肿瘤基因治疗的基本策略和常用方法

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,肿瘤基,因,因治疗,的,的基本,策,策略和,常,常用方,法,法,一.肿,瘤,瘤和基,因,因治疗,的,的基本,概,概念,二.采,用,用基因,治,治疗肿,瘤,瘤的基,本,本策略,三.常,采,采用的,基,基因治,疗,疗方法,四.对,未,未来肿,瘤,瘤基因,治,治疗的,展,展望,Themaker:,一.肿,瘤,瘤和基,因,因治疗,的,的基本,概,概念,1.肿,瘤,瘤（Tumor）,机体在,各,各种致,癌,癌因素,作,作用下,，,，局部,组,组织的,某,某一个,细,细胞在,基,基因水,平,平上失,去,去对其,生,生长的,正,正常调,控,控，导,致,致其克,隆,隆性异,常,常增生,而,而形成,的,的异常,病,病变。,学,学界一,般,般将肿,瘤,瘤分为,良,良性和,恶,恶性两,大,大类。,2.基,因,因治疗,指将外,源,源正常,基,基因导,入,入靶细,胞,胞，以,纠,纠正或,补,补偿因,基,基因缺,陷,陷和异,常,常引起,的,的疾病,，,，以达,到,到治疗,目,目的。,也,也就是,将,将外源,基,基因通,过,过基因,转,转移技,术,术将其,插,插入病,人,人的适,当,当的受体细胞中,，,，使外,源,源基因制,造,造的产物,能,能治疗,某,某种疾,病,病。从,广,广义说,，,，基因,治,治疗还,可,可包括,从,从DNA水平,采,采取的,治,治疗某,些,些疾病,的,的措施,和,和新技,术,术。,3.什,么,么是,肿瘤基,因,因治疗,基因治,疗,疗的经,典,典概念,指,指通过,外,外源基,因,因导人,人,人体以,纠,纠正内,在,在的基,因,因缺陷,的,的疗法,。,。肿瘤,基,基因治,疗,疗不再,局,局限于,“,“纠正,基,基因缺,陷,陷”，,系,系指将,外,外源的,正,正常基,因,因导人,人,人体，,达,达到直,接,接或间,接,接抑制,或,或杀伤,肿,肿瘤细,胞,胞的目,的,的。基,因,因是生,命,命之本,，,，是生,物,物得以,保,保持其,连,连续性,和,和稳定,性,性的物,质,质基础,。,。随着,对,对恶性,肿,肿瘤发,生,生发展,分,分子机,制,制研究,的,的不断,深,深人，,出,出于对,肿,肿瘤是,一,一种基,因,因病的,认,认识，,加,加之恶,性,性肿瘤,的,的发病,率,率和病,死,死率较,高,高，这,使,使得恶,性,性肿瘤,的,的基因,治,治疗成,为,为近年,来,来基因,治,治疗研,究,究的主,要,要内容,和,和热点,。,。,4.与,基,基因治,疗,疗有关,几,几个概,念,念,a.基,因,因毒癌,发,发生发,展,展的第,一,一步是,活,活化致,癌,癌物，,改,改变细,胞,胞内的DNA,，,，导致,原,原癌基,因,因的移,位,位及扩,增,增，这,些,些特殊,基,基因的,翻,翻译，,使,使带有,这,这些异,常,常基因,细,细胞的,某,某些特,性,性得以,专,专一表,达,达，一,个,个特殊,的,的化学,物,物对一,系,系列细,胞,胞有诱,变,变及DNA修,复,复作用,者,者，称,为,为基因,毒,毒。目,前,前人类,已,已知的,致,致癌物,均,均为基,因,因毒。,b.原,癌,癌基因(前癌,基,基因),细,细胞癌,基,基因存,在,在于细,胞,胞基因,组,组内，,激,激活前,的,的细胞,癌,癌基因,称,称为原,癌,癌基因(前癌,基,基因),，,，一旦,原,原癌基,因,因激活,成,成癌基,因,因便会,引,引起细,胞,胞癌变,，,，癌基,因,因激活,后,后，通,过,过其表,达,达产物,改,改变细,胞,胞生长,和,和分化,规,规律，,诱,诱发细,胞,胞癌变,。,。细胞,癌,癌基因,被,被激活,的,的途径,很,很多，,如,如启动,子,子插人,，,，基因,重,重排和,扩,扩增，,基,基因点,突,突变和DNA,分,分子中,去,去甲基,化,化等。,c.