糖化血红蛋白的标准化

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,三,HbA,1c,的检测,目录,HbA,1c,常规测定方法,1,HbA,1c,检测的标准化,2,HbA,1c,检测的规范化,3,HbA1c的常规测定,4,1978年-,第一台,商品化仪器问世,1988年-美国糖尿病协会（ADA）建议：HbA1c 常规检测项目,目前检测方法,原理,不同方法测定糖化血红蛋白不同的组分,HbA,1c,、,HbA,1,（,A,1a,+A,1b,+A,1c,）或总糖化血红蛋白,目前皆以,HbA,1c,或等同于,HbA,1c,来报告结果,HbA,1c,测定方法,我国（室间质评）,国际（,CAP,能力验证）,2011,年,2008,年,2011,年,1995,年,免疫法,26%,36%,71%,11%,离子交换色谱法,53%,44%,28%,24%,亲和层析法,10%,9%,1%,54%,其它,11%,11%,电泳法,11%,从室间质评回报统计的在不同时间使用不同的,GHB,测定方法的实验室比例,目录,HbA,1c,常规测定方法,1,HbA,1c,检测的标准化,2,HbA,1c,检测的规范化,3,标准化,目的,:,实现检验结果的可比性,是保证检验质量手段,意义（益处）,可以建立起普遍接受（可用）的参考区间,可以合并分析、比较不同医学中心的研究资料,促进医学研究和研究成果的转化,能够有效地应用询证医学和检验医学实践指南,HbA,1c,标准化,九十年代中晚期，美国糖尿病控制与并发症研究,(DCCT),和英国大规模的前瞻性糖尿病研究,(UKPDS),的研究结果显示：强化的血糖控制能显著降低糖尿病并发症的危险和进展，强调了,HbA1c,在糖尿病患者中血糖控制监测的作用。,从那时起，大多数临床糖尿病组织都将,HbA1c,作为糖尿病治疗目标，,糖化血红蛋白检测,在世界范围内被广泛应用,.,1993,CAP SURVEY(mean 2SD),10,50%,实验室报告,HbA1c,21%,实验室报告,HbA1,29%,实验室报告,GHB,多数实验室结果与靶值偏倚很大，不具有可比性,NGSP,（,National Glycohemoglobin Standardisation Program,：,美国,国家糖化血红蛋白标准化计划,）,11,美国临床化学协会（,AACC,）在,1993,年成立分委会进行,GHB,测定的标准化工作，使不同实验室（方法）的结果可溯源至,DCCT,的参考结果。标准化工作由美国国家糖化血红蛋白标准化计划（,NGSP,）指导委员会于,1996,年完成。,目的：标准化糖化血红蛋白检测，使临床实验室的测定结果与,DCCT,具有可比性,该体系在校准和规范商 业化,HbA1c,检测领域发挥了极其重要的作用。,NGSP,对厂家方法的认证,12,NGSP,要求：生产厂家有责任确保其生产的试剂、校准品、质控品、（色谱柱）所测结果与认证结果保持一致,认证标准：逐步提高,认证有效期：,1,年,NGSP对实验室的认证,由,NGSP,的二级参考实验室来对实验室进行认证工作,得到认证的实验室所测结果是可靠的,认证标准：逐步提高,认证有效期：,1,年,我国目前有近,20,家实验室得到认证,CAP SURVEY (mean 2SD),14,2003,年，,90%,实验室以,HbA,1c,报告结果，室间,CV 5%,，,测定值与靶值的偏倚,0.8%HbA,1c,IFCC,国际标准化,15,1995,年,IFCC,成立,HbA,1c,标准化工作组，旨在建立具有高计量学水准的参考系统，用于,HbA,1c,检测的标准化和校准，,实现,HbA,1c,测定的全球可比性,明确定义,HbA,1c,葡萄糖与血红蛋白,链,N,末端缬氨酸残基稳定结合的化合物,.,建立一个特异测定,HbA,1c,的参考方法,高效液相色谱串联质谱或高效液相色谱串联毛 