巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析

.1药物分析药物分析主讲：胡承波主讲：胡承波 Mobile:13594698076Mobile:13594698076E-mail:E-mail:重庆文理学院材料与化工学院化工制药系重庆文理学院材料与化工学院化工制药系第十章第十章巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 .2本本 章章 主主 要要 内内 容容 第一节第一节 巴比妥类药物的分析巴比妥类药物的分析第二节第二节 苯并二氮杂卓类的分析苯并二氮杂卓类的分析第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 .3第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 学学 习习 要要 求求 一、掌握巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药及一、掌握巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药及主要的理化性质；鉴别试验及含量测定的原理。主要的理化性质；鉴别试验及含量测定的原理。 二、熟悉二、熟悉 本类药物鉴别试验及含量测定的常用本类药物鉴别试验及含量测定的常用方法，特殊杂质与检查方法。方法，特殊杂质与检查方法。.4第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 巴比妥及苯并二氮杂卓类药物均为临床上广泛应用的镇静巴比妥及苯并二氮杂卓类药物均为临床上广泛应用的镇静催眠药。催眠药。 第一节第一节 巴比妥类药物的分析巴比妥类药物的分析 一、巴比妥类药物的结构与性质一、巴比妥类药物的结构与性质 巴比妥类药物均为巴比妥酸的衍生物，为环状酰脲类镇静巴比妥类药物均为巴比妥酸的衍生物，为环状酰脲类镇静催眠药，结构通式如下：催眠药，结构通式如下：CCCONONC OR1R2R3543216HH环状丙二酰脲类化合物：环状丙二酰脲类化合物：.5第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析本类药物的结构可大致分为两个部分：本类药物的结构可大致分为两个部分：1. 1. 环状丙二酰脲、环状丙二酰脲、1,31,3二酰亚胺基团二酰亚胺基团决定巴比妥类药物的特性。决定巴比妥类药物的特性。2. 2. 取代基部分取代基部分区别各种巴比妥类药物。区别各种巴比妥类药物。 巴比妥类药物是环状酰脲类的镇静催眠药；巴比妥类药物是环状酰脲类的镇静催眠药； 巴比妥类药物剂量由小到大，中枢抑制作用相继表现为巴比妥类药物剂量由小到大，中枢抑制作用相继表现为 镇静、催眠、抗惊厥和麻醉作用；镇静、催眠、抗惊厥和麻醉作用； 其中苯巴比妥还具有抗癫痫的作用。其中苯巴比妥还具有抗癫痫的作用。.6第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析典型药物典型药物CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥(Phenylbarbital)(barbital)CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥.7第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥钠(Secobarbital)CNHCNHCOOOH5C2CH3(CH2)2CHCH3戊巴比妥(Pentobarbital).8第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析硫喷妥钠HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3.9第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析( (二二) )主要性质主要性质性状性状白色结晶或结晶性粉末。白色结晶或结晶性粉末。熔点熔点具有一定的熔点。具有一定的熔点。溶解度溶解度微溶或极微溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂，微溶或极微溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂， 钠盐易溶于水，难溶于有机溶剂。钠盐易溶于水，难溶于有机溶剂。稳定性稳定性在空气中稳定，一般加热易升华。六元环结构比在空气中稳定，一般加热易升华。六元环结构比较稳定，遇酸、氧化剂、还原剂时，环一般不会断裂，与较稳定，遇酸、氧化剂、还原剂时，环一般不会断裂，与碱液共沸时则水解开环，并产生氨气。碱液共沸时则水解开环，并产生氨气。.10第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析1 1、弱酸性、弱酸性该类药物的母核结构环状结构中含有该类药物的母核结构环状结构中含有1,3-1,3-二酰亚胺基团，可二酰亚胺基团，可发生酮式发生酮式- -烯醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离。