麻醉方法：常用动物麻醉方法： 静脉注射、腹腔注射、肌肉注射静脉注射、腹腔注射、肌肉注射 3.3.常用动物的固定方法：常用动物的固定方法： 背位（仰卧位）固定法、腹位（俯卧位）固定法、蛙类固定法背位（仰卧位）固定法、腹位（俯卧位）固定法、蛙类固定法 4.4.常用手术的基本操作常用手术的基本操作 （1 1）手术切口与止血）手术切口与止血 （2 2）手术结）手术结 （3 3）颈部手术）颈部手术 （4 4）腹部手术）腹部手术 （5 5）股部手术）股部手术5.5.采血技术采血技术1.学习坐骨神经腓肠肌标本制备方法。学习坐骨神经腓肠肌标本制备方法。 2.观察不同的刺激强度和频率与骨骼肌观察不同的刺激强度和频率与骨骼肌收缩形式之间的关系。收缩形式之间的关系。腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。刺激强度会引起肌肉的不同反应。当刺激强度小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时当刺激强度小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。的刺激为阈下刺激。当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。这时即使再增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不这时即使再增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不再随之加大。再随之加大。可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激强度。最适刺激强度。给具有兴奋性的肌肉一个短促的阈刺激，肌肉就发生一次迅速给具有兴奋性的肌肉一个短促的阈刺激，肌肉就发生一次迅速的收缩，称为单收缩。的收缩，称为单收缩。若给予两个或两个以上的阈刺激时，可因刺激的频率不同而呈若给予两个或两个以上的阈刺激时，可因刺激的频率不同而呈现不同的收缩形式。如果两个或多个刺激的间隔大于该肌肉现不同的收缩形式。如果两个或多个刺激的间隔大于该肌肉单收缩的全部时间，则引起波型上互相分开的两个或多个单单收缩的全部时间，则引起波型上互相分开的两个或多个单收缩；若后一个刺激落在前一次收缩的舒张期，就会形成两收缩；若后一个刺激落在前一次收缩的舒张期，就会形成两个或多个单收缩不同程度的总合，其收缩幅度比单收缩高。个或多个单收缩不同程度的总合，其收缩幅度比单收缩高。在一定范围内，刺激间隔越小，收缩幅度就越高，称为复合收在一定范围内，刺激间隔越小，收缩幅度就越高，称为复合收缩。若多个刺激引起波型呈锯齿状的收缩曲线，称不完全强缩。若多个刺激引起波型呈锯齿状的收缩曲线，称不完全强直收缩，若多个刺激间隔进一步缩小，使后一个刺激落在前直收缩，若多个刺激间隔进一步缩小，使后一个刺激落在前一个收缩的收缩期内，肌肉就处于完全持久的收缩状态，产一个收缩的收缩期内，肌肉就处于完全持久的收缩状态，产生一个没有舒张期的持续的收缩曲线，叫做完全强直收缩。生一个没有舒张期的持续的收缩曲线，叫做完全强直收缩。 1.药品与器材药品与器材 任氏液。蛙板，玻璃板，蛙任氏液。蛙板，玻璃板，蛙类手术器械类手术器械1套套(粗剪刀、组织剪、眼科剪粗剪刀、组织剪、眼科剪各各1把，大、小镊子各把，大、小镊子各1把，探针把，探针1根，玻根，玻璃分针璃分针2根根)，培养皿，锌铜弓，丝线，图，培养皿，锌铜弓，丝线，图钉，污物缸，肌动器，张力换能器；钉，污物缸，肌动器，张力换能器；BL-420生物机能实验系统。生物机能实验系统。 2.实验对象实验对象 蟾蜍。蟾蜍。方法步骤方法步骤 1.制备坐骨神经腓肠肌标本制备坐骨神经腓肠肌标本破坏脑和脊髓破坏脑和脊髓- -图图A A 剪去躯干上部及内脏剪去躯干上部及内脏- -图图B B 剥皮剥皮 、洗手及器械洗手及器械、分离两腿、分离两腿 制作坐骨神经腓肠肌标本制作坐骨神经腓肠肌标本- -图图C.DC.D用锌铜弓检查标本兴奋性用锌铜弓检查标本兴奋性ABCD2.将标本固定在肌动器内，连接张力换能器。将标本固定在肌动器内，连接张力换能器。3.