基因工程培训课程

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,乳汁中含有人生长激素的转基因牛,(,阿根廷,),转鱼抗寒基因的番茄,专题：基,因,因工程,基因工程：,基因工程是指按照人,们,们的愿望,进行严格的,设,设计,并通过体外,DNA,重组和转基因等技,术,术,赋予生物以,新,新的遗传特性,从而创造出,更,更符合人们,需,需要的新的生物类型和生物产品。由于基因,工,工程是在,DNA,分子水平上进行设计施工，因此,叫,叫做,DNA,的重组技术。,注：基因工,程,程能定向改,造,造生物的遗,传,传性状,基因工程的别名,操作环境,操作对象,操作水平,基本过程,实质（原理）,结果,基因拼接技,术,术或,DNA,重组技术,生物体外,基因,DNA,分子水平,人类需要的,基,基因产物,剪切,拼接,导入,表达,(,人工）基因,重,重组,转基因抗虫,棉,棉,抗虫棉,普通棉,基因工程培,育,育抗虫棉的,简,简要过程：,普通棉花,(,无抗虫特性,),苏云金芽孢,杆,杆菌,提取,抗虫基因,与运载体,DNA,拼接,导入,棉花细胞,(,含抗虫基因,),棉花植株,(,有抗虫特性,),上述培育抗,虫,虫棉的关键步骤是什么？,基因工程培,育,育抗虫棉的,关,关键步骤：,关键步骤一,：,：,抗虫基因从,苏,苏云金芽孢,杆,杆菌细胞内提取出来,关键步骤二,：,：,抗虫基因与运载体,DNA,连接,关键步骤三,：,：,抗虫基因导入受体,(,棉花,),细胞,1.1DNA,重组技术的,基,基本工具：,1,、限制性核,酸,酸内切酶,“,分子手术刀,”,”,2,、,DNA,连接酶,“,分子缝合针,”,”,3,、基因进入,受,受体细胞的,载,载体,“,分子运输车,”,”,1,、限,制,制性,核,核酸,内,内切,酶,酶,2,特点,：,：,识,识别双链,DNA,分子,中,中特定核苷,酸,酸序,列,列，,在,在特定的位,点,点切,割,割（,特,特异,性,性）,。,。,1,分布,：,：,主要,在,在原,核,核生,物,物中,限制,酶,酶所,识,识别,的,的序,列,列有什么,特,特点？,限制,酶,酶所,识,识别,的,的序,列,列，,无,无论,是,是,6,个碱,基,基还,是,是,4,个碱,基,基，,都,都可,以,以找,到,到一,条,条中,心,心轴,线,线,中轴,线,线两,侧,侧的,双,双链,DNA,上的,碱,碱基,是,是反向,对,对称,重,重复,排,排列的。,限制,酶,酶识,别,别序,列,列的,中,中轴,线,线,3,结果,：,：,打开,磷,磷酸,二,二酯,键,键，,产,产生,黏,黏性,末,末端,或,或平,末,末端,。,。,磷酸,二,二酯,键,键,G,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,A,什么,叫,叫黏,性,性末,端,端？,当限,制,制酶,从识,别,别序,列,列的,中,中心,轴,轴线,两,两侧,切,切开,时,时，,被限,制,制酶,切,切开,的,的,DNA,两条,单,单链,的,的切,口,口，,带,带有,几,几个伸出,的,的核,苷,苷酸，他,们,们之,间,间正,好,好互补,配,配对，这,样,样的,切,切口,叫,叫黏性,末,末端。,EcoR,什么,叫,叫平,末,末端,？,？,当限,制,制酶,从识,别,别序,列,列的,中,中心,轴,轴线,处,处切,开,开时,，,，,切开,的,的,DNA,两条,单,单链,的,的切,口,口，,是,是平,整,整的,，,，这,样,样的,切,切口,叫,叫平末,端,端。