烯醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离。CCCONONCOHR1R2HCCCONONCOR1R2HHCCCONONCOR1R2HCCCONONCOR1R2+ H+ H+pK1=8+ H+ H+pK2=12一一级级电电离离二级电离二级电离烯醇互变烯醇互变.11第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 由于该类药物具有弱酸性由于该类药物具有弱酸性(pKa:7.38.4) ，可与强碱反应，可与强碱反应生成水溶性的钠盐。反之，钠盐加酸后成游离的巴比妥类生成水溶性的钠盐。反之，钠盐加酸后成游离的巴比妥类药物，可提取分离出来。药物，可提取分离出来。CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O.12第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析2.2.水解反应水解反应NHNOOOHR2R1+5NaOHCHCOONaR1R2+2Na2CO3+NH3NHNOOONaR1CHCOONaR1R2+2NH3CR1R2COONaCONHCONH2H2OH2O异戊巴比妥异戊巴比妥巴比妥巴比妥.13第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析NHNONaOO+2H2OONHNH2O+NaHCO3pHpH6 67 78 89 9分解率分解率(%)(%)2 26 617174141pHpH对苯巴比妥钠分解率的影响对苯巴比妥钠分解率的影响2020C C 放置一年放置一年 巴比妥钠注射液不能预先配制进行加热灭菌，须制成粉针剂，临用时溶解。巴比妥钠注射液不能预先配制进行加热灭菌，须制成粉针剂，临用时溶解。苯巴比妥钠的水解苯巴比妥钠的水解.14第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析3.3.与金属离子反应与金属离子反应 由于含有丙二酰脲或酰亚胺基团，在核实的由于含有丙二酰脲或酰亚胺基团，在核实的pHpH值溶液值溶液中，可与银、铜、钴、汞等离子反应显色或产生有色沉淀，中，可与银、铜、钴、汞等离子反应显色或产生有色沉淀，可用于本类药物的鉴别和含量测定。可用于本类药物的鉴别和含量测定。1,5,51,5,5取代的巴取代的巴比妥类药物比妥类药物AgNO3可溶性可溶性的一银盐的一银盐Na2CO35,55,5取代的巴取代的巴比妥类药物比妥类药物AgNO3Na2CO3可溶性可溶性的一银盐的一银盐AgNO3二银盐二银盐白色沉淀白色沉淀a.a.与银盐的反应与银盐的反应.15第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 b.b.与铜盐的反应：与铜盐的反应：巴比妥类巴比妥类铜吡啶铜吡啶显色显色巴比妥类巴比妥类紫色或紫色沉淀紫色或紫色沉淀硫硫巴比妥类巴比妥类绿色绿色.16第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 本类药物与铜吡啶试液的反应机制为：本类药物与铜吡啶试液的反应机制为：.17第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 c.c.与钴盐的反应与钴盐的反应紫堇色紫堇色钴盐钴盐巴比妥类药物巴比妥类药物碱性碱性+CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3)2CHN+H32Co(NO3)2、CoO、Co(Ac)2异丙胺异丙胺无水无水甲醇或乙醇甲醇或乙醇.18第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 d.d.与汞盐的反应与汞盐的反应 巴比妥类药物巴比妥类药物+ +汞盐汞盐白色白色（可溶于氨试液）（可溶于氨试液）.19第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 4.4.与香草醛与香草醛(Vanillin)(Vanillin)的反应的反应 丙二酰脲中的氢比较活泼，与香草醛的浓硫酸作用下丙二酰脲中的氢比较活泼，与香草醛的浓硫酸作用下发生缩合反应，生成有色的产物。发生缩合反应，生成有色的产物。戊巴比妥鉴别：戊巴比妥鉴别： 取戊巴比妥取戊巴比妥10mg10mg，加香草醛约，加香草醛约10mg10mg和硫酸和硫酸2ml2ml，混合后在，混合后在水浴上加热水浴上加热2min2min，显棕红色。放冷，小心加入乙醇，显棕红色。放冷，小心加入乙醇5ml5ml，即显紫色并变成蓝色。即显紫色并变成蓝色。有色物质有色物质香草醛香草醛巴比妥类药物巴比妥类药物浓硫酸浓硫酸+.20第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 5.5.紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征(nm)2902702502300.51.01.5A巴比妥类药物的紫外吸收光谱ABC240nm255nmA.H2SO4液(0.05mol/L,未电离)B.pH9.9缓冲液(一级电离)C.pH13NaOH液(1mol/L,二级电离)1,5,5-1,5,5-三取代巴比妥类三取代巴比妥类药物不存在二级电离，药物不存在二级电离，最大吸收波长不变。最大吸收波长不变。5,5-5,5-二取代和二取代和1,5,5-1,5,5-三取代巴比妥三取代巴比妥.21第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析3202802402000.80.50.2(nm)A238287304A.HCl液(0.1mol/L)B.NaOH液(0.1mol/L)硫代巴比妥的紫外吸收光谱硫代巴比妥的紫外吸收光谱.22第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析6.6.薄层色谱行为特征薄层色谱行为特征 供试品主斑点的大小与对照品溶液斑点进行比较。供试品主斑点的大小与对照品溶液斑点进行比较。7.7.显微结晶鉴别显微结晶鉴别 药物本身晶形药物本身晶形反应产物晶形反应产物晶形.23第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析二、鉴别试验二、鉴别试验( (一一) )丙二酰脲类的鉴别试验丙二酰脲类的鉴别试验该反应为巴比妥类药物母核的反应，是本类药物的共性。可该反应为巴比妥类药物母核的反应，是本类药物的共性。可作为该类药物的一般鉴别项。作为该类药物的一般鉴别项。1 1、银盐反应、银盐反应 取供试品约取供试品约0.1g0.1g，加碳酸钠试液，加碳酸钠试液1ml1ml与水与水10ml10ml，振摇，振摇2min2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉白色沉淀淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉沉淀不再溶解。淀不再溶解。2 2、铜盐反应、铜盐反应u取供试品约取供试品约50mg50mg，加吡啶溶液，加吡啶溶液(110)5 ml(110)5 ml，溶解后，加，溶解后，加铜吡啶试液铜吡啶试液1ml1ml，即，即显紫色或生成紫色沉淀显紫色或生成紫色沉淀。.24第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析( (二二) )特征基团反应特征基团反应 1 1、利用硫元素的鉴别试验、利用硫元素的鉴别试验 如硫代巴比妥类的鉴别如硫代巴比妥类的鉴别NHNOOSNaH3CCH3H3C+Pb2+NaOHNHNOOSH3CCH3H3C2PbPbS硫代巴比妥类与巴比妥类的区别硫代巴比妥类与巴比妥类的区别.25第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 2 2、利用不饱和取代基的鉴别试验、利用不饱和取代基的鉴别试验 如含有不饱和取代基的司可巴比妥钠的鉴别试验。如含有不饱和取代基的司可巴比妥钠的鉴别试验。NHNNaOOOCH3CH3CH2I2NHNNaOOOCH3CH3CH2II褪色褪色NHNNaOOOCH3CH3CH2Br BrBr2NHNNaOOOCH3CH3CH2OH OHKMnO4.26第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 3 3、利用芳香取代基的鉴别试验、利用芳香取代基的鉴别试验 具有芳香取代基的巴比妥类药物，如苯巴比妥及其钠盐具有芳香取代基的巴比妥类药物，如苯巴比妥及其钠盐的鉴别：的鉴别： a.a.硝化反应硝化反应黄色苯巴比妥+423SOHKNO苯巴比妥与苯巴比妥与NaNONaNO2 2-H-H2 2SOSO4 4反应生成反应生成橙黄色橙黄色橙红色橙红色区分苯巴比妥与不含芳环取代的巴比妥类药物。b.b.硫酸硫酸- -亚硝酸钠反应亚硝酸钠反应 .27第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析( (三三) )特征熔点进行鉴别试验特征熔点进行鉴别试验如司可巴比妥钠的熔点为如司可巴比妥钠的熔点为9797；苯巴比妥钠的熔点为；苯巴比妥钠的熔点为174-174-178 .178 .( (四四) )吸收光谱特征吸收光谱特征药物与标准品进行比较。药物与标准品进行比较。.28第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查( (一一) )苯巴比妥的特殊杂质检查苯巴比妥的特殊杂质检查苯巴比妥的合成工艺：苯巴比妥的合成工艺：C2H5OH,H2SO4水解酯化CH2CONH2，CH2COOC2H5C2H5ONa OCOC2H5OC2H5CCONaCOOC2H5COOC2H5HCl酸化 ，消除CHCOOC2H5COOC2H5CCOOC2H5COOC2H5C2H5C2H5Br乙基化.29第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析CCOOC2H5COOC2H5C2H5CH3ONa环合CH2NH2NOCCONaC2H5CONHCONCCOC2H5CONHCONH酸析HCl.30第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析1.1.