打开电脑，进入打开电脑，进入BL-420BL-420生物机能实验系统。生物机能实验系统。实验项目实验项目神经肌肉实验神经肌肉实验 刺激强度与反应的关系刺激强度与反应的关系 骨骼肌单收缩的分析骨骼肌单收缩的分析 骨骼肌收缩的总和与强直收缩骨骼肌收缩的总和与强直收缩打开实验项目选择，进入打开实验项目选择，进入刺激强度与刺激强度与反应的关系反应的关系项目项目调节刺激装置的设置调节刺激装置的设置启动波形显示图标启动波形显示图标 选用单刺激方式，调节刺激强度，使肌肉收选用单刺激方式，调节刺激强度，使肌肉收缩幅度适中缩幅度适中 将实验用通道的扫描速度调快，启动刺激开将实验用通道的扫描速度调快，启动刺激开关。关。 当显示通道出现一个单收缩曲线时，立即点当显示通道出现一个单收缩曲线时，立即点击暂停图标击暂停图标 测量单收缩的三个时程：潜伏期、收缩期和测量单收缩的三个时程：潜伏期、收缩期和舒张期。舒张期。 打开实验项目选择，进入打开实验项目选择，进入刺激频率刺激频率与反应的关系与反应的关系项目项目 调节刺激装置的设置调节刺激装置的设置 启动波形显示图标启动波形显示图标结果结果 1.刺激强度与反应的关系刺激强度与反应的关系（阈下刺激、阈刺激、遇上刺激、最大刺激）（阈下刺激、阈刺激、遇上刺激、最大刺激）图图 骨骼肌单收缩的分析骨骼肌单收缩的分析3.单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩图图 刺激频率与反应的关系刺激频率与反应的关系注意事项注意事项1.1.实验过程中经常用任氏液湿润标本，以防干燥。实验过程中经常用任氏液湿润标本，以防干燥。2.2.股骨不可保留过短，否则标本不好固定。股骨不可保留过短，否则标本不好固定。3.3.分离神经须用玻璃分针，不能用金属器械。分离神经须用玻璃分针，不能用金属器械。4.4.避免过长时间地连续刺激标本，以防标本疲劳。避免过长时间地连续刺激标本，以防标本疲劳。1.为什么要用任氏液湿润标本？为什么要用任氏液湿润标本？2.锌铜弓为什么能够检验神经肌肉的兴奋性？锌铜弓为什么能够检验神经肌肉的兴奋性？41坐骨神经干标本的制备坐骨神经干标本的制备神经干神经干复合复合动作电位的动作电位的引导、传导速度的测定引导、传导速度的测定实验三实验三42目的要求目的要求学习蛙坐骨神经干标本的制备。学习蛙坐骨神经干标本的制备。观察坐骨神经干复合动作电位的波形，观察坐骨神经干复合动作电位的波形，并了解其产生的基本原理。并了解其产生的基本原理。了解动作电位在神经干上的传导，学习了解动作电位在神经干上的传导，学习测定其传导速度测定的方法。测定其传导速度测定的方法。43实验原理实验原理1神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。标志着神经发生兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双向的动作电位，如在两个引导电极之间引导出双向的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出动作电位即为单向将神经麻醉或损坏，则引导出动作电位即为单向动作电位。动作电位。神经细胞的动作电位是以神经细胞的动作电位是以“全或无全或无”的方式发生的方式发生的。坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组的。坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。强度的变化而变化的。44图图 神经干双相动作电位神经干双相动作电位45双相动作电位双相动作电位兴奋区细胞外引导电极检流计46实验原理实验原理2神经干受到有效刺激兴奋以后，产生的动神经干受到有效刺激兴奋以后，产生的动作电位以脉冲的形式按一定的速度向远处作电位以脉冲的形式按一定的速度向远处扩布传导。不同类型的纤维其传导兴奋的扩布传导。不同类型的纤维其传导兴奋的速度是各不相同的。速度是各不相同的。测定神经纤维上兴奋的传导速度测定神经纤维上兴奋的传导速度(v)，在远，在远离刺激点的不同距离处分别引导其动作电离刺激点的不同距离处分别引导其动作电位，两引导点之间的距离为位，两引导点之间的距离为S，在两引导，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为点分别引导出的动作电位的时相差为t 。