第2章提取分离(天然药化)

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第二,章,天,天然,药,药物,化,化学,成,成分,提,提取,、,、分,离,离和,鉴,鉴定,的,的方,法,法与,技,技术,第一,节,节,天,天然,药,药物,化,化学,成,成分,的,的提,取,取方,法,法,第,二,二,节,节,天,天,然,然,药,药,物,物,化,化,学,学,成,成,分,分,的,的,分,分,离,离,方,方,法,法,第,三,三,节,节,天,天,然,然,药,药,物,物,化,化,学,学,成,成,分,分,的,的,鉴,鉴,定,定,方,方,法,法,提,取,取,前,前,的,的,准,准,备,备,系,统,统,的,的,文,文,献,献,调,调,研,研,原,材,材,料,料,的,的,处,处,理,理,保,留,留,凭,凭,证,证,标,标,本,本,提,取,取,分,分,离,离,一,一,般,般,原,原,则,则,已,知,知,物,物,或,或,已,已,知,知,结,结,构,构,类,类,型,型,文,献,献,方,方,法,法,未,知,知,物,物,活,性,性,跟,跟,踪,踪,（,（,定,定,向,向,分,分,离,离,）,）,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,常,用,用,的,的,方,方,法,法,：,：,1,、溶,剂,剂,提,提,取,取,法,法,（,（,最,最,常,常,用,用,的,的,方,方,法,法,）,）,2,、,水,水,蒸,蒸,气,气,蒸,蒸,馏,馏,法,法,（,（,挥,挥,发,发,性,性,的,的,物,物,质,质,）,）,3,、,升,升,华,华,法,法,（,升,升,华,华,性,性,的,的,物,物,质,质,）,）,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,1,、,溶,溶,剂,剂,提,提,取,取,法,法,（,一,一,）,）,常,常,用,用,溶,溶,剂,剂,：,：,水,：,：亲,水,水,性,性,有,有,机,机,溶,溶,剂,剂,石,油,油,醚,醚,：,：亲,脂,脂,性,性,有,有,机,机,溶,溶,剂,剂,*,常,见,见,溶,溶,剂,剂,极,极,性,性,强,强,弱,弱,顺,顺,序,序,如,如,下,下：,环,己,己,烷,烷,石,石,油,油,醚,醚,苯,苯,二,二,氯,氯,甲,甲,烷,烷,乙,乙,醚,醚,氯,氯,仿,仿,乙,乙,酸,酸,乙,乙,酯,酯,丙,丙,酮,酮,正,正,丁,丁,醇,醇,乙,乙,醇,醇,甲,甲,醇,醇,乙,乙,腈,腈,水,水,吡,吡,啶,啶,乙,乙,酸,酸,一、天,然,然药物,有,有效成,分,分的提,取,取,1,、溶剂,提,提取法,一、天,然,然药物,有,有效成,分,分的提,取,取,1,、溶剂,提,提取法,化合物,亲,亲水性,和,和亲脂,性,性的程,度,度与分,子,子结构,有,有直接,的,的关系,。,。,eg,：两种,母,母核相,同,同的成,分,分：,官能团极性越,大,大,/,极性官,能,能团数,目,目多,分,分子,极,极性大,亲,亲水性,强,强,理想溶,剂,剂（,idealsolvents,）：,（,1,）对有,效,效成分,溶,溶解度,大,大；,（,2,）对无,效,效成分,溶,溶解度,小,小；,（,3,）与有,效,效成分,不,不起化,学,学反应,；,；,（,4,）安全,，,，成本,低,低，易,得,得。,（二）,溶,溶剂提,取,取法原,理,理：相似相,溶,溶,（三）,影,影响溶,剂,剂提取,效,效率的,因,因素,1),原料的,粒,粒度：,粉碎可,增,增加药,物,物的表,面,面积，,加,加速有,效,效成分,的,的溶出,；,；如用,水,水提取,，,，最好,采,采用粗,粉,粉，用,有,有机溶,剂,剂提取,可,可略细,。,。,2),提取温,度,度：,温度增,高,高可增,加,加有效,成,成分的,溶,溶出；,温,温度一,般,般控制,在,在,60,左右,为,为宜，,最,最高不,宜,宜超过,100,。,3),提取时,间,间：,在药材,细,细胞内,外,外有效,成,成分的,浓,浓度达,到,到平衡,前,前，提,取,取时间,延,延长，,提,提取量,也,也随着,增,增加。,4),提取压,力,力：,加压有,利,利于药,材,材中的,化,化学成,分,分溶出,。