低能量氦氖激光血管内照射联合中药对糖尿病脑梗死家兔的影响

低能量氦-氖激光血管内照射联合中药对糖尿病脑梗死家兔的影响 作者：王波魏海峰林兰刘喜明楚小燕王兆礼【摘要】 ：目的 观察低能量氦-氖激光血管内照射(ILLLI)配合中药治疗对实验性糖尿病脑梗死家兔血浆血栓素(TXB2)、6-酮前列环素(6-Keto-PGF1)和血管紧张素(Ang )水平的影响。方法 经四氧嘧啶造成糖尿病及光化学方法造成的高脂家兔糖尿病脑梗死模型35只,分为模型组、单纯激光照射组、糖脑络通方治疗组、激光中药组并进行不同治疗,测其血浆TXB2、6-Keto-PGF1及Ang水平,进行组间比较及与正常组比较。结果 与模型组比较,单纯激光和中药组均能降低TXB2及Ang、升高6-Keto-PGF1水平,而激光联合中药组作用更明显。结论 低能量氦-氖激光血管内照射联合中药糖脑络通方可显著降低TXB2和Ang、升高6-Keto-PGF1水平,从而达到治疗糖尿病脑梗死的目的。 【关键词】 糖尿病脑梗死低能量氦-氖激光血管内照射糖脑络通汤血栓素6-酮前列环素血管紧张素Effect of Intravenous Low Intensity Laser Radiation Combined with TCM on Model Rabbit of Diabetic StrokeAbstract：Objective To observe the effect of intravenous low intensity laser radiation (ILLLI) combined with traditional Chinese medicine on TXB2, 6-Keto-PGF1 and Ang II of the rabbits of experimental diabetic stroke. Method 35 successfully modeled rabbits, after alloxian injection for diabetes and photochemical radiation for stroke, were randomized into four treatment group-control group (B), ILIB group (C), a group with compound treatment of ILIB and TCH (D), TCM treatment group (E), and 7 unmodeled rabbits were made as the normal group (A). TXB2, 6-Keto-PGF1 and Ang II level were observed and compared. Result Compared with group B, group C and E can significantly rectify the disorderly TXB2, 6-Keto-PGF1 and Ang II, Group D was better than C and E. Conclusion ILLLI combined with TCM can effectively rectify the TXB2, 6-Keto-PGF1 and Ang II level, reduce nervous injury, cure diabetes cerebral infarction.Key words：diabetes mellitus；cerebral infarction；intravenous low intensity laser radiation；Tangnaoluotong Decoction；TXB2；6-Keto-PGF1；Ang II 低能量氦-氖激光血管内照射疗法(intravascular low level laser irradiation,ILLLI)已被证实有改善血液流变学性质、增强免疫调节功能、清除中分子物质、抗脂质过氧化、加速自由基的清除等作用,并广泛用于心脑血管疾病的治疗。临床研究表明,该疗法可有效地治疗糖尿病脑血管并发症1。笔者通过比较ILLLI治疗糖尿病脑梗死家兔后其血浆血栓素(TXB2)、6-酮前列环素(6-Keto-PGF1)和血管紧张素(Ang )含量的变化,进一步探讨ILLLI在糖尿病脑血管病治疗中的机制。1 材料及方法1.1 仪器ZJC480型电脑多功能氦-氖激光血管内照射治疗仪,长春中吉光电公司；JLT-B冷强光透照仪,河北泊头市医用光电仪器厂。1.2 动物新西兰大白兔53只,购自中国药品生物制品检定所(北京市实验动物许可证：京动许字(2000)第017号总062号),体重2.5 kg左右,适应性喂养2周后,纳入实验。动物称重后随机抽出正常对照组(A组)7例,其余进行以下模型制作。1.3 造模 糖尿病模型：参考文献2方法造成家兔糖尿病模型。家兔禁食812 h,经耳缘静脉注射新鲜配制的5%四氧嘧啶生理盐水,初次剂量为120 mg/kg,选取空腹血糖不足11.1 mmol/L者以150 mg/kg剂量注射。选取经2次造模后空腹血糖在11.1 mmol/L以上者,每只每日给高脂饲料60 g(含1%胆固醇,15%蛋黄粉,5%猪油)加普通饲料喂养。2周后制作脑梗死模型。脑梗死模型：参考文献3-4方法,用光化学方法造成脑梗死。在以3%戊巴比妥钠1 mL/kg体重经耳缘静脉麻醉后,将其头部固定在立体定位仪上,取家兔左侧颅骨中线与冠状缝向后向左各0.6 cm处为中心,纵行切开头皮2 cm。