水中细菌的测定

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,水的细菌学检查,-,细菌总数的测定,目的要求,通过实验掌握水样的采集和水样中细菌总数测定的方法。,实验原理,生活用水的水源常被生活污水、工业废水以及人畜粪便所污染。,腐生性微生物对人无害，而病原性微生物则能引起传染病甚至流行病，如霍乱、伤寒、细菌性痢疾和阿米巴性痢疾以及脊髓灰质炎和传染性肝炎等病毒性疾病。,1,、水中细菌总数的测定,水中的细菌总数越多，说明水中有机物的含量就越高，水体被有机物污染的程度越重。,水中细菌的种属繁多，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中的细菌的总数实际上是一种近似值。,绝大多数腐生性和致病性的细菌，可在肉膏蛋白胨培养基上进行生长。因此,应用,平板菌落计数技术,来测定水样中的细菌总数,基本上能代表水样中细菌的数量。,如何测定水样是否合乎饮用标准？,水中细菌总数的测定和计算,在肉膏蛋白胨培养基上，,1ml,水样，经,37,，,24h,培养后所生长出来的总菌数。,我国饮用水的卫生学指标：在,1ml,自来水中细菌总数不得超过,100,个。,器 材,培养基：肉膏蛋白胨琼脂培养基；灭菌水,其他用具：灭菌三角瓶，灭菌培养皿，,灭菌试管 等,操作步骤,1,、水样的采取,（,1,）自来水：水龙头火焰灼烧,3min,，再开放水龙头流水,5min,后，以灭菌三角瓶接取水样,（,2,）湖水：取距水面,10-15cm,的深层水样，最好立即实验，否则放入冰箱中保存。,2,、细菌总数测定,（,1,）自来水,A,、用灭菌管吸取,1ml,水样，注入灭菌培养皿中，做两个皿。,B,、分别倾入约,15ml,已溶化并冷却到,45,左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基，在桌上作平面旋摇，使水样与培养基充分混匀。,C,、另取一空的灭菌培养皿，,倾入约,15ml,肉膏蛋白胨琼脂培养基，作空白对照。,D,、培养基凝固后，倒置于,37,中，培养,24h,，进行菌落计数。,（,2,）湖水,A,、稀释水样：,a,、取,3,个灭菌空试管，分别加入,9ml,灭菌水。,b,、取,1ml,水样注入第一管,9ml,灭菌水内、摇匀。,c,、再自第一管取,1ml,至下一管灭菌水内，如此 稀释到第三管，稀释度分别为,10,-1,，,10,-2,，,10,-3,。,B,、自三个稀释度的试管中各取,1ml,稀释水加入空的灭菌培养皿中，每一稀释度做两个培养皿。,C,、各,倾入约,15ml,已溶化并冷却到,45,左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基，在桌上作平面旋摇，使水样与培养基充分混匀。,D,、培养基凝固后，倒置于,37,中，培养,24h,，进行菌落计数,菌落计数,1,、自来水：两个平板的平均菌落数即为,1ml,水样的细菌总数。,2,、湖水：,（,1,）先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个平板有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以无片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到平板的,1/2,，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘,2,以代表全平板的菌落数。,（,2,）首先选择平均菌落数在,30-300,之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数，见例,1,。,例次,不同稀释度的平均菌落数,两个稀释度菌落数之比,菌落总数（个,/ml,）,10,-1,10,-2,10,-3,1,1365,164,20,16400,或,1.6,10,4,2,2760,295,46,1.6,37750,或,3.8,10,4,3,2890,271,60,2.2,27100,或,2.7,10,4,4,无法计数,1650,513,513000,或,5.1,10,5,5,27,11,5,270,或,2.7,10,2,6,无法计数,305,12,30500,或,3.1,10,4,（,3,）若有两个稀释度的平均菌落数均在,30-300,之间，则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于,2,，采取两者的平均值，若大于,2,，则取其中较小的菌落总数，见例,2,和例,3,。,例次,不同稀释度的平均菌落数,两个稀释度菌落数之比,菌落总数（个,/ml,）,10,-1,10,-2,10,-3,1,1365,164,20,16400,或,1.6,10,4,2,2760,295,46,1.6,37750,或,3.8,10,4,3,2890,271,60,2.2,27100,或,2.7,10,4,4,无法计数,1650,513,513000,或,5.1,10,5,5,27,11,5,270,或,2.7,10,2,6,无法计数,305,12,30500,或,3.1,10,4,（,4,）若所有稀释度的平均菌落数均大于,300,，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数，见例,4,。,例次,不同稀释度的平均菌落数,两个稀释度菌落数之比,菌落总数（个,/ml,）,10,-1,10,-2,10,-3,1,1365,164,20,16400,或,1.6,10,4,2,2760,295,46,1.6,37750,或,3.8,10,4,3,2890,271,60,2.2,27100,或,2.7,10,4,4,无法计数,1650,513,513000,或,5.1,10,5,5,27,11,5,270,或,2.7,10,2,6,无法计数,305,12,30500,或,3.1,10,4,（,5,）若所有稀释度的平均菌落数均小于,30,，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数，见例,5,。,例次,不同稀释度的平均菌落数,两个稀释度菌落数之比,菌落总数（个,/ml,）,10,-1,10,-2,10,-3,1,1365,164,20,16400,或,1.6,10,4,2,2760,295,46,1.6,37750,或,3.8,10,4,3,2890,271,60,2.2,27100,或,2.7,10,4,4,无法计数,1650,513,513000,或,5.1,10,5,5,27,11,5,270,或,2.7,10,2,6,无法计数,305,12,30500,或,3.1,10,4,（,6,）若所有稀释度的平均菌落数均不在,30-300,之间，则以最近,300,或,30,的平均菌落数乘以稀释倍数，见例,6,。,例次,不同稀释度的平均菌落数,两个稀释度菌落数之比,菌落总数（个,/ml,）,10,-1,10,-2,10,-3,1,1365,164,20,16400,或,1.6,10,4,2,2760,295,46,1.6,37750,或,3.8,10,4,3,2890,271,60,2.2,27100,或,2.7,10,4,4,无法计数,1650,513,513000,或,5.1,10,5,5,27,11,5,270,或,2.7,10,2,6,无法计数,305,12,30500,或,3.1,10,4,思考题,1,、从自来水水样细菌总数检测的结果判断是否符合饮用水的卫生标准？,2,、你所测的池塘水、河水、湖水的污秽度如何？通过实验你对保护水资源有何认识？,3,、试与其他同学的实验结果进行比较，从中判断你的实验结果误差如何？原因是什么？,