,。,一、天,然,然药物,有,有效成,分,分的提,取,取,1,、溶剂,提,提取法,按是否,加,加热分,为,为：,冷提,-,适用于,受,受热不,稳,稳定的,成,成分,热提,-,受热稳,定,定的成,分,分,一、天,然,然药物,有,有效成,分,分的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,（四,）,）溶,剂,剂提,取,取法,分,分类,煎煮,法,法：水,浸渍,法,法：水,/,稀醇,，,，冷,提,提,渗漉,法,法：乙醇,，,，冷,提,提,回流,提,提取：有,机,机溶,剂,剂，,溶,溶剂,用,用量,大,大,连续,回,回流,提,提取,：,：有机,溶,溶剂,，,，索,氏,氏提,取,取器,超临,界,界流,体,体萃,取,取（,SFE),超声,提,提取,：,：各种,溶,溶剂,，,，可,加,加热,微波,辅,辅助,提,提取,法,法,按具,体,体的,操,操作,方,方法,分,分为,：,：,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,1),煎煮,法,法,(,Decoction),：,是在,中,中药,材,材中,加,加入,水,水后,加,加热,煮,煮沸,，,，将,有,有效,成,成分,提,提取,出,出来,的,的方,法,法。,特点,：,：操,作,作简,单,单，,对,对易,挥,挥发,、,、热,不,不稳,定,定的,成,成分,不,不宜,用,用。,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,2),浸渍,法,法,(Maceration),：常温,或,或低,热,热条,件,件下,用,用适,当,当的,溶,溶剂,浸,浸渍,药,药材,以,以溶,出,出其,中,中成,分,分的,方,方法,。,。,优点,：,：用水,或,或有,机,机溶,剂,剂，,不,不加,热,热。,适用,范,范围,：,：适用,于,于适合,遇,遇热,不,不稳,定,定成,分,分或含大量,淀,淀粉,、,、果,胶,胶、,树,树胶,、,、粘,液,液质的药,材,材的,提,提取,。,。,缺点,：,：出膏,率,率低,，,，用,水,水做,溶,溶剂,时,时易,发,发霉,，,，需,加,加防,腐,腐剂,。,。,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,Simplepercolateassembly,3,）渗,漉,漉（,Percolation),：,不断,向,向粉,碎,碎的,药,药材,中,中添,加,加新,鲜,鲜浸,出,出溶,液,液，,使,使其,渗,渗过,药,药材,，,，从,渗,渗漉,筒,筒下,端,端出,口,口流,出,出浸,出,出液,的,的方,法,法。,优点：,有效,成,成分,浸,浸出,完,完全,，,，可,直,直接,收,收集,浸,浸出,液,液；,缺点：,消耗,溶,溶剂,量,量大,，,，费,时,时长,，,，操,作,作麻,烦,烦。,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,工业,生,生产,用,用的,渗,渗漉,装,装置,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,Simplerefluxingassembly,4),回流,提,提取,法,法,(Refluxing),：,是用,易,易挥,发,发的,有,有机,溶,溶剂,加,加热,回,回流,提,提取,药,药材,成,成分,的,的方,法,法。,特点,：,：,热不,稳,稳定,的,的成,分,分不,宜,宜用,，,，溶,剂,剂消,耗,耗量,大,大，,操,操作,麻,麻烦,。,。,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,5),连续,回,回流,提,提取,法,法（,ContinuousRefluxing,）,：,AssemblyofSoxhletextractor,（索,式,式,/,沙式,提,提取,器,器）,优点,：,：节省,溶,溶剂,、,、效,率,率高,;,缺点,：,：对热,不,不稳,定,定成,分,分不,宜,宜用,，,，时,间,间长,。,。