再按照公式即可计算其传导速度：再按照公式即可计算其传导速度：v=s/t 47动作电位传导速度的测定动作电位传导速度的测定+St 传导速度测定传导速度测定 = St刺激器输入通道R1- Rr1+ R2- R2+48图图 神经冲动传导速度的测定神经冲动传导速度的测定49实验器材实验器材1.仪器与材料：生物信号处理系统、解剖针、仪器与材料：生物信号处理系统、解剖针、手术剪、眼科剪、圆头手术镊、尖头手术手术剪、眼科剪、圆头手术镊、尖头手术镊、玻璃分针、神经屏蔽盒及连接导线，镊、玻璃分针、神经屏蔽盒及连接导线，棉花、蛙板、烧杯。棉花、蛙板、烧杯。2.药品：任氏液药品：任氏液3.动物：蟾蜍动物：蟾蜍505152方法步骤方法步骤1.1.坐骨神经干标本的制备坐骨神经干标本的制备 毁脑脊髓毁脑脊髓 剪除躯干上部及内脏剪除躯干上部及内脏 剥皮剥皮（之后洗净双手和用过的全部手术器械之后洗净双手和用过的全部手术器械） 完成坐骨神经标本完成坐骨神经标本 n分离两腿分离两腿n游离坐骨神经游离坐骨神经 完成坐骨神经标本完成坐骨神经标本53图图 蛙坐骨神经干标本蛙坐骨神经干标本54l 神经干标本盒刺激电极与生物信号处理系统的刺激输神经干标本盒刺激电极与生物信号处理系统的刺激输出相连。出相连。l 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统系统1、2通道。通道。RM6240C微机生物信号处理系统神经干标本盒。 S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+2.连接实验装置连接实验装置553.实验观察实验观察打开电脑，进入生物机能实验系统。打开电脑，进入生物机能实验系统。实验项目实验项目神经肌肉实验神经肌肉实验 神经干动作电位记录与观察神经干动作电位记录与观察 双相动作电位的观察双相动作电位的观察 仪器参数：仪器参数：1、2通道时间常数通道时间常数0.02s、滤波频率、滤波频率1KHz、 灵敏度灵敏度5mV，采样频率：，采样频率：100KHz， 扫描速度：扫描速度：0.2ms/div。刺激方式：单刺激，。刺激方式：单刺激， 刺激幅度刺激幅度1.0V，刺激波宽，刺激波宽0.1ms，延迟，延迟2ms， 同步触发。同步触发。 测定神经干动作电位的传导速度。测定神经干动作电位的传导速度。56图图 神经干双相动作电位神经干双相动作电位实验结果实验结果1.1.神经干双相动作电位神经干双相动作电位57图图 神经冲动传导速度的测定神经冲动传导速度的测定2.2.神经冲动传导速度的测定神经冲动传导速度的测定58注意事项注意事项标本剥制过程，尽量减少神经的损伤；标本剥制过程，尽量减少神经的损伤；刺激参数设置要合理，过大会损毁神经。刺激参数设置要合理，过大会损毁神经。双刺激的参数要一致。双刺激的参数要一致。59结果结果观察和记录神经干动作电位并对其产生原观察和记录神经干动作电位并对其产生原理进行分析；理进行分析；测出动作电位传导的速度测出动作电位传导的速度60l解释在一定范围内神经干动作电位的振幅解释在一定范围内神经干动作电位的振幅随刺激强度而改变，是否与单个神经纤维随刺激强度而改变，是否与单个神经纤维动作电位的动作电位的“全全”或或“无无”定律相矛盾？定律相矛盾？思考题思考题61实验四实验四血细胞计数血细胞计数红细胞溶解红细胞溶解62目的与要求目的与要求1.掌握红细胞和白细胞人工计数的方法和原理。掌握红细胞和白细胞人工计数的方法和原理。2.学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液渗透压对维持细胞正常形态与功能的重要性。液渗透压对维持细胞正常形态与功能的重要性。3.观察红细胞溶血现象观察红细胞溶血现象63实验原理实验原理l将一定量的血液经一定倍数的等渗盐水稀释后，将一定量的血液经一定倍数的等渗盐水稀释后，置于血细胞计数板的计数室内，计数一定容积置于血细胞计数板的计数室内，计数一定容积溶液内的红细胞或白细胞，然后再推算出溶液内的红细胞或白细胞，然后再推算出1立立方毫米或方毫米或1L血液内的各种细胞数。