菊花的组织培养(精心设计)

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,菊花的组,织,织培养,植物的组,织,织培养又,叫,叫离体培养，指植物,的,的组织,、,器官或细,胞,胞等（外植体,课本34,页,页旁栏,）在离体条件下，通过无菌操作，在人工控制,条,条件下（一定,的,的营养物,质,质、激素,、,、温度等,其,其他外界,条,条件）进,行,行培养以,获,获得再生,的,的完整植株或生产具,有,有经济价,值,值的其他,产,产品的技,术,术。,基础知识,一、,植物组织,培,培养,1、概念,概念：,原因：,全能性大,小,小：,2、植物,组,组织培养,原,原理,：,植物细胞,的,的全能性,细胞的全,能,能性是指已分化的细胞具,有,有发育成,完,完整个体,的,的潜能。,生物体的,每,每一个细,胞,胞都具有,该,该物种生,长,长、发育,、,、遗传变,异,异的全套遗传,物,物质,受精卵,生殖细,胞,胞体细,胞,胞,植物细胞动物细,胞,胞,分裂能力,强,强分裂,能,能力弱,什么叫分,化,化？（其,实,实质是什,么,么来着?,）,）,什么叫脱,（,（去）分,化,化、再分,化,化？,愈伤组织,的,的细胞有,什,什么特点,？,？,如何控制,细,细胞的脱,分,分化与去,分,分化？,（阅读32-33,页,页第一段,解,解决下列,问,问题,）,二、植物,组,组织培养,的,的基本过,程,程,二、植物,组,组织培养,的,的基本过,程,程,概念：,实质：,特点：,细胞分化,个体发育,中,中，由一,个,个或一种,细,细胞增殖,产,产生的后,代,代，在形,态,态、结构,或,或功能上,发,发生稳定,性,性差异的,过,过程。,基因的选,择,择性表达,普遍性,持久性,稳定性,不可逆性,菠萝的愈,伤,伤组织,人参的愈,伤,伤组织,三、影响,植,植物组织,培,培养的因,素,素：,1、植物,材,材料（外,植,植体）的,选,选取,（1）不,同,同植物的,组,组织培养,难,难易程度,不,不同,什么样的,植,植物容易,进,进行组织,培,培养？,（2）同,一,一种植物,的,的不同组,织,织培养难,度,度不同,什么样的,组,组织容易,进,进行组织,培,培养？,容易进行,无,无性生殖,的,的植物，,如,如烟草、,胡,胡萝卜,幼龄、保,存,存时间短,的,的组织,菊花的组,织,织培养一,般,般选用何,种,种材料？,未开花植,物,物的茎上,部,部新萌生,的,的侧枝,2、营养,成,成分（培,养,养基）,（1）植,物,物组织培,养,养常用的,培,培养基？,MS培养,基,基,大量元素：C、H,、,、O、N,、,、P、K,、,、Ca、Mg、S,微量元素：B、Mn、Cu,、,、Zn、Fe、Mo、I、Co,有机物：甘氨酸,、,、烟酸、,肌,肌醇、维,生,生素、蔗糖等,（2）MS培养基,的,的主要成,分,分？,培养基中,的,的各种成,分,分的作用,是,是什么？,大量元素,和,和微量元,素,素提供植,物,物细胞需,要,要的各种,无,无机盐；,蔗,蔗糖提供,碳,碳源的同,时,时维持细,胞,胞渗透压,；,；甘氨酸,、,、维生素,等,等物质主,要,要是满足,离,离体植物,细,细胞的特,殊,殊营养物,质,质需求,课本33,页,页旁栏思,考,考：,微生物培,养,养基以有,机,机营养为,主,主，,MS培养,基,基则需提,供,供大量无,机,机营养,3、植物,激,激素,（1）关,键,键激素是,什,什么？,（2）两,种,种激素的,不,不同使用,顺,顺序出现,不,不同结果,（3,）,）两,种,种激,素,素的,不,不同,用,用量,出,出现,不,不同,结,结果,常用,的,的植,物,物激,素,素：,生,生长,素,素、,细,细胞,分,分裂,素,素和,赤,赤霉,素,素,生长,素,素类,：,：,2，4,二,二氯,苯,苯氧,乙,乙酸,（,（2,，,，4,D,）,）、,吲,吲哚,乙,乙酸,（,（IAA,）,）、,萘,萘乙,酸,酸（NAA）,、,、吲,哚,哚丁,酸,酸（IBA）,细胞,分,分裂,素,素类,：,：,激动,素,素（KT,）,）、6,苄,苄基,嘌,嘌呤,（,（6BA,）,）、,玉,玉米,素,素（ZT,）,）,赤霉,素,素类,：,：,赤霉,酸,酸（GA3）,生长,素,素和,细,细胞,分,分裂,素,素作,用,用,植物,中,中生,长,长素,和,和细,胞,胞分,裂,裂素,是,是启,动,动细,胞,胞分,裂,裂、,脱,脱分,化,化和,再,再分,化,化的,关,关键,性,性激,素,素。