,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,超临,界,界流,体,体的,密,密度,与,与液,体,体很,接,接近，而它,又,又具,有,有气,体,体扩,散,散性,能,能,常用,的,的临,界,界流,体,体有,CO,2,、,N,2,O,、,乙,乙烷,、,、丙,烷,烷等。,6),超临,界,界流,体,体提,取,取法,（,（,SFE),在超,临,临界,状,状态,下,下，,用,用超,临,临界,流,流体,溶,溶出,天,天然,药,药物,原,原料,中,中的,化,化学,成,成分,，,，然,后,后借,助,助减,压,压、,升,升温,的,的方,法,法使,超,超临,界,界流,体,体变,成,成普,通,通气,体,体，,被,被提,取,取的,化,化学,成,成分,则,则完,全,全或,基,基本,析,析出,，,，从,而,而达,到,到提,取,取的,目,目的,。,。,一、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的提,取,取,1,、溶,剂,剂提,取,取法,控温,面,面板,高压,泵,泵,超临,界,界,CO,2,萃取,实,实验,装,装置,示,示意,图,图,原,料,萃取柱,玻,璃,珠,脱,脂,棉,超临,界,界萃,取,取实,验,验装,置,置与,实,实验,方,方法,CO,2,钢,瓶,P,CO,2,冷温槽,恒,温,箱,流量计,接,收,瓶,小试,实,实验,装,装置,图,图,实验,装,装置,小,试,试实,验,验装,置,置,上世,纪,纪,50,年代,初,初进,入,入试,验,验阶,段,段；,70,、,80,年代,，,，,SFE,越来,越,越多,的,的用,于,于食,品,品、,香,香料,的,的提,取,取；,90,年代，开,始,始从植物,药,药中提取,成,成分，如,蛇,蛇床子、,茵,茵陈蒿、,桑,桑白皮中,提,提取有效,成,成分。,中小型,SFE,装置图,一、天然,药,药物有效,成,成分的提,取,取,1,、溶剂提,取,取法,不残留溶,剂,剂、萃取,速,速度快、,收,收率高、,工,工艺流程,简,简单、操,作,作方便。,安全、无,污,污染，产,品,品是天然,的,的。,萃取温度,低,低。,萃取介质,可,可重复利,用,用，节约,成,成本。,可与其他,色,色谱技术,及,及,IR,、,MS,联用，可,高,高速快速,的,的分析中,药,药及其制,剂,剂的有效,成,成分。,对脂溶性,成,成分溶解,能,能力强，,而,而对水溶,性,性成分溶,解,解能力弱,。,。,设备造价,高,高，使生,产,产成本上,升,升。,更换产品,时,时清洗设,备,备较困难,。,。,特点,缺点,一、天然,药,药物有效,成,成分的提,取,取,1,、溶剂提,取,取法,为物理过,程,程，无化,学,学反应，,生,生物活性,不,不减。大,能,能量的超,声,声波产生,的,的极大压,力,力造成植,物,物物细胞,壁,壁及整个,生,生物体破,裂,裂，胞内,物,物质的释,放,放、扩散,及,及溶解。,7),超声提取,法,法（,ultrasonic extraction),实验室用,小,小型超声,仪,仪,一、天然,药,药物有效,成,成分的提,取,取,1,、,溶,溶,剂,剂,提,提,取,取,法,法,无,需,需,高,高,温,温,；,；,常,压,压,提,提,取,取,，,，,安,安,全,全,性,性,好,好,，,，,操,操,作,作,简,简,单,单,易,易,行,行,，,，,维,维,护,护,保,保,养,养,方,方,便,便,；,；,能,够,够,促,促,使,使,植,植,物,物,细,细,胞,胞,壁,壁,的,的,破,破,裂,裂,，,，,提,提,取,取,效,效,率,率,提,提,高,高,；,；,适,用,用,性,性,广,广,；,；,提,取,取,工,工,艺,艺,成,成,本,本,低,低,，,，,能,能,耗,耗,低,低,，,，,综,综,合,合,经,经,济,济,效,效,益,益,显,显,著,著,。,。