酸度的检查酸度的检查中间体中间体乙酰化不完全时，乙酰化不完全时，与尿素缩合产生的杂质与尿素缩合产生的杂质COHHNHHNCHCOHNCOHNOCHCOOC2H5COOC2H5苯基丙二酰脲苯基丙二酰脲酸性较强酸性较强检查方法检查方法取本品取本品0.20g0.20g，加水，加水10ml10ml，煮沸搅拌，煮沸搅拌1min1min，放冷，滤过后，取滤，放冷，滤过后，取滤液液5ml5ml，加甲基橙指示液，加甲基橙指示液1 1滴，滴，不得显红色。不得显红色。.31第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 2.2.乙醇溶液澄清度乙醇溶液澄清度 检查中间体检查中间体I I杂质的量，利用其在乙醇中溶解度小的性质杂质的量，利用其在乙醇中溶解度小的性质进行检查。进行检查。 方法：取本品方法：取本品1.0g1.0g，加乙醇，加乙醇5ml5ml，加热回流，加热回流3min3min，溶液应，溶液应澄清。澄清。CCONaCOOC2H5COOC2H5.32第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 3.3.中性或碱性物质中性或碱性物质 主要指中间体主要指中间体I I的副产物：的副产物： 2-2-苯基丁酰胺（脲）或分解产物等杂质。苯基丁酰胺（脲）或分解产物等杂质。这些杂质不溶于这些杂质不溶于NaOHNaOH 试液而溶于乙醚。试液而溶于乙醚。 而苯巴比妥具有酸性，溶于氢氧化钠溶液。而苯巴比妥具有酸性，溶于氢氧化钠溶液。 提取重量法测定杂质含量：提取重量法测定杂质含量：分液漏斗NaOH T.S.乙醚H2O过滤干燥滤纸蒸发皿1051hr3mg取本品取本品1.0g1.0g 乙醚，乙醚，H H2 2O O洗洗3 3 次次 滤液滤液 蒸干蒸干 残渣残渣.33第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 四、含量测定四、含量测定 银量法银量法 溴量法溴量法 巴比妥类药物的含巴比妥类药物的含 酸碱滴定法酸碱滴定法 量测定方法量测定方法 紫外分光光度紫外分光光度 提取重量法提取重量法 HPLCHPLC法、法、GCGC法法.34第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析（一）银量法（一）银量法 基于巴比妥类药物在合适的碱性溶液中，可与银离基于巴比妥类药物在合适的碱性溶液中，可与银离子定量成盐，可采用银量法测定本类药物及其制剂的含子定量成盐，可采用银量法测定本类药物及其制剂的含量。如苯巴比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐以及它量。如苯巴比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐以及它们的制剂，中国药典均采用银量法测定其含量。们的制剂，中国药典均采用银量法测定其含量。 优点优点：操作简便，专属性较强。其他的杂质不与硝酸银操作简便，专属性较强。其他的杂质不与硝酸银反应。反应。 缺点缺点：受温度影响较大；接近滴定终点时反应较慢。受温度影响较大；接近滴定终点时反应较慢。 滴定终点以溶液出现浑浊为终点指示难以观察滴定终点以溶液出现浑浊为终点指示难以观察。为了克服这些缺点：为了克服这些缺点： 溶剂系统：甲醇溶剂系统：甲醇3 3无水碳酸钠无水碳酸钠 终点指示：电位法指示（终点指示：电位法指示（AgAg玻璃电极系统）玻璃电极系统）.35第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 测定方法与计算测定方法与计算 例如例如: :异戊巴比妥及其钠盐的测定：异戊巴比妥及其钠盐的测定： 取本品约取本品约0.2g0.2g，加甲醇，加甲醇40ml40ml使溶解，新鲜配制的使溶解，新鲜配制的3%3%无无水碳酸钠溶液水碳酸钠溶液15ml15ml，照电位法，用硝酸银滴定液，照电位法，用硝酸银滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，即得。每）滴定，即得。每1ml1ml硝酸银滴定液硝酸银滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于）相当于22.63mg22.63mg的的C C1111H H1818N N2 2O O3 3（或（或24.83mg24.83mg的的C C1111H H1717N N2 2NaONaO3 3）。）。 