血液内的各种细胞数。l红细胞在高渗氯化钠溶液中，会失去水分发生红细胞在高渗氯化钠溶液中，会失去水分发生皱缩；在低渗氯化钠溶液中，会因过多水分进皱缩；在低渗氯化钠溶液中，会因过多水分进入红细胞而膨胀，甚至破裂，使血红蛋白释出，入红细胞而膨胀，甚至破裂，使血红蛋白释出，此即红细胞溶解。此即红细胞溶解。l红细胞对低渗溶液具有不同的抵抗力，这种抵红细胞对低渗溶液具有不同的抵抗力，这种抵抗力与红细胞表面积抗力与红细胞表面积/体积有关，也即红细胞体积有关，也即红细胞有不同的渗透脆性，表面积有不同的渗透脆性，表面积/体积比值小者抵体积比值小者抵抗力小抗力小(渗透脆性大渗透脆性大)；反之，抵抗力大（渗透；反之，抵抗力大（渗透脆性小）。脆性小）。64实验器材实验器材1.1.仪器与材料：显微镜，血细胞计数板，盖玻片，仪器与材料：显微镜，血细胞计数板，盖玻片，一次性定量毛细取血管（一次性定量毛细取血管（10l10l、20l20l），消），消毒棉球，擦镜纸，毒棉球，擦镜纸，5ml5ml小试管（小试管（1212支），试管支），试管架，移液管（架，移液管（1ml1ml及及2ml2ml），滴管，玻璃棒，细），滴管，玻璃棒，细耳球。耳球。2.2.药品：红细胞稀释液、白细胞稀释液，蒸馏水，药品：红细胞稀释液、白细胞稀释液，蒸馏水， 171mmol/L171mmol/L氯化钠溶液氯化钠溶液 ，肝素钠。，肝素钠。3.3.动物：家兔动物：家兔65方法步骤方法步骤1.血细胞的计数血细胞的计数采血及稀释采血及稀释 红细胞：红细胞：2.00ml稀释液稀释液+ 0.01ml血液血液 稀释倍数：稀释倍数：200 白细胞：白细胞：0.38ml稀释液稀释液+ 0.02ml血液血液 稀释倍数：稀释倍数：20清洗计数板并熟悉计数板及计数室的结构清洗计数板并熟悉计数板及计数室的结构计数方法计数方法 稀释血液滴入计数室后，须静置稀释血液滴入计数室后，须静置23分钟，然后低倍镜下计数分钟，然后低倍镜下计数 计数时应循一定的路径以免遗漏或重复。计数时应循一定的路径以免遗漏或重复。 对于分布在划线上的血细胞，依照对于分布在划线上的血细胞，依照“数上不数下，数上不数下， 数左不数右数左不数右”的原则进行计数的原则进行计数 计算：计算： 6667682.红细胞溶血红细胞溶血渗透脆性的测定渗透脆性的测定 取小试管取小试管10支，编号后，按下表制成不同浓度的支，编号后，按下表制成不同浓度的NaCl 溶液。溶液。向每一试管中各加一滴血，混匀（切勿用力震荡），向每一试管中各加一滴血，混匀（切勿用力震荡），室温下放置室温下放置2小时后观察结果小时后观察结果 观察结果：观察结果：试管号试管号12345678910171mmol/LNaCl (ml)1.61.51.41.31.21.11.00.90.80.7蒸馏水（蒸馏水（ml）0.91.01.11.21.31.41.51.61.71.8NaCl溶液浓溶液浓度（度（%）0.640.600.560.520.480.440.400.360.320.2869实验结果实验结果1.1.记录记录5 5个中方格中红细胞数，并根据公式换算个中方格中红细胞数，并根据公式换算出每立方毫米血液中红细胞数。出每立方毫米血液中红细胞数。 红细胞数红细胞数/mm3 = 5个中格红细胞数个中格红细胞数100002.2.记录四个大方格中白细胞数，并根据公式换算记录四个大方格中白细胞数，并根据公式换算出每立方毫米血液中白细胞数。出每立方毫米血液中白细胞数。 白细胞数白细胞数/ mm3 = 4个大方格白细胞数个大方格白细胞数503.3.仔细观察各小试管中上下溶液的颜色、透明度仔细观察各小试管中上下溶液的颜色、透明度等，根据现象判断出红细胞的最小抵抗和最大等，根据现象判断出红细胞的最小抵抗和最大抵抗的氯化钠溶液浓度并记录。抵抗的氯化钠溶液浓度并记录。70注意事项注意事项1.血液加入试管后，须充分摇匀，但动作要轻。血液加入试管后，须充分摇匀，但动作要轻。2.计数室内细胞分布要均匀。计数室内细胞分布要均匀。 红细胞：各中方格间数目相差不超过红细胞：各中方格间数目相差不超过20个；个； 白细胞：各大方格间数目相差不超过白细胞：各大方格间数目相差不超过8个。个。3.混悬液滴入计数室时，液量要适当。混悬液滴入计数室时，液量要适当。4.