,超,声,声,辅,辅,助,助,提,提,取,取,法,法,的,的,特,特,点,点,：,：,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,1,、,溶,溶,剂,剂,提,提,取,取,法,法,工,业,业,生,生,产,产,用,用,超,超,声,声,仪,仪,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,1,、,溶,溶,剂,剂,提,提,取,取,法,法,8),微,波,波,提,提,取,取,法,法,（,（,microwaveextraction,）,具,有,有,穿,穿,透,透,力,力,强,强,、,、,选,选,择,择,性,性,高,高,、,、,加,加,热,热,效,效,率,率,高,高,等,等,显,显,著,著,特,特,点,点,，,，,而,而,且,且,其,其,操,操,作,作,简,简,便,便,、,、,快,快,速,速,、,、,节,节,能,能,、,、,高,高,效,效,。,。,缺,点,点：,工,工,业,业,化,化,设,设,备,备,少,少,、,、,成,成,分,分,变,变,化,化,、,、,生,生,物,物,活,活,性,性,变,变,化,化,。,。,工,业,业,生,生,产,产,用,用,微,微,波,波,提,提,取,取,罐,罐,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,1,、,溶,溶,剂,剂,提,提,取,取,法,法,2.,水,蒸,蒸,气,气,蒸,蒸,馏,馏,法,法,（,（,water-steamdistillation,）,提,取,取,具,具,有,有,挥,挥,发,发,性,性,，,，,能,能,随,随,水,水,蒸,蒸,气,气,蒸,蒸,馏,馏,而,而,不,不,被,被,破,破,坏,坏,的,的,成,成,分,分,，,，,如,如,挥,挥,发,发,油,油,。,。,Simple,water-steamdistillation,refluxingassembly,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,2,、,水,水,蒸,蒸,气,气,蒸,蒸,馏,馏,法,法,3.,升,华,华,法,法,（,（,sublimation,）,用,于,于,具,具,有,有,升,升,华,华,性,性,的,的,成,成,分,分,提,提,取,取,，,，,如,如,香,香,豆,豆,素,素,，,，,蒽,蒽,醌,醌,，,，,樟,樟,脑,脑,等,等,。,。,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,3,、,升,升,华,华,法,法,1,、,掌,掌,握,握,常,常,用,用,溶,溶,剂,剂,的,的,极,极,性,性,强,强,弱,弱,顺,顺,序,序,。,。,2,、,溶,溶,剂,剂,提,提,取,取,法,法,原,原,理,理,是,是,什,什,么,么,？,？,3,、,熟,熟,悉,悉,天,天,然,然,药,药,物,物,化,化,学,学,提,提,取,取,方,方,法,法,以,以,及,及,各,各,种,种,提,提,取,取,方,方,法,法,的,的,优,优,缺,缺,点,点,。,。,一,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,提,提,取,取,小,结,结,常,见,见,的,的,方,方,法,法,：,：,液,-,液,萃,萃,取,取,法,法,逆,流,流,分,分,配,配,法,法,（,（,CCD,）,液,滴,滴,逆,逆,流,流,分,分,配,配,法,法,（,（,DCCC,）,1.,两,相,相,溶,溶,剂,剂,萃,萃,取,取,法,法,二,、,、,天,天,然,然,药,药,物,物,有,有,效,效,成,成,分,分,的,的,分,分,离,离,方,方,法,法,逆流连续萃,取,取法：,连续的两相,溶,溶剂萃取法,。,。,特点：条件温和,、,、萃取充分,。,。,二、天然药,物,物有效成分,的,的分离方法,逆流分配法,：,：,多次连续液,-,液萃取分离,过,过程。,特点：条件温和,，,，样品易回,收,收，适用于,中,中等极性、,不,不稳定物质,的,的分离。,萃取法：,液滴逆流色,谱,谱,(DCCC):,液,-,液分配色谱,，,，流动相呈,液,液滴形式垂,直,直上升或下,降,降，通过固,定,定相的液柱,，,，实现物质,的,的逆流色谱,分,分离。,特点：不易乳化，,样,样品可定量,回,回收，分离,效,效果好，特,别,别适合于分,离,离皂苷等水,溶,溶性成分。,缺点：样品处理,量,量小。,二、天然药,物,物有效成分,的,的分离方法,2.,盐析法,二、天然药,物,物有效成分,的,的分离方法,盐析法是在,中,中草药的水,提,提液中，加,入,入无机盐至,一,一定浓度，,或,或达到饱和,状,状态，可使,某,某些成分在,水,水中的溶解,度,度降低，沉,淀,淀析出，而,与,与水溶性大,的,的杂质分离,。