,在,在生,长,长素,存,存在,的,的情,况,况下,，,，细,胞,胞分,裂,裂素,的,的作,用,用呈,现,现加,强,强的,趋,趋势,使用顺序,实验结果,先使用生长素，后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂，但不利分化,先使用细胞分裂素后使用生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率提高,生长素,细胞分裂素：,有利,于,于根,的,的分,化,化,生长素,细胞分裂素：,有利,于,于芽,的,的分,化,化，,抑,抑制,根,根的,分,分化,生长素,细胞分裂素：,促进,愈,愈伤,组,组织,生,生长,生长,素,素和,细,细胞,分,分裂,素,素同,时,时使,用,用，,用,用量,的,的比,例,例对,植,植物,细,细胞,发,发育,方,方向,的,的影,响,响,4、pH,、,、温,度,度、,光,光照,等,等,菊花,组,组织,培,培养,的,的PH？,温,温度,？,？光,照,照？,5、,无,无菌,环,环境,菊花,的,的组,织,织培,养,养,再分,化,化,材料,性,性质,、,、营,养,养物,质,质、,调节,物,物质,、,、环,境,境条,件,件,基本,原,原理:,细胞,的,的全,能,能性,基本,过,过程:,脱分,化,化,愈伤,组,组织,影响,因,因素,：,：,制备MS,固,固体,培,培养,基,基,外植,体,体消,毒,毒,接种,培,养,养,栽,培,培,四、,实,实验,操,操作,移,栽,栽,流水冲洗,无,菌,菌纸,吸,吸干,70%,酒精无菌,水,水冲洗,无,菌,菌纸,吸,吸干,0.1%,氯,氯化,汞,汞无菌,水,水冲洗,至,至少,三,三次,之,之上,（流,水,水是,为,为消,毒,毒吗,？,？能,消,消毒,的,的是,什,什么,？,？无,菌,菌水,冲,冲洗,是,是为,了,了干,啥,啥？,）,）,（哪6步,？,？）,1、,配,配制,各,各种,母,母液,（大,量,量元,素,素、,微,微量,元,元素,各,各浓,缩,缩多,少,少倍,？,？用,量,量较,小,小的,有,有机,物,物呢,？,？）,2、,配,配制,培,培养,基,基,（菊,花,花组,培,培是,否,否添,加,加植,物,物激,素,素？,）,）,3、,灭,灭菌,（哪,种,种灭,菌,菌方,法,法？,）,）,注意,接,接种,时,时的,各,各种,无,无菌,操,操作,。,。,将菊,花,花茎,段,段插,入,入培,养,养基,时,时特,别,别应,注,注意,什,什么,？,？,最好,在,在哪,儿,儿培,养,养？,温,温度,？,？光,照,照？,定,定期,消,消毒,？,？,直接,移,移栽,到,到土,壤,壤中,吗,吗？,接种,注,注意,事,事项,每,接,接种,一,一块,外,外植,体,体前,，,，镊,子,子需,放,放入,体,体积,分,分数,为,为75,的,的酒,精,精溶,液,液中,消,消毒,一,一次,，,，然,后,后在,酒,酒精,灯,灯火,焰,焰上,烧,烧一,遍,遍，,冷,冷却,后,后再,接,接种,外,植,植体,在,在培,养,养基,中,中要,分,分布,均,均匀,，,，放,置,置外,植,植体,数,数量,根,根据,锥,锥形,瓶,瓶的,大,大小,确,确定,，,，一,般,般胡,萝,萝卜34块,，,，菊,的,的茎,或,或叶68块,，,，也,不,不要,太,太少,，,，以,充,充分,利,利用,培,培养,基,基中,的,的营,养,养成,分,分和,光,光照,条,条件,插,入,入时,应,应注,意,意方,向,向，,不,不要,倒,倒插,。,。