抑,癌,癌基因,正,正常细,胞,胞中存,在,在抑制,肿,肿瘤发,生,生的基,因,因，称,为,为抑癌,基,基因。,抑,抑癌基,因,因的存,在,在从最,初,初的一,个,个发现,中,中得到,证,证实，,即,即一个,肿,肿瘤细,胞,胞和一,个,个正常,细,细胞融,合,合成的,杂,杂交细,胞,胞，往,往,往不具,有,有细胞,表,表型，,即,即使两,种,种不同,的,的肿瘤,细,细胞杂,交,交，也,可,可能是,非,非肿瘤,性,性的，,只,只有正,常,常的亲,代,代失去,某,某些基,因,因之后,，,，其子,代,代才会,发,发生肿,瘤,瘤。后,来,来，通,过,过限制,性,性内切,酶,酶片段,长,长度多,态,态分析,及,及分子,克,克隆技,术,术的研,究,究证实,，,，正常,细,细胞中,有,有一类,对,对细胞,增,增殖起,负,负性调,节,节作用,的,的基因,，,，如大,肠,肠癌中,的,的p53基因,，,，视网,膜,膜母细,胞,胞瘤和,骨,骨肉瘤,中,中的Rb基因,。,。这两,种,种基因,也,也是目,前,前被确,认,认并研,究,究最为,深,深人的,抑,抑癌基,因,因。如,将,将正常,的,的Rb,基,基因转,人,人骨肉,瘤,瘤细胞,，,，Rb,基,基因表,达,达增高,，,，细胞,分,分裂几,乎,乎完全,抑,抑制，,将,将Rb,基,基因转,人,人前列,腺,腺细胞,，,，对正,常,常细胞,的,的生长,无,无影响,，,，但抑,制,制了细,胞,胞的癌,变,变，所,以,以当,这,这一类,的,的抑癌,基,基因发,生,生丢失,，,，失活,或,或变异,时,时，就,会,会促进,细,细胞恶,变,变。,二.采用,基,基因治疗,肿,肿瘤的基,本,本策略,目前国内,外,外恶性肿,瘤,瘤基因治,疗,疗基本策,略,略包括：1.,免,免疫性基,因,因治疗,2.病因,性,性基因治,疗,疗,3.溶瘤,腺,腺病毒基,因,因治疗,4.自杀,基,基因治疗,等,等,1.免疫,性,性基因治,疗,疗,a.免,疫,疫性基因,治,治疗的对,象,象,:,在肿瘤发,生,生发展过,程,程中，免,疫,疫系统发,育,育未完善,（,（3-4,岁,岁）和免,疫,疫机能衰,退,退（老年,人,人的细胞,免,免疫和体,液,液免疫功,能,能均衰退,）,）而出现,两,两个肿瘤,发,发生的年,龄,龄高峰期,。,。,胸腺发育,不,不良（Digeoges,）,）综合症,或,或咽囊综,合,合症是因,胸,胸腺发育,不,不良而导,致,致细胞免,疫,疫系统停,留,留在未分,化,化阶段，,这,这类患儿,兼,兼有细胞,免,免疫缺陷,和,和体液免,疫,疫缺陷的,共,共济失调,，,，恶性肿,瘤,瘤的发生,率,率高达10%。,由,由此说,明,明细胞免,疫,疫和体液,免,免疫功能,的,的正常或,活,活性增强,在,在抗恶性,肿,肿瘤的发,生,生中是不,可,可缺少的,。,。,选择性IgA缺乏,：,：患者血,浆,浆中IgA极低，,而,而IgG,、,、IgM,与,与细胞免,疫,疫正常，,组,组织中缺,乏,乏分泌IgA的浆,细,细胞，约10%发,生,生胃癌。,当,当IgM,缺,缺乏时，,约,约有8%,患,患者发生,恶,恶性肿瘤,以,以及淋巴,网,网状恶性,疾,疾病。研,究,究发现当,患,患者免疫,球,球蛋白很,低,低，抗体,产,产生受到,严,严重影响,时,时，临床,上,上病人除,了,了反复发,生,生化脓性,感,感染外，,其,其患者发,生,生恶性肿,瘤,瘤率为8-10%,，,，常见类,型,型为淋巴,网,网状系统,肿,肿瘤（56%）和,胃,胃肠道上,皮,皮癌（26%）。Wiskott-Aldrich综,合,合症：（,严,严重混合,型,型免疫缺,陷,陷综合症,）,）以血小,板,板减少出,血,血，反复,感,感染为临,床,床特征，,早,早期细胞,免,免疫完善,，,，随之淋,巴,巴细胞减,少,少，体外,淋,淋转反应,缺,缺乏，病,儿,儿很少活,过,过青春期,，,，约8-10%发,生,生淋巴网,状,状系统肿,瘤,瘤。