,。,3.,膜分离法,二、天然药,物,物有效成分,的,的分离方法,微滤：亦称微孔过,滤,滤，属于精,密,密过滤，其,基,基本原理是,筛,筛孔分离过,程,程。按材料,可,可分为有机,和,和无机两大,类,类。,超滤：膜孔径范围,在,在,0.05,微米至,1,纳米之间。,纳滤：是介于超滤,与,与反渗透之,间,间的一种膜,分,分离技术，,其,其截留分子,量,量在,80-1000,范围内，孔,径,径为几纳米,。,。,反渗透：是利用反渗,透,透膜只能透,过,过溶剂（通,常,常是水）而,截,截留离子物,质,质或小分子,物,物质的选择,性,性透过性，,以,以膜两侧静,压,压为推动力,，,，而实现的,对,对液体混合,物,物分离的膜,过,过程。,优缺点：操作条件温,和,和、能耗低,、,、操作简单,，,，工艺流程,短,短等优点，,但,但天然产物,本,本身的复杂,性,性和多元性,，,，易造成膜,的,的污染和堵,塞,塞。,4.,结晶法,条件：浓度,、,、合适的溶,剂,剂；,重结晶只能,纯,纯化杂质在,5%,以下的固体,有,有机物，如杂质含,量,量过高，需,先,先经过其他,方,方法初步提,纯,纯，如萃取,、,、水蒸汽蒸,馏,馏、减压蒸,馏,馏、柱层析,等,等,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,合适,溶,溶剂,的,的选,择,择：,不与,被,被提,纯,纯物,质,质起,化,化学,反,反应,在较高,温,温度,时,时能,溶,溶解,多,多量,的,的被,提,提纯,物,物质,而,而在,室,室温,或,或更,低,低温,度,度时,只,只能,溶,溶解,很,很少,量,量；,对杂,质,质的,溶,溶解,度,度非,常,常大,或,或非,常,常小，前,一,一种,情,情况,杂,杂质,留,留于,母,母液,内,内，,后,后一,种,种情,况,况趁,热,热过,滤,滤时,杂,杂质,被,被滤,除,除；,溶剂,的,的沸,点,点不,宜,宜太,低,低，,也,也不,宜,宜过,高,高。,能给,出,出较,好,好的,结,结晶,。,。,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,晶体,的,的析,出,出,滤液,冷,冷却,后,后，,析,析出,晶,晶体,。,。用,冷,冷水,或,或冰,水,水迅,速,速冷,却,却并,剧,剧烈,搅,搅动,溶,溶液,时,时可,得,得细,小,小晶,体,体；,在,在室,温,温下,静,静置,使,使之,缓,缓缓,冷,冷却,，,，则,可,可得,到,到均,匀,匀而,大,大的,晶,晶体,。,。,如果,溶,溶液,冷,冷却,后,后晶,体,体仍,不,不析,出,出，,可,可用,玻,玻璃,抹,抹摩,控,控液,面,面下,的,的容,器,器壁,，,，也,可,可加,入,入品,种,种，,或,或进,一,一步,降,降低,溶,溶液,温,温度,。,。,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,5,沉淀,法,法,a,溶剂,沉,沉淀,法,法：改变,极,极性,使,使部,分,分物,质,质沉,淀,淀析,出,出,水提,醇,醇沉,法,法：除去,多,多糖,、,、蛋,白,白质,等,等水,溶,溶性,杂,杂质,醇提,水,水沉,法,法：除去,树,树脂,、,、叶,绿,绿素,等,等水,不,不溶,性,性杂,质,质,醇,/,醚法,：,：析出,皂,皂苷,丙,丙酮,（,（醇,/,丙酮,法,法）,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,b,酸碱,沉,沉淀,法,法：改变,pH,酸,/,碱法,：,：生,物,物碱,类,类,碱,/,酸法,：,：黄,酮,酮、,蒽,蒽醌,类,类,等电,点,点沉,淀,淀蛋,白,白质,c,沉淀,试,试剂,：,：通过,加,加入,某,某种,沉,沉淀,剂,剂，,使,使之,生,生成,水,水不,溶,溶性,的,的盐,类,类沉,淀,淀析,出,出。,如：,铅,铅盐,沉,沉淀,法,法，,酸,酸性,、,、酚,性,性成,分,分加,中,中性,PbAc,2,，,形成,沉,沉淀,。,。