细管电泳,制备纯化的,HbA,1c,和,HbA,0,标准物质,建立国际参考实验室网络,完成了与指定比对方法的比较工作,参考方法原理,HbA,0,六肽,HbA,1c,六肽,谷氨酸内切酶,参考方法流程,17,溶血液制备,酶解,HPLC,串联毛细管电泳,HPLC,串联质谱,IFCC,结果与指定比对方法结果之间的关系,HbA,1c,-,NGSP,=0.915 HbA,1c,-,IFCC,+2.15 (r,2,=0.998),Clin Chem.2004,50:166-174,回归方程能够将,IFCC,的结果与,DCCT,所得出的有着重要临床意义的结果联系起来。,IFCC,结果与比对方法结果的关系,19,IFCC HbA,1c,(mmol/mol),NGSP HbA,1c,(%),JDS HbA,1c,(%),Swedish HbA,1c,(%),eAG(mmol/l),42,6,5.8,50,岁,5.3,7.0,53,7,6.6,6.13,8.6,64,8,7.7,7.2,10.2,75,9,8.7,8.3,11.8,86,10,9.7,9.4,13.4,97,11,10.7,10.5,14.9,108,12,11.7,11.6,16.5,小结,临床试验确立了,HbA,1c,和糖尿病并发症之间的相关性，将这些试验结果统一后，,NGSP,非常成功地降低由于不同实验方法和不同实验室所造成,HbA,1c,的差异。,IFCC,的参考方法有利于将剂量溯源升级到更高等级的参考系统。,已建立起这两种单位相互转换的等式。报告何种单位由各国自行决定。,小结,HbA,1c,是糖尿病血糖控制的金标准，是国际专家委员会、,WHO,和许多国家的糖尿病诊断标准，其测定结果应该标准化,HbA,1c,的测定方法有多种，测定原理、组分各不相同，由于,IFCC,及,NGSP,的标准化工作，目前都以,HbA,1c,或等同于,HbA,1c,来报告结果,国际上存在不同的标准化组织，不同组织的结果数值是不同的,目录,HbA,1c,检测的标准化,2,HbA,1c,常规测定方法,1,HbA,1c,检测的规范化,3,HbA,1c,标准化目标,精密度：室间变异系数（,CV,）,5%,只有控制室内（总）,CV3%,，才可能实现室间,CV5%,准确度：,国际糖尿病专家委员会、,ADA,推荐：,0.5%HbA,1c,准确度建立在精密度基础上,2009,年美国,99%,溯源到,DCCT/UKPDS,英国,97%,、,加拿大,100%,室间,CV 5%,，测定值与靶值的,Bias0.3%,CAP SURVEY(mean 2SD),25,2010,年，,99%,实验室以,HbA1c,报告结果，室间,CV 5%,，,测定值与靶值的偏倚,0.8%HbA1c,国内、外变异度对比,26,靶值：,5.4,最大值：,6.3,最小值：,4.6,变异系数：,3.5,靶值：,5.5,最大值：,7.2,最小值：,3.9,变异系数：,8.4,1,所有仪器组,2,Abbott Architect System/Aeroset,组,3,Bio-Rad HPLC,组,4,TOSOH G7,组,5,Drew DS5/Bio-Rad Diastat,组,6,其它仪器组,7,Primus HPLC,组,8,NycoCard Reader II,组,9,ARKRAY HA-8160,组,10,Beckman Synchron Systems,组,11,Olypus AU Systems,组,12,Roche COBAS,Roche/Hitachi,组,13,惠中,MQ-2000,我国室间质评,CAP,能力验证,我国,201111,样本结果,(mean 2SD,）,靶值：,6.6%HbA1c,组,实验室数,平均值,中位数,标准差,变异系数（,%,）,最大值,最小值,Abbott Architect System/Aeroset,组,14,6.55,6.59,0.73,11.15,7.74,5.20,Bio-Rad