茎,段,段、,茎,茎尖,基,基部,插,插入,培,培养,基,基利,于,于吸,收,收水,分,分和,养,养分,培养,1、,愈,愈伤,组,组织,的,的培,养,养,从接,种,种外,植,植体,到,到出,现,现愈,伤,伤组,织,织需,经,经过2周,时,时间,。,。2,周,周之,内,内可,以,以看,到,到外,植,植体,上,上逐,渐,渐长,出,出乳,白,白色,或,或黄,白,白色,的,的瘤,状,状愈,伤,伤组,织,织。首次,培,培养,愈,愈伤,组,组织,时,时，,恒,恒温,箱,箱的,门,门应,该,该关,闭,闭不,必,必见,光,光，,因,因为,在,在无,光,光条,件,件下,愈,愈伤,组,组织,长,长的,更,更快,。,。2周,后,后，,培,培养,基,基成,分,分接,近,近耗,尽,尽，,必,必须,更,更换,培,培养,基,基，,进,进行,继,继代,培,培养,继代,培,培养,所,所用,的,的培,养,养基,与,与培,养,养愈,伤,伤组,织,织的,相,相同,，,，在,严,严格,的,的无,菌,菌条,件,件下,，,，将,愈,愈伤,组,组织,连,连同,原,原来,的,的外,植,植体,一,一起,移,移到,新,新培,养,养基,上,上。,愈,愈伤,组,组织,的,的继,代,代培,养,养一,代,代为20d。,如,如果,延,延长,时,时间,，,，培,养,养基,中,中营,养,养物,质,质减,少,少，,外,外植,体,体会,分,分泌,有,有毒,物,物质,，,，造,成,成自,身,身中,毒,毒。,如,如果,愈,愈伤,组,组织,长,长到,直,直径,为,为1,1.5cm,时,时，,就,就可,以,以进,行,行试,管,管苗,培,培养,，,，否,则,则还,需,需进,行,行第,二,二代,继,继代,培,培养,2、,愈,愈伤,组,组织,的,的继,代,代培,养,养,在愈,伤,伤组,织,织继,代,代培,养,养期,间,间，,将,将恒,温,温箱,的,的门,打,打开,，,，让,愈,愈伤,组,组织,见,见光,，,，愈,伤,伤组,织,织见,光,光后,颜,颜色,可,可以,转,转为,绿,绿色,3、,试,试管,苗,苗的,培,培养,当愈,伤,伤组,织,织长,到,到一,定,定大,小,小后,，,，可,以,以更,换,换培,养,养基,，,，进,行,行试,管,管苗,的,的见光,培,培养,移栽,移栽,生,生根,的,的菊,花,花试,管,管苗,之,之前,，,，应,先,先打,开,开培,养,养瓶,的,的封,口,口膜,，,，让,试,试管,苗,苗在,培,培养,间,间生,长,长几,日,日,1、,打,打开,封,封口,膜,膜,2、,清,清洗,转,转移,用流,水,水清,洗,洗根,部,部的,培,培养,基,基，将幼,苗,苗移,植,植到,消,消过,毒,毒的,蛭,蛭石,或,或珍,珠,珠岩,等,等环,境,境下生活,一,一段,时,时间,珍珠,岩,岩：,固,固体,基,基质,型,型，,含,含水,量,量高,、,、蓄,水,水性,强,强、,透,透性,好,好，,适,适合,栽,栽培,3、,移,移栽,幼苗,长,长壮,后,后，,移,移栽,到,到土,壤,壤中,（六,）,）栽,培,培,幼苗,移,移栽,后,后，,每,每天,观,观察,并,并记,录,录幼,苗,苗的,生,生长,情,情况,，,，适,时,时浇,水,水、,施,施肥,，,，直,至,至开,花,花,1、,培,培养,基,基的,灭,灭菌,（,（高,压,压蒸,汽,汽灭,菌,菌）,2、,外,外植,体,体的,消,消毒,（,（酒,精,精、,氯,氯化,汞,汞）,3、,接,接种,的,的无,菌,菌操,作,作（,酒,酒精,、,、酒,精,精灯,灼,灼烧,）,）,4、,无,无菌,箱,箱中,的,的培,养,养；,5、,移,移栽,到,到消,过,过毒,的,的环,境,境中,生,生存,一,一段,时,时间,在整,个,个操,作,作过,程,程中,，,，是,如,如何,来,来实,现,现无菌环境,的,的？,35,页,页旁,栏,栏思,考,考：,至少,做,做一,组,组以,上,上的,重,重复,。,。对,照,照实,验,验用,一,一个,不,不接,种,种的,空,空白,培,培养,基,基与,接,接种,的,的培,养,养基,一,一同,培,培养,