,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,6.1,吸附,色,色谱,：,：,物理,吸,吸附：无,选,选择,性,性的,吸,吸附,，,，吸,附,附,解,解析,发,发生,迅,迅速,。,。吸,附,附剂,如,如硅,胶,胶、,氧,氧化,铝,铝、,活,活性,炭,炭等,化学,吸,吸附：不,可,可逆,性,性。,如,如碱,性,性氧,化,化铝,对,对酚,酸,酸性,成,成分,的,的吸,附,附，,硅,硅胶,对,对生,物,物碱,的,的吸,附,附等,。,。,半化,学,学吸,附,附：聚,酰,酰胺,对,对酚,酸,酸类,、,、醌,类,类的,氢,氢键,吸,吸附,。,。,6.,色谱,法,法,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,吸附,原,原理,：,：相,似,似相,吸,吸,影响,吸,吸附,过,过程,的,的三,要,要素,：,：,吸附,剂,剂（,固,固定,相,相）,，,，,溶质,（,（被,分,分离,物,物质,）,），,溶剂,（,（洗,脱,脱剂,，,，展,开,开剂,，,，流,动,动相,）,）,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,6.2,硅胶,、,、氧,化,化铝,硅胶：应,用,用最,广,广，适用,于,于各,类,类成,分,分分,离,离,氧化,铝,铝：有,中,中性,、,、酸,性,性、,碱,碱性,氧,氧化,铝,铝。碱性,氧,氧化,铝,铝不,适,适合,于,于分,离,离酸,性,性成,分,分，,多,多用,于,于分,离,离生,物,物碱。,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,6.2,硅胶,、,、氧,化,化铝,：,：,被,分,分离,物,物质,吸,吸附,力,力与,结,结构,的,的关,系,系,被分,离,离物,质,质极,性,性大,，,，吸,附,附力,强,强，,Rf,值小,，,，洗,脱,脱难,，,，后,被,被洗,脱,脱下,来,来。,官能,团,团极,性,性大,小,小排,列,列顺,序,序：,-COOHAr-OHR-OHR-NH,2,RNHR,RNR,R,R-CO-NR,R,RCHORCOR,RCOOR,ROR,RH,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,6.2,硅胶,、,、氧,化,化铝,：,：,溶剂,(,洗脱,剂,剂,),的极,性,性与,洗,洗脱,力,力的,关,关系,洗脱,剂,剂极,性,性越,大,大,洗脱,力,力越,强,强,.,二、,天,天然,药,药物,有,有效,成,成分,的,的分,离,离方,法,法,6.3,根据,物,物质,吸,吸附,性,性差,异,异进,行,行分,离,离,吸附,色,色谱,的,的两,种,种操,作,作方,式,式,柱色谱,薄层色谱,二、天然,药,药物有效,成,成分的分,离,离方法,色谱分离,过,过程实验,色谱柱,色谱,混合物,固定相,流动相,色谱分离,二、天然,药,药物有效,成,成分的分,离,离方法,二、天然,药,药物有效,成,成分的分,离,离方法,3.2.1,吸附柱色,谱,谱用于分,离,离注意事,项,项：,1,）吸附剂,用,用量一般为试样量,的,的,30-60,倍。,根据实际,情,情况可适,当,当提高至,试,试样量的,100-200,倍。,2,）应尽量,选,选用极性小的溶剂装柱和溶解试样，以利于在,吸,吸附柱上,形,形成狭窄,的,的原始谱,带,带。,3,）洗脱用,溶,溶剂的极性宜逐步提高，但跳跃,不,不能太大,。,。,多用混合,溶,溶剂：己烷,-,苯、苯,-,乙醚、苯,-,乙酸乙酯,、,、氯仿,-,甲醇等。见,P36,表,1-8,二、天然,药,药物有效,成,成分的分,离,离与精制,4,）为避免,发,发生化学,吸,吸附，酸,性,性物质宜,用,用硅胶、,碱,碱性物质,宜,宜用氧化,铝,铝。,分离酸性物质，洗脱剂中加入适,量,量乙酸或三,氟,氟乙酸等；,分离碱性物质，洗脱剂中加入适,量,量氨或吡啶或二乙胺等；,5,）可加压,，,，溶剂系,统,统可通过,TLC,进行筛选,。,。,一般,TLC,中展开时,R,f,值为,0.2,0.3,的溶剂系,统,统，可以,作,作为柱色,谱,谱分离溶,剂,剂系统。