,1.2,免,免疫性基,因,因治疗的,方,方法,研究发现,在,在肿瘤发,生,生发展过,程,程中存在,着,着机体免,疫,疫系统对,肿,肿瘤细胞,的,的免疫耐,受,受状态，,而,而这种状,态,态可能源,于,于肿瘤细,胞,胞本身的,免,免疫性不,强,强（如MHC表达,不,不足），,也,也可源于,抗,抗原递全,细,细胞（APC）不,能,能提供足,够,够的共刺,激,激信号（,如,如B7）,或,或者机体,免,免疫因子,分,分泌不足,，,，在免疫,性,性基因治,疗,疗中通过,以,以下三种,方,方法纠正,机,机体免疫,的,的耐受状,态,态。,a.将,某,某些细胞,因,因子（如IL-2,、,、TNF-a等）,的,的基因转,染,染到机体,免,免疫细胞,（,（如TIL、LAK细胞及,细,细胞毒淋,巴,巴细胞）,中,中，大幅,度,度提高机,体,体免疫系,统,统对肿瘤,细,细胞的识,别,别和反应,能,能力,。,使用细胞,因,因子的基,因,因治疗在,一,一定程度,上,上克服了,细,细胞因子,注,注射疗法,需,需反复多,次,次应用，,副,副作用严,重,重等缺点,，,，疗效有,较,较大幅度,提,提高。可,以,以这样认,为,为：肿瘤,免,免疫细胞,因,因子基因,治,治疗的开,展,展，为恶,性,性肿瘤患,者,者带来生,的,的希望，,其,其疗效的,稳,稳定，治,疗,疗的简单,、,、安全，,已,已成为肿,瘤,瘤免疫基,因,因治疗研,究,究的最常,用,用方法而,独,独树一帜,，,，前景是,令,令业内人,士,士振奋的,。,。,b.肿,瘤,瘤细胞存,在,在功能性MHCI,类,类抗原和,共,共刺激信,号,号表达不,足,足,，将一些,与,与免疫识,别,别有关的,基,基因（如HLA、B7等）,转,转染到体,外,外培养的,肿,肿瘤细胞,，,，经照射,后,后再植入,肿,肿瘤患者,体,体内;或,者,者表达HLA-B7的病毒,载,载体或质,粒,粒DNA,与,与脂质复,合,合物直接,注,注射到瘤,体,体内，以,大,大幅度增,强,强肿瘤细,胞,胞对机体,免,免疫系统,的,的免疫原,性,性，诱导,宿,宿主的免,疫,疫反应而,提,提高宿主,的,的免疫监,视,视功能和,对,对肿瘤细,胞,胞的攻击,能,能力，达,到,到治愈率,的,的提高具,有,有积极作,用,用。,c.制,备,备肿瘤KNA疫苗,采用编码,特,特异抗原,的,的基因直,接,接注入人,体,体，通过,其,其在机体,内,内的表达,从,从而激发,机,机体对编,码,码抗原的,免,免疫反应,。,。应用癌,胚,胚抗原（CEA）,制,制备的DNA疫苗,在,在实验中,显,显示出一,定,定效果，,研,研究的前,景,景可观，,进,进入临床,药,药理实验,只,只是时间,问,问题而毋,庸,庸置疑,。,。,2 恶性,肿,肿瘤的病,因,因性基因,治,治疗,肿瘤病因,性,性基因治,疗,疗主要针,对,对癌基因,和,和抑癌基,因,因，其治,疗,疗策略是,抑,抑制、阻,断,断癌基因,的,的表达或,替,替代，恢,复,复抑癌基,因,因的功能,。,。从而达,到,到治疗肿,瘤,瘤的目的,。,。,a.针,对,对癌基因,治,治疗,采用反义,寡,寡核苷酸,、,、核酸、,三,三链结构,寡,寡核苷酸,（,（Triplex-formingoligonucleotides，TFO）抑,制,制肿瘤细,胞,胞的基因,转,转录，抑,制,制癌基因,的,的表达将,有,有可能使,肿,肿瘤的基,因,因表达调,控,控回复到,正,正常并使,细,细胞重新,分,分化或者,诱,诱发其凋,亡,亡（Apoptosis）,。,。由于转,条,条是遗传,信,信息放大,的,的过程，,因,因此对癌,基,基因的表,达,达抑制来,说,说更为有,效,效，其治,疗,疗前景是,极,极为乐观,的,的。,b.针,对,对抑癌基,因,因治疗,替代或恢,复,复由于缺,失,失或突变,而,而丢失的,抑,抑癌基因,（,（Tumor suppressor gene）的,正,正常功能,是,是肿瘤病,因,因性治疗,的,的手段而,被,被世人所,公,公认。利,用,用抑癌基,因,因治疗肿