所用吸管、试管、计数板等必须十分干净。所用吸管、试管、计数板等必须十分干净。71作业1.计算结果，并分析哪些因素可能会影响计算结果，并分析哪些因素可能会影响血细胞计数的准确性？血细胞计数的准确性？2.判断红细胞最大脆性和最小脆性，并结判断红细胞最大脆性和最小脆性，并结合实验现象说明根据？合实验现象说明根据？血红蛋白含量测定血红蛋白含量测定ABO血型鉴定血型鉴定1.掌握测定血红蛋白含量的基本方法掌握测定血红蛋白含量的基本方法 比色法比色法 2.学习鉴定血型的基本方法。学习鉴定血型的基本方法。3.观察红细胞凝集现象，掌握观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型血型鉴定的原理。鉴定的原理。测定血红蛋白量的方法很多，常用比色法。测定血红蛋白量的方法很多，常用比色法。比色法即沙利氏比色法。其原理是在一定量血比色法即沙利氏比色法。其原理是在一定量血液中加入少许盐酸，酸不仅使红细胞膜破坏，液中加入少许盐酸，酸不仅使红细胞膜破坏，而且使原来位于红细胞的亚铁血红素转变成而且使原来位于红细胞的亚铁血红素转变成高铁血红素（酸化血红素），后者呈较稳定高铁血红素（酸化血红素），后者呈较稳定的棕色。将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白测的棕色。将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白测定计的标准色进行目测比色，即得每定计的标准色进行目测比色，即得每100ml100ml血血液所含的血红蛋白克数或百分率。液所含的血红蛋白克数或百分率。血型通常是指红细胞的血型，是根据存在于红细胞血型通常是指红细胞的血型，是根据存在于红细胞膜外表面的特异性抗原膜外表面的特异性抗原(镶嵌于红细胞膜上的特异镶嵌于红细胞膜上的特异性糖蛋白性糖蛋白)来确定的，这种抗原或称凝集原是由遗来确定的，这种抗原或称凝集原是由遗传基因决定的。传基因决定的。血清中的抗体或称凝集素，可与红细胞膜上不同的血清中的抗体或称凝集素，可与红细胞膜上不同的相应抗原结合，产生凝集反应，最后发生红细胞相应抗原结合，产生凝集反应，最后发生红细胞溶解。溶解。由于这种现象在临床上在输血前必须进行血型鉴定，由于这种现象在临床上在输血前必须进行血型鉴定，以确保安全输血。在血型系统中最重要的是以确保安全输血。在血型系统中最重要的是ABO血型系统，其次为血型系统，其次为Rh系统。系统。血型血型A型型（B抗体）抗体）B型型（A抗体）抗体）O型型（A、B抗体）抗体）AB型型（无抗体）（无抗体）A型（型（A抗原）抗原）B型（型（B抗原）抗原）O型（无抗原）型（无抗原）AB型（型（AB抗原）抗原）l 据受试者红细胞上是否含有凝集原和所含凝集据受试者红细胞上是否含有凝集原和所含凝集原种类的不同，可将血型分为原种类的不同，可将血型分为A、B、AB和和 O四四种基本血型。见下表：种基本血型。见下表：血红蛋白计、血红蛋白计、0.1mol/L盐酸溶液、一次性盐酸溶液、一次性20l定量毛细取血管、滴管、玻璃棒、蒸定量毛细取血管、滴管、玻璃棒、蒸馏水、家兔馏水、家兔显微镜、载玻片、一次性刺血针、消毒牙签、显微镜、载玻片、一次性刺血针、消毒牙签、玻璃棒、镊子、标准血清（玻璃棒、镊子、标准血清（A、B、O型）、型）、生理盐水、生理盐水、75%酒精棉球、酒精棉球、 （一）血红蛋白测定（一）血红蛋白测定1.熟悉血红蛋白计的组成及结构熟悉血红蛋白计的组成及结构2.取取0.1mol/L盐酸至血红蛋白稀释管的刻度盐酸至血红蛋白稀释管的刻度10处处（用百分率计算的那一侧刻度值）。（用百分率计算的那一侧刻度值）。3.用一次性毛细取血管吸血至刻度用一次性毛细取血管吸血至刻度20l，并将其注入，并将其注入血红蛋白稀释管的盐酸液内，反复洗涤吸管多次，血红蛋白稀释管的盐酸液内，反复洗涤吸管多次，摇匀放置十分钟，使盐酸与红细胞及其内部的血摇匀放置十分钟，使盐酸与红细胞及其内部的血红蛋白充分作用。红蛋白充分作用。4.