,1.,黏性,末,末端,和,和平,末,末端,都,都由,限,限制,酶,酶进,行,行切,割,割产,生,生，,下,下列,说,说法,正,正确,的,的是,（,（,）,）,A.,切割,这,这两,种,种末,端,端可,以,以用,同,同一,种,种限,制,制酶,B.,切割,这,这两,种,种末,端,端需,不,不同,的,的限,制,制酶,C.,这两,种,种末,端,端可,以,以相,互,互拼,接,接,D.,拼接,时,时，,限,限制,酶,酶参,与,与拼,接,接过,程,程,B,如果,把,把两,种,种不,同,同来,源,源的,DNA,的用同一,种,种限制,酶,酶（,如,如,EcoR,）来,切,切割,，,，会,怎,怎样,呢,呢？,会产,生,生互,补,补的,黏,黏性,末,末端,，,，然,后,后让,两,两者,的,的黏,性,性末,端,端黏,合,合起,来,来，,就,就似,乎,乎可,以,以合,成,成重,组,组的,DNA,分子,了,了。,二、,“,分子,缝,缝合,针,针,”,DNA,连接,酶,酶,1,、种,类,类：,2,、作,用,用部,位,位：,E,coli DNA,连接酶,T,4,DNA,连接酶,磷,酸,酸,二,二,酯,酯,键,键,DNA,连,接,接,酶,酶可,把,把,黏,黏,性,性,末,末,端,端之,间,间,的,的,缝,缝,隙,隙,“,“,缝,缝,合,合,”,”起,来,来,，,，,即,即,把,把,梯,梯,子,子,两,两,边,边,扶,扶,手,手,的,的,断,断,口,口,连,连,接,接,起,起,来,来,，,，,这,这,样,样,一,一,个,个,重,重,组,组,的,的,DNA,分,子,子,就,就,形,形,成,成,了,了,。,。,GAATTC,CTTAAG,GAATTC,CTTAAG,EcoR,G,AATTC,CTTAA,G,G,AATTC,CTTAA,G,不同来源的,DNA,片段混合,将,不,不,同,同,种,种,来,来,源,源,的,的,DNA,片,段,段,连,连,接,接,起,起,来,来,生,物,物,A,基,因,因,片,片,段,段,生,物,物,B,基,因,因,片,片,段,段,GAATTC,CTTAAG,GAATTC,CTTAAG,酶,切,切,P6,寻,根,根,问,问,底,底,：,：,DNA,连,接,接,酶,酶,与,与,DNA,聚,合,合,酶,酶,是,是,一,一,回,回,事,事,吗,吗,？,？,为,为,什,什,么,么,？,？,DNA,连,接,接,酶,酶,与,与,DNA,聚,合,合,酶,酶,DNA,连接酶,DNA,聚合酶,连接,DNA,链,连接部位,模板,结果,双,链,链,单,链,链,DNA,片,段,段,间,间,形,形,成,成,磷,磷,酸,酸,二,二,酯,酯,键,键,单,个,个,核,核,苷,苷,酸,酸,与,与,DNA,片,段,段,间,间,形,形,成,成,磷,磷,酸,酸,二,二,酯,酯,键,键,不,需,需,要,要,模,模,板,板,需,要,要,模,模,板,板,将,DNA,片,段,段,连,连,接,接,成,成,重,重,组,组,DNA,分,子,子,合,成,成,新,新,的,的,DNA,分,子,子,2.,关,于,于,DNA,连,接,接,酶,酶,的,的,叙,叙,述,述,正,正,确,确,的,的,是,是,（,（,）,）,A.DNA,连,接,接,酶,酶,将,将,单,单,个,个,核,核,苷,苷,酸,酸,连,连,接,接,到,到,DNA,片,段,段,上,上,B.DNA,连,接,接,酶,酶,将,将,两,两,条,条,单,单,链,链,DNA,连,接,接,起,起,来,来,C.DNA,连,接,接,酶,酶,可,可,形,形,成,成,磷,磷,酸,酸,二,二,酯,酯,键,键,D.DNA,连,接,接,酶,酶,与,与,DNA,聚,合,合,酶,酶,作,作,用,用,相,相,同,同,C,要,让,让,一,一,个,个,从,从,甲,甲,生,生,物,物,细,细,胞,胞,内,内,取,取,出,出,来,来,的,的,基,基,因,因,在,在,乙,乙,生,生,物,物,体,体,内,内,进,进,行,行,表,表,达,达,，,，,首,首,先,先,得,得,将,将,这,这,个,个,基,基,因,因,送,送,到,到,乙,乙,生,生,物,物,的,的,细,细,胞,胞,内,内,去,去,！,！