原料药：直接滴定法（容量分析法）原料药：直接滴定法（容量分析法）%100%VFTW含量.36第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 注意事项注意事项 （1 1）无水碳酸钠应新鲜配制）无水碳酸钠应新鲜配制 （2 2）硝酸银滴定液应新鲜配制）硝酸银滴定液应新鲜配制.37第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 （二）溴量法（二）溴量法 凡在凡在5 5位取代基含有不饱和键的巴比妥类药物，其不位取代基含有不饱和键的巴比妥类药物，其不饱和键能与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法测定饱和键能与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法测定其含量。中国药典收载的其含量。中国药典收载的司可巴比妥钠司可巴比妥钠采用本法测定。其采用本法测定。其测定原理可用下列反应式表示：测定原理可用下列反应式表示： NaOCH2CH3CH3NNOHOOHONNCH3CH3CH2NaO+ Br2Br Br（定量过量）（定量过量）Br2 + 2KI 2KBr + I2（剩余）剩余）I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6.38第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 司可巴比妥钠测定司可巴比妥钠测定 取本品约取本品约0.1g0.1g，精密称定，置，精密称定，置250ml250ml碘瓶中，加水碘瓶中，加水10ml10ml，振摇使溶解，精密加振摇使溶解，精密加溴滴定液溴滴定液（0.05mol/L0.05mol/L）25ml25ml，再加，再加盐盐酸酸5ml5ml，立即密塞并振摇，立即密塞并振摇1min1min，在，在暗处静置暗处静置15min15min后，注意微后，注意微开瓶塞，加开瓶塞，加碘化钾碘化钾试液试液10ml10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（酸钠滴定液（0.1mol/L0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正空白试验校正。每。每1ml1ml溴滴定液（溴滴定液（0.05mo1/L0.05mo1/L）相当于）相当于13.01mg13.01mg的的C C1212H H1717N N2 2NaONaO3 3。%100%VVfTW 空含量.39第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 ( (三三) ) 酸碱滴定法酸碱滴定法 巴比妥类药物呈弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直巴比妥类药物呈弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直接滴定，或在非水溶液中用强碱溶液直接滴定。常用的方接滴定，或在非水溶液中用强碱溶液直接滴定。常用的方法如下：法如下： 1. 1. 在在水乙醇混合溶剂水乙醇混合溶剂中滴定中滴定 基于本类药物在水中的溶解度较小，滴定时多在醇溶基于本类药物在水中的溶解度较小，滴定时多在醇溶液或含水的醇溶液中进行，这样可避免反应中产生的弱酸液或含水的醇溶液中进行，这样可避免反应中产生的弱酸盐易于水解而影响滴定终点。常以盐易于水解而影响滴定终点。常以麝香草酚酞麝香草酚酞为指示剂，为指示剂，滴定至淡蓝色为终点。滴定至淡蓝色为终点。.40第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析异戊巴比妥异戊巴比妥水水醇醇溶解溶解麝香草酚酞麝香草酚酞NaOH淡蓝色淡蓝色HNHNOOOCH3CH3CH3+NaOHHNHNNaOOOCH3CH3CH3+H2O.41第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 如异戊巴比妥醇溶液的滴定测定法：如异戊巴比妥醇溶液的滴定测定法： 取本品取本品0.5g,0.5g,精密称定，加乙醇精密称定，加乙醇20ml20ml溶解后，加麝香草酚溶解后，加麝香草酚酞指示剂酞指示剂8 8滴，用氢氧化钠滴定液（滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L 0.1mol/L ）滴定，并）滴定，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml1ml氢氧化钠滴定氢氧化钠滴定液（液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于）相当于22.63mg22.63mg的的C C1111H H1818N N2 2O O3 3。0()%100%VVFTW含量终点指示：电位法终点指示：电位法原因：操作过程中易于吸收二氧化碳，而使得终点的原因：操作过程中易于吸收二氧化碳，而使得终点的淡蓝色褪去，采用空白对照也难以得到满意的效果。淡蓝色褪去，采用空白对照也难以得到满意的效果。.42第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析2. . 