比色：将稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格比色：将稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中，并用滴管向稀释试管内逐滴加入蒸馏水并及中，并用滴管向稀释试管内逐滴加入蒸馏水并及时混匀，直至颜色与标准玻璃的色柱的颜色相同时混匀，直至颜色与标准玻璃的色柱的颜色相同为止，此时稀释管上液面的读数即为止，此时稀释管上液面的读数即100ml血液中血液中血红蛋白的克数。血红蛋白的克数。1.取一载玻片，并在左中右位置上方用蜡笔依次注取一载玻片，并在左中右位置上方用蜡笔依次注上上A、B和和AB字样。字样。2.用滴管分别依次吸抗用滴管分别依次吸抗A血清、抗血清、抗B 血清和抗血清和抗AB血血清各一滴，分别滴在载玻片清各一滴，分别滴在载玻片A、B和和AB的下方。的下方。3.采血：常规消毒，穿刺采血部位并采血。采血：常规消毒，穿刺采血部位并采血。4.将血液分别与抗将血液分别与抗A血清、抗血清、抗B血清和抗血清和抗AB血清混血清混匀，在室温下静止数分钟后观察凝集结果。匀，在室温下静止数分钟后观察凝集结果。观察结果：观察结果：1.一定要准确掌握进入稀释管内的血液量（一定要准确掌握进入稀释管内的血液量（20l）。）。2.蒸馏水需逐滴加入，多做几次比色，以免稀释过蒸馏水需逐滴加入，多做几次比色，以免稀释过量。量。3.凝血现象的观察需一定的的时间，必要时需在显凝血现象的观察需一定的的时间，必要时需在显微镜下观察。微镜下观察。1.1.得出实验结果，并分析哪些因素可能会影得出实验结果，并分析哪些因素可能会影响血红蛋白数量的准确性？响血红蛋白数量的准确性？2.2.判断你的血型，并说出你的根据？判断你的血型，并说出你的根据？83实验六实验六蛙心起搏点的观察、蛙心起搏点的观察、期前收缩与代偿间歇期前收缩与代偿间歇84目的要求目的要求1.学习暴露蛙类心脏的方法，熟悉心脏结构。学习暴露蛙类心脏的方法，熟悉心脏结构。2.观察心脏起搏点以及各部分的自律性高低和观察心脏起搏点以及各部分的自律性高低和心脏的兴奋性传导顺序。心脏的兴奋性传导顺序。3.学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。4.观察心室在收缩活动的不同时期对额外刺激观察心室在收缩活动的不同时期对额外刺激的反应。的反应。5.了解期前收缩与代偿间歇产生的原因。了解期前收缩与代偿间歇产生的原因。85实验原理实验原理1.两栖类动物的心脏为两心房、一心室，心脏的起搏两栖类动物的心脏为两心房、一心室，心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的自动节律最高，心房次之，点是静脉窦。静脉窦的自动节律最高，心房次之，心室最低。正常情况下，心脏的活动节律服从静脉心室最低。正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。 两栖类动物的心脏解剖两栖类动物的心脏解剖2.斯氏结扎斯氏结扎：3.心肌细胞的生理特点是具有兴奋性、自律性、传心肌细胞的生理特点是具有兴奋性、自律性、传导性、收缩性。心肌细胞兴奋性的最大特点是导性、收缩性。心肌细胞兴奋性的最大特点是有效不应期特别长（收缩期，舒张早期）有效不应期特别长（收缩期，舒张早期）868788实验器材实验器材1.1.器材：生物信号处理系统，器材：生物信号处理系统，张力换能器，刺张力换能器，刺激电极，激电极，蛙类手术器械，蛙类手术器械，蛙心夹，蛙心夹，丝线，丝线，万能支架万能支架2.2.药品：任氏液药品：任氏液3.3.动物：蟾蜍动物：蟾蜍89方法步骤方法步骤（一）蛙心起搏点的观察（看录像）（一）蛙心起搏点的观察（看录像） 1.破坏脑脊髓破坏脑脊髓 。 2.仰卧位固定于蛙板上。仰卧位固定于蛙板上。 3.打开胸腔暴露心脏打开胸腔暴露心脏 ，观察心脏的结构，观察心脏的结构 。 4. 斯氏结扎，记录结果。斯氏结扎，记录结果。静脉窦静脉窦心房心房心室心室对照对照第一扎第一扎第二扎第二扎表表 斯氏结扎后各部位波动频率（次斯氏结扎后各部位波动频率（次/分钟）分钟）9091图图 蟾蜍心脏的背面观和腹面观蟾蜍心脏的背面观和腹面观921. 破坏脑脊髓破坏脑脊髓 2.仰卧位固定于蛙板上。仰卧位固定于蛙板上。3. 打开胸腔暴露心脏打开胸腔暴露心脏4. 蛙心夹于心脏蛙心夹于心脏舒张期舒张期夹住心尖夹住心尖 5. 