,二、天然,药,药物有效,成,成分的分,离,离与精制,3.3,聚酰胺,(Polyamide),是由己酰,胺,胺聚合成,的,的一类高,分,分子化合,物,物。,分离原理,：主要通,过,过酰胺键与,酚,酚羟基、,酸,酸、醌等,形,形成氢键，产生吸附作用。吸,附,附力取决,于,于形成氢键,缔,缔合的能,力,力。,二、天然,药,药物有效,成,成分的分,离,离与精制,3.3,聚酰胺,吸附力,与,与结构,的,的关系,a.,形成氢,键,键的基,团,团数目,越,越多,吸附力,越,越强,;,b.,形成分,子,子内氢,键,键者,吸附力,减,减少,;,二、天,然,然药物,有,有效成,分,分的分,离,离与精,制,制,c.,芳香化,程,程度越,高,高或共,轭,轭键越,多,多,吸附力,越,越强,;,3.3,聚酰胺,吸附力,与,与结构,的,的关系,溶剂的,洗,洗脱能,力,力,水,含水醇,醇,丙酮,NaOH/H,2,O,甲酰胺,二甲基,甲,甲酰胺,3000 cm,-1,C=O :, 1700 cm,-1,.,IR,相同者为同,一,一化合物,.,三、未知化,合,合物 多,种,种谱学结合,的,的结构解析,第三节,天,天然药物化,学,学成分的鉴,定,定方法,3.,质谱,(MassspectraMS),给出分子量,(M,+,),给出基团或,片,片段信息, HR-MS,可计算分子,式,式,;,原理：,有机分子中,的,的孤对电子,或,或成键电子,，,，在高真空,条,条件下受到,高,高能电子束,的,的轰击，失,去,去一个电子,，,，电离成一,个,个带正电荷,的,的分子离子,。,。,第三节,天,天然药物化,学,学成分的鉴,定,定方法,分子离子和,碎,碎片离子经,电,电场加速获,得,得一定动能,，,，然后以一,定,定动能飞向,磁,磁场。进入,磁,磁场后，其,飞,飞行路线由,直,直线变为弧,线,线，粒子的,荷,荷质比不同,，,，弧线的曲,率,率半径就不,同,同，这样，,不,不同的离子,便,便分离开来,。,。,质谱表达方,式,式,为结构解析,提,提供的信息,化学位移,:, (,用于判断,H,的化学环境,chemical shift,);,偶合常数,:,J,(Hz),用于判断,H,与,H,的关系,coupling constant,),积分面积,:,确定,H,的数目,.,4.,核磁共振谱,（,（,Nuclear magnetic resonance NMR,）,4.1,核磁共振氢,谱,谱（,1,H-NMR,）,第三节,天,天然药物化,学,学成分的鉴,定,定方法,影响化学位,移,移因素,化学位移值,与,与电子云密度有关，电子,云,云密度降低,增大。,1,）诱导效应,2,）共轭效应,4.,核磁共振谱,（,（,Nuclear magnetic resonance NMR,）,4.1,氢谱（,1,H-NMR,）,第三节,天,天然药物化,学,学成分的鉴,定,定方法,4.,核磁共振谱,（,（,Nuclear magnetic resonance NMR,）,4.2,碳谱（,13,C-NMR,）,为结构解析,提,提供的信息,化学位移：,碳,碳处的化学,环,环境,第三节,天,天然药物化,学,学成分的鉴,定,定方法,植物粉末,有机溶剂浸提,（,MeOH,）,有机溶剂萃取,EtOAc/n-BuOH,次级代谢产,物,物,活性代谢产,物,物,次级代谢产,物,物,活性代谢产,物,物,先导化合物,NMR,、,MS,、,UV,、,IR,、,CD,、,ORD,、,X-Ray,、化学方法,正反相硅胶柱层析,凝胶柱层析, HPLC,等分离手段,抗肿瘤、抗糖尿病、抗炎、酶抑制、免疫抑制、抗早老痴呆等多种筛选模型,n-BuOH,浸膏,EtOAc,浸膏,文献调研,样品采集,天然产物研,究,究的一般步,骤,骤（植物）,天然产物研,究,究的一般步,骤,骤（动物）,动物样品切,碎,碎,丙酮超声提取三,次，每次,20 min,有机溶剂萃取,Et,2,O/n-BuOH,n-BuOH,浸膏,水层,Et,2,O,浸膏,作业,1,、常见的天,然,然药物提取,方,方法有哪些,？,？其各自的,适,适用范围和,优,优缺点是什,么,么（列表）,？,？,2,、天然药物,成,成分分离常,见,见的色谱方,法,法有哪些？,各,各自分离原,理,理是什么？,3,、用于结构,鉴,鉴定的四大,谱,谱是什么？,四,四大谱为结,构,构鉴定提供,什,什么样的结,构,构信息？,