,能,能,将,将,外,外,源,源,基,基,因,因,送,送,入,入,细,细,胞,胞,的,的,工,工,具,具,就,就,是,是,运,运,载,载,体,体,。,。,三,、,、,“,分,子,子,运,运,输,输,车,车,”,基,因,因,进,进,入,入,受,受,体,体,细,细,胞,胞,的,的,载,载,体,体,载,体,体,需,需,要,要,的,的,条,条,件,件,：,：,有,一,一,个,个,至,至,多,多,个,个,限,限,制,制,酶,酶,切,切,点,点,（,（,每,每,种,种,酶,酶,的,的,切,切,点,点,最,最,好,好,只,只,有,有,一,一,个,个,）,）,，,，,以,以,连,连,接,接,外,外,源,源,基,基,因,因,对,对,受,受,体,体,细,细,胞,胞,无,无,害,害,具,具,有,有,自,自,我,我,复,复,制,制,能,能,力,力,或,或,整,整,合,合,到,到,染,染,色,色,体,体,的,的,DNA,上,，,，,随,随,染,染,色,色,体,体,DNA,进,行,行,同,同,步,步,复,复,制,制,有,某,某,些,些,标,标,记,记,基,基,因,因,，,，,便,便,于,于,筛,筛,选,选,运,运,载,载,体,体,的,的,种,种,类,类,：,：,细,细,菌,菌,的,的,质,质,粒,粒,(,plasmid,),噬,菌,菌,体,体,衍,衍,生,生,物,物,或,或,某,某,些,些,动,动,植,植,物,物,病,病,毒,毒,假,假,如,如,目,目,的,的,基,基,因,因,导,导,入,入,受,受,体,体,细,细,胞,胞,后,后,不,不,能,能,复,复,制,制,或,或,不,不,能,能,转,转,录,录,，,，,转,转,基,基,因,因,生,生,物,物,能,能,有,有,预,预,想,想,的,的,效,效,果,果,吗,吗,？,？,作为,分,分子运,输,输车,载体，,如,如果没,有,有切割,位,位点将,会,会怎样,？,？,霍乱,菌,菌的质,粒,粒有多,个,个限制,酶,酶切点,，,，你会,用,用它来,做,做分子,运,运输车,吗,吗？,目的,基,基因有,没,没有进,入,入受体,细,细胞，,如,如何去,发,发现？,质粒是,最,最常用,的,的运载,体,体之一,，,，真正,用,用于基,因,因工程,的,的质粒,都,都是在,天,天然质,粒,粒基础,上,上人工改,造,造而成的,。,。,能复制,并,并带着,插,插入的,目,目的基,因,因一起,复,复制,有切割,位,位点,有标记,基,基因的,存,存在，,将,将来可,用,用含青,霉,霉素的,培,培养基,鉴,鉴别。,3.,下列有,关,关基因,工,工程的,叙,叙述，,正,正确的,是,是（,）,）,A.,重组,DNA,技术所,用,用的工,具,具酶是,限,限制性,核,核酸内,切,切酶、,DNA,连接酶,和,和载体,B.,所有限,制,制性核,酸,酸内切,酶,酶都只,能,能识别,同,同一种,特,特定的,核,核苷酸,序,序列,C.,一般选,用,用细菌,的,的质粒,作,作为基,因,因进入,受,受体细,胞,胞的载,体,体,D.,细菌体,内,内的质,粒,粒可以,直,直接作,为,为基因,工,工程中,的,的载体,C,4.,下列关,于,于质粒,的,的叙述,，,，正确,的,的是（,）,）,A.,质粒是,广,广泛存,在,在于细,菌,菌细胞,中,中的一,种,种颗粒,状,状细胞,器,器,B.,质粒是,细,细菌细,胞,胞质中,能,能够自,我,我复制,的,的小型,环,环状,DNA,分子,C.,质粒只,有,有在导,入,入宿主,细,细胞后,才,才能在,宿,宿主细,胞,胞内复,制,制,D.,细菌质,粒,粒的复,制,制过程,一,一定是,在,在宿主,细,细胞外,独,独立进,行,行的,B,限制酶,在,在原核,生,生物中,作,作用：,切割外,源,源,DNA,，使之,失,失效，,从,从而达,到,到保护,身,身的目,的,的。,为什么,限,限制酶,不,不剪切,自,自身的,DNA,？,1,、其,DNA,分子中,或,或者不,具,具备这,种,种限制,酶,酶的识,别,别切割