非水滴定法非水滴定法 巴比妥类药物在非水溶液中的酸性增强，用碱性标准溶巴比妥类药物在非水溶液中的酸性增强，用碱性标准溶液滴定时，终点较为明显，可获得比较满意的结果。液滴定时，终点较为明显，可获得比较满意的结果。 测定时常用的有机溶剂有二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿、测定时常用的有机溶剂有二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿、丙酮、无水乙醇、苯、吡啶、甲醇丙酮、无水乙醇、苯、吡啶、甲醇- -苯（苯（15:8515:85）、乙醇）、乙醇- -氯氯仿（仿（1:101:10）等；常用的滴定剂有甲醇钾（钠）的甲醇（或乙）等；常用的滴定剂有甲醇钾（钠）的甲醇（或乙醇）溶液、氢氧化四丁基铵的氯苯溶液等；醇）溶液、氢氧化四丁基铵的氯苯溶液等； 常用的指示剂为麝香草酚蓝等，也可用玻璃常用的指示剂为麝香草酚蓝等，也可用玻璃- -甘汞电极系甘汞电极系统，以电位法指示终点。统，以电位法指示终点。 如巴比妥、司可巴比妥以及戊巴比妥的非水溶液的含量如巴比妥、司可巴比妥以及戊巴比妥的非水溶液的含量测定。（测定。（P275-286P275-286）.43第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析（四）紫外分光光度法（四）紫外分光光度法 巴比妥类药物在巴比妥类药物在酸性酸性介质中几乎不电离，介质中几乎不电离，无明显的紫无明显的紫外吸收外吸收。 但在但在碱性介质碱性介质中电离为具有紫外吸收特征的结构，因中电离为具有紫外吸收特征的结构，因而可采用紫外分光光度法测定其含量。而可采用紫外分光光度法测定其含量。 本法灵敏度高，专属性强，广泛应用于巴比妥类药物本法灵敏度高，专属性强，广泛应用于巴比妥类药物的的原料及其制剂的含量测定原料及其制剂的含量测定，以及固体制剂的溶出度和含，以及固体制剂的溶出度和含量均匀度检查，也常用于体内巴比妥类药物的检测。量均匀度检查，也常用于体内巴比妥类药物的检测。.44第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析药名max(nm)E巴比妥240538苯巴比妥253320戊巴比妥240310异戊巴比妥238440司可巴比妥240330硫喷妥305930NaOH溶液(0.1mol/L)溶剂pH9.4硼酸盐缓冲液pH9.4硼酸盐缓冲液.45第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 1. 1. 直接测定的紫外分光光度法直接测定的紫外分光光度法 本法是将供试品溶解后，根据溶液的本法是将供试品溶解后，根据溶液的pHpH，在最大吸收，在最大吸收波长（波长（maxmax）处，直接测定对照品溶液和供试品溶液的吸）处，直接测定对照品溶液和供试品溶液的吸收度，再计算药物的含量。收度，再计算药物的含量。 单组分定量的方法：单组分定量的方法： 1 1）. . 吸收系数法（绝对法）吸收系数法（绝对法）clEA%1cm1lEAc1%1cm)g/100ml(100)g/ml(1%1cmlEAc.46第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 2 2）. . 标准曲线法标准曲线法 3 3）. . 对照法对照法lcElcEAA对供对供%1cm1%1cm1供对供对CCAA对对供供CAAC.47第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 2. 2. 提取分离后的紫外分光光度法提取分离后的紫外分光光度法 提取分离的主要目的是消除干扰物质对测定的影响。提取分离的主要目的是消除干扰物质对测定的影响。根据巴比妥类药物具有弱酸性，在氯仿等有机溶剂中易溶，根据巴比妥类药物具有弱酸性，在氯仿等有机溶剂中易溶，而其钠盐在水中易溶的特点。而其钠盐在水中易溶的特点。 如测定苯巴比妥含量：如测定苯巴比妥含量： 巴比妥类药物适量，加水使其溶解后，加酸酸化，用巴比妥类药物适量，加水使其溶解后，加酸酸化，用三氯甲烷提取巴比妥类药物，三氯甲烷提取液加入三氯甲烷提取巴比妥类药物，三氯甲烷提取液加入pH7.2pH7.27.57.5的缓冲液，振摇，分离弃去水相缓冲液层，再的缓冲液，振摇，分离弃去水相缓冲液层，再用氢氧化钠自三氯甲烷中提取巴比妥类药物，调节碱提取用氢氧化钠自三氯甲烷中提取巴比妥类药物，调节碱提取液的液的pHpH值，然后选用相应的吸收波长进行测定。值，然后选用相应的吸收波长进行测定。.48第十章第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析（五）高效液相色谱法（五）高效液相色谱法 如苯巴比妥片的含量分析如苯巴比妥片的含量分析 色谱条件：色谱条件：ODSODS柱；柱； 流动相：乙腈流动相：乙腈- -水（水（3030：7070） 检测波长：检测波长：220nm220nm 理论塔板数按苯巴比妥峰计算不得低于理论塔板数按苯巴比妥峰计算不得低于20002000，苯巴比，苯巴比妥与相邻色谱峰的分离度应符合要求。妥与相邻色谱峰的分离度应符合要求。.49