连接实验装置，如图连接实验装置，如图6. 选择合适的刺激强度选择合适的刺激强度 ；分别在心室舒张的早；分别在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激，观察心跳期、中期和晚期给予单个刺激，观察心跳曲线的变化。曲线的变化。 （二）蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇（二）蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇9394实验结果实验结果9596971. 蟾蜍毁髓时要彻底。蟾蜍毁髓时要彻底。2. 实验过程中，应经常用任氏液湿润心脏。实验过程中，应经常用任氏液湿润心脏。3. 刺激电极要与心室肌接触良好，应避免短路。刺激电极要与心室肌接触良好，应避免短路。4. 心跳曲线的上升支应代表心室收缩，下降支代表心跳曲线的上升支应代表心室收缩，下降支代表心室舒张，如相反则应将换能器倒向。心室舒张，如相反则应将换能器倒向。5. 先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉，以检测强度先用刺激电极刺激蟾蜍的腹壁肌肉，以检测强度是否适宜。是否适宜。 注意事项注意事项98思考题思考题1.正常情况下，为什么静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点？它正常情况下，为什么静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点？它对潜在起搏点如何控制？对潜在起搏点如何控制？2.每次结扎后会出现什么现象，为什么？每次结扎后会出现什么现象，为什么？ 3.如何证实心肌有较长的不应期？心肌的较长不应期有如何证实心肌有较长的不应期？心肌的较长不应期有何生理意义？何生理意义？4.期前收缩后一定出现代偿间歇吗？为什么？期前收缩后一定出现代偿间歇吗？为什么？5.代偿间歇是怎样产生的？代偿间歇是怎样产生的？6. 为何心肌有期前收缩而骨骼肌不会出现？为何心肌有期前收缩而骨骼肌不会出现？实验七实验七蛙类离体心脏灌流蛙类离体心脏灌流1.1.学习斯氏离体蛙心灌流法。学习斯氏离体蛙心灌流法。2.2.了解心肌的生理特性了解心肌的生理特性 3.3.观察钠离子、钾离子、钙离子及肾上腺素观察钠离子、钾离子、钙离子及肾上腺素（AdrAdr）、乙酰胆碱（）、乙酰胆碱（AchAch）等对离体心）等对离体心脏活动的影响。脏活动的影响。心脏具有自动节律性收缩的特性，可用人工心脏具有自动节律性收缩的特性，可用人工灌流的方法，研究心脏活动的规律及特点；灌流的方法，研究心脏活动的规律及特点；还可观察灌流液成分的改变对离体心脏活还可观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。动的影响。心肌细胞生理特性表现为：兴奋性、传导性心肌细胞生理特性表现为：兴奋性、传导性和自动节律性、收缩性。和自动节律性、收缩性。 1.动物：蟾蜍。动物：蟾蜍。2.器械：斯氏蛙心套管、套管夹、支架、双器械：斯氏蛙心套管、套管夹、支架、双凹夹、滑轮、烧杯、常用手术器械、蛙板、凹夹、滑轮、烧杯、常用手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、滴管、培养皿（或小烧杯）、污物缸、纱滴管、培养皿（或小烧杯）、污物缸、纱布、棉线、布、棉线、3.药品：任氏液、药品：任氏液、0.65%NaCl、5%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：5000肾上腺素、肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、乙酰胆碱、300U/ml肝素。肝素。 1.连接实验装置：连接实验装置：2.离体蛙心的制备离体蛙心的制备 斯氏蛙心插管法，斯氏蛙心插管法，将插好离体心脏的套管固定在将插好离体心脏的套管固定在支架上，并与张力换能器支架上，并与张力换能器相连相连3.启动生物信号采集处理系统启动生物信号采集处理系统实验项目实验项目蛙心灌流蛙心灌流 开始实验开始实验记录正常心搏曲线。