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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,传染病疫情现场采样技术,传染病疫情病原学简介,样本采集,标本保存和运输,实验室检测,主要内容,传染病疫情病,原学简介,手足口病疫情:,EV71,,,COXA16,等肠道病毒,流感样疫情:流感病毒、腺病毒、肺炎支原体、呼吸道合胞病毒等,胃肠炎疫情:诺如病毒、轮状病毒、霍乱弧菌、志贺菌、沙门氏菌、致泻性大肠杆菌等,H7N9流感疫情:H7N9流感病毒,伤寒、副伤寒:伤寒、副伤寒沙门氏菌,样品正确采集、保存、运输的意义,样品的正确采集、保存与运输,是获得正确检测结果,采取针对性有效手段控制相应传染病的必要前提。,检测结果与样品质量密切相关。,影响样品质量的因素,采样时间,样品采集类别,选择合适的保存液,保存条件(常温、低温、适温、冷冻),送检是否,及时,病毒采样管,细菌采样管,标本采集人员,病毒的诊断取决于高质量标本的采集,及其保存运输等环节。医疗机构的医生、护士或疾病预防控制中心专业人员负责标本采集并填写,标本登记表,,标本采集人员按照相关要求做好,个人防护,。,标本采集登记表,个人防护设备(,PPE,),采集前的准备,口罩,(N-95 or N/P/R-100),手套,帽子,鞋套,防护服,防护目镜,采集物品包,采集前的准备,常用的采样液,/,病毒,运输液,(VTM,),采集前的准备,pH 7.4,7.6,的,Hanks,液,MEM/DMEM,液,在采样液中需加入抗菌素,可用青霉素(终浓度为,100U/ml,)、庆大霉素(终浓度为,1mg/ml,)和抗真菌药物(终浓度为,2g/ml,)。,在无菌的带螺旋塑料管分装,2-3ml,采样液。最好储存在,:20,4,可放,4896h,室温,12,天,。,采样拭子:使用头部为聚酯纤维的病毒采样拭子(鼻及口咽型),铝或塑料做柄,不用木柄棉拭子。,上呼吸道标本,:咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液,下呼吸道标本:气管吸取物、肺洗液、肺组织标本,血清标本:急性期血清和间隔,2-4,周的恢复期血清,全血标本:急性期非抗凝血,消化道标本,:粪便、肛拭子、呕吐物,脑脊液标本,虫媒标本:蚊子、蜱虫等,动物标本:血清、组织等、,环境标本,:粪便等排泄物、环境表面涂抹物、污水等,标本种类,应当尽量采集病例发病早期的呼吸道或粪便标本,症状出现后尽早采集,尽量在抗病毒药物使用前采集,血清标本应采集发病早期和恢复期双份血清,环境标本采集要注意溯源性,标本采集注意点,咽拭子,标本采集,用,2,根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭,双侧咽扁桃体及咽后壁,,将拭子头浸入含,3ml,采样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。,标本采集,2,、肛拭子,棉拭子应插入肛门直肠内(约,2,-,5cm,),采样后应该在棉拭子上看见粪便,采样后肛拭子应埋入,C-B,培养基或,HANKS,保存液中。,标本采集,3,、血清,采集5,ml,静脉血加入消毒试管中,离心分离血清,放入带螺旋盖管内,于-20以下保存。,标本采集,4,、物体表面涂抹物,用,棉,拭子先蘸入采样液,然后在物体表面来回擦拭,3-5,次,将拭子头浸入含,3ml,采样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。,尽快运到实验室,24,小时内可以检测的可以保存在,4,,超过,24,小时,-70,冻存,。,避免反复冻融,血清标本暂时存在可在,4,冰箱,长期保存于,-20,冰箱,。,标本保存,流感样疫情标本采集要点,样品种类:咽拭子、鼻拭子、含漱液,采集时间:,发病,3,天内,(体温,38,),保存条件:,24,小时内存于,4,以下环境,超过,24,小时存于,-70,以下环境(避免反复冻融)。,病毒采样管:,HANKS,液(,23ml/,管),及时送检要求:疫情样本建议当天送检,监测标本根据送检时间选择合适的保存条件。,标本的包装必需低温转运且保证标本四周带冰。,胃肠炎疫情标本采集要点,样品种类:肛拭子、粪便(510ml或g,拇指大小)、呕吐物等,采集时间:症状出现14日内粪便或肛拭子;,保存条件:24小时内存于4以下环境,超过24小时存于-70 以下环境。,病毒采样管:HANKS液(23ml/管),及时送检要求:同流感检测样品要求,手足口病标本采集要点,样品:咽拭子、肛拭子、粪便、疱疹液,采集时间:,发病,7,日内粪便(,510ml,或,g,,拇指大小,不用加保存液)或肛拭子;发病,3,日内咽拭子(或深咳痰)。疱疹液(,75%,酒精消毒),保存条件:,24,小时内存于,4,以下环境。超过,24,小时存于,-70,以下环境。,病毒采样管:,HANKS,液(,23ml/,管),及时送检要求:重症或暴发疫情样本,24,小时内送到实验室。,禽流感外环境标本采集要点,样品种类:禽类笼具擦拭标本、宰杀案板擦拭标本、禽类粪便、清洗禽类的污水等,保存条件:,24,小时内存于,4,以下环境,超过,24,小时存于,-70,以下环境。,病毒采样管:,HANKS,液(,23ml/,管),伤寒副伤寒病例标本采集要点,样品:,肛拭子,、粪便、血液,采集时间:发病,23,周粪便(,510ml,或,g,,拇指大小,不用加保存液)或肛拭子;发病,12,周血液(,10ml,),保存条件:血液注入血培养瓶及时送实验室培养;肛拭子埋入,C-B,培养基中,,4,保存不超过,3,天。,及时送检要求:重症或暴发疫情样本及时送到实验室。,标本包装和运输,标本必须放在密封的带螺旋盖的、耐低温的塑料管内,直接在塑料管上用油性记号笔写明编号、种类、姓名及采样日期,再放入塑料密封袋内,每袋装一份标本,同时将标本有关信息填入标本送检单,送检单应信息完整,放入另一塑料袋内,不能与标本放置一起,专用标本运送箱,检测,PCR,快速检测,1,、,RT-PCR,2,、,QRT-PCR,血清学检测,1,、,IgM,2,、,IgG,3,、,HI,4,、中和抗体,5,、免疫荧光检测,核酸序列测定,1,代和,2,代测序,病毒培养鉴定,1,、镜检,2,、血清鉴定,3,、分子鉴定,谢 谢 观 赏,
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