暴露颅骨,用牙科车床锯开1 cm1 cm大小的骨窗后,经耳缘静脉按1 mL/kg体重注射虎红(Rose Bengal,3.5%),2 min后用冷强光透照仪经直径为0.7 cm的圆形光导探头由骨窗照射10 min。术区撒青霉素粉适量,局部以牙托粉封闭骨窗,逐层缝合切口。1.4 分组及给药 将术后成功造模的家兔以其血糖值随机分组为模型组(B组)、单纯激光组(C组)、激光中药组(D组)、中药治疗组(E组),每组7只。C组：在以3%戊巴比妥钠1 mL/kg体重经耳缘静脉麻醉后,经另侧耳缘静脉插入无菌一次性光纤针,经光纤导管连接低能量氦-氖激光照射仪。照射波长632.8 nm,输出功率3 mW,1 h/次,每2日1次,共治疗15次。E组以糖脑络通方(主要含黄芪、地黄、水蛭、丹参等)煎成汤剂,所给药物均按人-兔等效剂量计算。D组在C组基础上加用E组用药。B组同时灌胃相应体积的生理盐水。此后,各用药组每周测1次体重,根据体重调整给药量。1.5 观察方法及检测指标 经耳静脉抽取静脉血,用酶法测定血糖(FBS),检测试剂盒购自北京中生生物工程高技术公司,以OLYMPUS AU640全自动生化分析仪分析。经耳静脉抽取静脉血,放射免疫法测定TXB2、6-Keto-PGF1、血管紧张素(Ang )、血管紧张素(Ang )；用GC-911-放射免疫计数器,检测试剂盒购自华英生物技术研究所。1.6 统计学方法 采用SPSS统计软件进行方差分析,LSD法进行组间比较。2 结果 实验中有6只动物在麻醉过程中死亡,其中模型组1只,激光组2只,中药组1只,激光中药组2只,在统计时将其剔除。结果见表1表3。表1 各组家兔治疗前后静脉血糖测定结果(略)表2 治疗后各组家兔血浆血栓素及6-酮前列环素比较(略)表3 治疗后各组家兔血浆血管紧张素比较(略)3 讨论 实验中模型家兔出现明显的血管内皮因子调节紊乱,表现为高TXB2、Ang及低6-Keto-PGF1血症。提示长期的高血糖、高血脂及光化学照射可显著损害血管内皮功能状态,导致其内皮因子分泌紊乱,而内皮因子分泌紊乱又进一步加重糖尿病血管并发症的程度5。正常人血栓素A2(TXA2)是由血小板微粒体合成并释放的一种具有强烈促进血管收缩和血小板聚集的生物活性物质；前列环素(PGI2)是由血管壁内皮细胞合成和释放的具有抗血小板聚集和舒张血管的生物活性物质。正常生理状态下,两者血浆或组织中TXA2和PGI2的浓度及其比例处于相对平衡。TXA2与PGI2不稳定,很快代谢为较为稳定的TXB2和6-Keto-PGF1。测定TXB2与6-Keto-PGF1的含量可代表TXA2与PGI2的水平。糖尿病患者TXA2合成增多,且在动脉内皮损害部位的PGI2合成减少或缺乏,不能生成足量的PGI2 ,使血小板聚集增强,血管趋向痉挛,在局部引起血管阻塞,发生脑血管病变。研究表明,血浆6-Keto-PGF1含量减低是脑血栓形成的危险因素,TXB2生成增多是脑梗死后的结果,反映脑组织破坏程度6。Ang是肾素-血管紧张素系统主要成分之一,具有强烈收缩血管、升高血压作用,有报道,Ang与脑循环障碍、脑水肿有关7。临床研究发现,在脑梗死病程3 d内,血浆Ang明显升高,持续到病程1014 d,2528 d下降,且神经功能缺损严重,提示在脑梗死中,Ang参与了脑循环损害过程,Ang浓度可反映脑梗死病情轻重程度8。Ang升高可促进内皮素大量释放,使脑血管收缩加剧,神经细胞坏死而使脑损伤进一步加剧,造成恶性循环。 研究证实：低能量激光能降低血液中具有血管痉挛和前聚集作用的物质肾素和血管紧张素等,升高血管扩张和抗聚集作用的物质PGl2、PGE,从而起到改善血液流变学性质,改善微循环的作用。鉴于糖尿病脑血管疾病的中医基本病机是以气阴两虚为本,瘀血阻络为标,故糖脑络通方以益气养阴、活血化瘀组方。 本实验结果显示,低能量氦-氖激光血管内照射联合糖脑络通方,在降低血糖的同时,能够更好的降低糖尿病脑梗死兔血浆TXB2、Ang水平,升高6-Keto-PGF1水平,从而更好的改善脑部的微循环,防止血小板聚集以及血栓形成,为临床治疗糖尿病脑梗死提供了新的思路。【参考文献】 1 董为人,王铁丹,肖应庆,等.低强度He-Ne激光血管内照射复合治疗糖尿病性血管病变J.应用激光,1992,12(5)：234236.2 孟庆棣.八仙长寿汤治疗糖尿病的实验研究J.中成药研究,1984, (11)：25.3 Wester P, Watson BD, Prado R,et al. A photothrombotic ring model of rat stroke-in-evolution displaying putative penumbral inversionJ. Stroke,1995,26(3)：444450.4 石秉霞,徐建林,郭云良,等.光化学脑梗塞动物模型建立的实验观察J.青岛医学院学报,1995,31(2)：9093.5 Stehouwer CD, Lambert J, Donker AJ, et al. Endothelial dysfunction and pathogenesis of diabetic angiopathyJ. Cardiovasc Res, 1997, 34：5568.6 吴 江.急性脑血栓形成患者血浆TXB2、6-keto-PGF1含量、血小板聚集功能、血脂、脂蛋白及血液粘度变化观察J.中风与神经疾病杂志, 1991,8(1)：1518.7 张志文,章 翔.实验性脑损伤后心房肽与血管紧张素的变化及意义J.中华医学杂志,1994,74(9)：545.8 周 武.脑梗塞患者血浆内皮素与肾素-血管紧张素系统及降钙基因相关肽的动态观察J.同济医科大学学报,1997,26(3)：195197.9 / 9文档可自由编辑打印