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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,怎样鉴别异型淋巴细胞,检验科:戴君洁,主要内容,物品准备,标本处理,涂片染色,显微镜观察,报告结果,一、物品准备,准备干净的玻片、推片,瑞氏染液、,待检EDTA抗凝全血,计时器,显微镜,计数器,二、样本处理,血涂片的制备:,1,、制作血涂片的载玻片要求清洁、干燥、中性、无油腻;,2,、距载玻片一端约,1cm,处滴,EDTA,抗凝全血,30ul,;,3,、将推片放置于血滴的前端,紧挨血滴,使其顺推片边缘散开;,4,、调整好推片与载玻片的夹角,使其约呈,30,度角,均匀向前推片。,影响涂片厚薄的因素有:血滴大小、推片与载玻片间的夹角,推片速度、血细胞比容。,制备涂片时,血滴越大、角度越大、推片速度越快,血膜越厚,反之越薄。血细胞比容增高、血液粘度较高时,应采用小血滴、小角度、慢推,可得满意结果;血细胞比容减低、血液较稀时,应采用大血滴、大角度、快推。,血涂片的好坏直接影响到细胞的鉴别。,一张良好的血涂片,要求厚薄适宜、头体尾明显、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两端和两边留有一定空隙。,三、涂片染色,1,、滴入瑞氏染液,I,液数滴盖满标本,,30,秒;,2,、再加入瑞氏染液,II,液与,I,液比例为,1:1,,染,1,3,分钟;,3,、用流水冲洗涂片。,注意事项:,1,、血涂片干透后火焰固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。,2,、冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防燃料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有燃料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗。,3,、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。,4,、染色的深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、,PH,值密切相关,可根据情况适当纠正。,四、显微镜观察,由于各种白细胞体积大小不等,在血涂片中分布很不均匀,一般体积较小的淋巴细胞在头、体部分布较多,而尾部和两侧以中性粒细胞核单核细胞较多,异常大的细胞常在片尾末端出现。一般认为细胞分布在片头至片尾的3/4区域比较均匀,因此分类时最好选择在体尾交界处,且必须按一定方式有规律地移动视野。,需在油镜下观察。,先调粗螺旋找到视野,再调动细螺旋慢慢找到较为清晰的视野。,在病毒或过敏原等因素刺激下,外周血淋巴细胞增生并发生异常形态变化,称异型淋巴细胞或,“,Downey,”,细胞。已知此种细胞属T淋巴细胞,其形态的变异是因增生亢进,甚至发生母细胞化的结果。根据细胞形态可分为三型。,2,I型,空泡型,III型,幼稚型,II型,不规则型,分型,细胞中等大小,细胞,多呈圆形或部分不规则,形或阿米巴型,胞质嗜,碱性强,呈深蓝色,含,有大小不等的空泡或呈,泡沫状,无颗粒或有少,数颗粒,胞核偏位,呈,椭圆形,肾形或分叶形,,染色质粗糙,呈粗网状,或成堆排列。,I,型(泡沫型或浆细胞型),细胞胞体较,I,型大,,形态不规则,胞质量,多,呈浅灰蓝色,但,靠胞膜边缘处较深染,且不整齐,无空泡,,可有少数天青胺蓝颗,粒,胞核呈圆形、椭,圆型或不规则形,染,色质较,I,型细致,亦呈,网状。,型(不规则型或单核细胞样型),细,胞直径,15um,18um,,形态不规则,胞质呈蓝色,可有分布较均匀的小空泡,一般无颗粒,胞核圆形或卵圆形,可见核仁,1,个,2,个,染色质细致、均匀,呈网状排列,无浓集现象,。,型(幼稚型或幼淋巴细胞样型),异型淋巴细胞除,I,、,II,、,III,型三个类型外,有时也可见到少数组织细胞样的难以归类的异型淋巴细胞。,异型淋巴细胞,异型淋巴细胞增多主要见于传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热、湿疹等病毒性疾病和过敏性疾病。正常人血片中可偶见此种细胞。一般病毒感染异型淋巴细胞 10%,因此二者可依据异性淋巴细胞的多少来鉴别诊断。,五、报告结果,计数,1000,个白细胞中异型淋巴细胞数为,N;,(,1,)未找到异型淋巴细胞;,(,2,)计算异型淋巴细胞占白细胞的百分比。,谢谢,
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