HPLC,组,167,6.53,6.60,0.29,4.51,7.10,5.80,TOSOH G7,组,69,6.71,6.70,0.42,6.31,8.10,5.00,Drew DS5/Bio-Rad Diastat,组,28,7.21,7.05,0.67,9.30,8.45,6.20,其它仪器组,58,6.49,6.57,0.69,10.64,8.00,4.70,Primus HPLC,组,34,6.80,6.80,0.21,3.04,7.30,6.37,NycoCard Reader II,组,24,6.40,6.40,0.81,12.67,8.70,4.90,ARKRAY HA-8160,组,32,6.78,6.80,0.25,3.67,7.20,6.10,Beckman Synchron Systems,组,8,6.81,6.71,0.63,9.21,7.60,5.76,Olypus AU Systems,组,46,6.34,6.28,0.84,13.19,8.44,4.58,Roche COBAS,Roche/Hitachi,组,79,6.63,6.67,0.53,7.98,7.90,5.40,惠中,MQ-2000,8,7.95,7.60,0.93,11.70,9.30,6.70,2010-2011,国内外变异度对比,我国,CAP,56,家三甲医院实验室，采用国际普遍使用的方法,（,HPLC,法,、,免疫法）,2010,年,EQA,我国不同级别实验室变异度对比,2010,年我国参加国际比对,平均值,Bias,（,%HbA1c),CV,（,%,）,C1,6.53,0.3,2.52,C2,8.00,0.22,2.82,C3,10.49,0.26,3.18,C4,6.45,0.06,2.52,NGSP,靶值,16,家三甲医院实验室，采用国际普遍使用的方法,（,HPLC,法,、,免疫法）,影响检测质量的因素,方法选择,使用方法种类多，有的方法没有进行标准化认证,方法使用,人员：能力参差不齐,室内质控：少做、不做,校准：不能定期、定时校准，不使用配套校准品,试剂：色谱柱（适用时）：超限使用,仪器：不能定期维护、保养,HbA,1c,检测质量保证,31,宗旨：建立,HbA,1c,检测的技术规范，提高,HbA,1c,测定结果的可比性程度,指南从,方法的选择,方法的规范使用,测定结果质量的监测,三个质量环节制定了系统的技术规范原则，以保证糖化血红蛋白测定结果质量,方法的选择,32,应选用测定结果可溯源至,IFCC,参考系统的分析系统，例如：获得,NGSP,认证。,NGSP,认证的有效期为,1,年，查询网址：,实验室应知晓所选分析系统可能存在的干扰因素,不同分析系统干扰因素是不同的,POCT,（,point-of-care testing,）方法的精准性不能满足临床需求，目前不应用于糖尿病的诊断,方法性能,33,实验室准备采用一个新的分析系统（新仪器、新试剂）测定临床样品前，应对系统性能进行验证,精密度：室内,CV,3%,目前许多测定方法的室内,CV,小于,2%,只有控制室内,CV,小于,3%,，才能实现室间,CV,小于,5%,，应控制室内,CV,小于,3%,精密度实验方法,分别采用不少于,2,个水平的质控物或样品（高、低值），每天测定,2,次（,2,次时间间隔不少于,2,小时），每次重复测,2,个结果，测定,20,个工作日，以,20,个工作日的,80,个结果计算平均值、标准差及变异系数,时间长度很重要，因为只有在相对较长的时间内，一些因素（不同批号试剂,/,校准物,/,色谱柱（适用时）、校准频率、不同操作人员、不同分析仪状况、不同环境条件等）对测定结果的影响才能体现，可以客观反映实际情况,方法的规范化使用,实验室应制定标准操作程序,项目名称,方法学原理,样本（采血管,/,抗凝剂、储存）,校准程序（校准日期间隔、校准方、