记录正常心搏曲线。改用改用0.65%NaCl溶液灌流，并做好加药标记，观溶液灌流，并做好加药标记，观察心搏变化。待曲线出现明显变化时，立即吸去察心搏变化。待曲线出现明显变化时，立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜套管中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗任氏液清洗23次，待心搏恢复正常。次，待心搏恢复正常。向套管内加向套管内加26滴滴5%NaCl溶液，做好加药记号，溶液，做好加药记号，观察心搏曲线的频率及振幅变化。当曲线出现明观察心搏曲线的频率及振幅变化。当曲线出现明显变化时，应立即吸去套管中的灌流液，同时做显变化时，应立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗23次，待心次，待心搏恢复正常。搏恢复正常。同法向套管内加入同法向套管内加入13滴滴2%CaCl2溶液，溶液，观察并记录心搏曲线的变化。当出现明显观察并记录心搏曲线的变化。当出现明显变化时，立即更换任氏液，待心搏恢复正变化时，立即更换任氏液，待心搏恢复正常（如果恢复迟缓，可多次冲洗）。常（如果恢复迟缓，可多次冲洗）。向套管中加向套管中加12滴滴1%KCl溶液，记录心搏溶液，记录心搏曲线的变化。当心搏曲线变化时，用同法曲线的变化。当心搏曲线变化时，用同法更换灌流液，待心搏恢复正常。更换灌流液，待心搏恢复正常。同法记录套管中加入同法记录套管中加入12滴的滴的1：5000肾肾上腺素后心搏曲线的变化。上腺素后心搏曲线的变化。同法记录套管中加入同法记录套管中加入12滴的滴的1：10000乙酰胆碱后心搏曲线的变化。乙酰胆碱后心搏曲线的变化。5.整理记录整理记录注意事项：注意事项：1.换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线，同时保持灌流液面一致。基线，同时保持灌流液面一致。111实验八实验八人体动脉血压测定人体动脉血压测定; ;心音听诊心音听诊; ;呼吸通气量的测定呼吸通气量的测定112 目的要求目的要求 1.学习并掌握间接测量人体血压的原理和方法，学习并掌握间接测量人体血压的原理和方法，观察某些因素对动脉血压的影响。观察某些因素对动脉血压的影响。2.学习心音听诊的方法，识别第一心音与第二学习心音听诊的方法，识别第一心音与第二心音。心音。3.掌握呼吸通气量的测定方法。掌握呼吸通气量的测定方法。113 实验原理实验原理1 1 o通常血液在血管内流动时并没有声音，但当外加压力使血通常血液在血管内流动时并没有声音，但当外加压力使血管变窄形成血液涡流时，则可发生声音（血管音）。因此，管变窄形成血液涡流时，则可发生声音（血管音）。因此，可以根据血管音的变化来测量动脉血压。测定人体动脉血可以根据血管音的变化来测量动脉血压。测定人体动脉血压最常用的方法是使用血压及间接测压。测压时，用压脉压最常用的方法是使用血压及间接测压。测压时，用压脉带在手臂或手腕（腕式血压计）加压，当外界压力超过动带在手臂或手腕（腕式血压计）加压，当外界压力超过动脉的收缩压时，动脉血流完全被阻断，此时在动脉处听不脉的收缩压时，动脉血流完全被阻断，此时在动脉处听不到任何声音。当外加压力等于或稍低于动脉内的收缩压而到任何声音。当外加压力等于或稍低于动脉内的收缩压而高于舒张压时，则在心脏收缩时，动脉内可有少量的血流高于舒张压时，则在心脏收缩时，动脉内可有少量的血流通过，而心室舒张时却无血流通过。血液断续的通过血管通过，而心室舒张时却无血流通过。血液断续的通过血管时，会发出声音。故恰好可以完全阻断血流的最小外加压时，会发出声音。故恰好可以完全阻断血流的最小外加压力（即发生第一次声音时的压力）相当于收缩压。当外加力（即发生第一次声音时的压力）相当于收缩压。当外加压力等于或小于舒张压时，血管内的血流连续通过，所发压力等于或小于舒张压时，血管内的血流连续通过，所发出的音调会突然降低或消失。在心脏舒张时有少许血流通出的音调会突然降低或消失。在心脏舒张时有少许血流通过的最大管外压力（即音调突然降低时的压力）相当于舒过的最大管外压力（即音调突然降低时的压力）相当于舒张压。张压。114 实验原理实验原理2 2