原核基因的表达调控

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Contents,基因表达调控的基本概念,原核基因调控机制,乳糖操纵子,色氨酸操纵子,转录后水平上的调控,(,二） 色氨酸操纵子,（,trp operon,）,内容提要：,色氨酸操纵子的结构,色氨酸操纵子的,阻遏系统,色氨酸操纵子的弱化机制,1.,色氨酸操纵子结构（,1,）结构基因,E D,编码,5,种酶，在催化分支酸转变为,C B L-,色氨酸的过程中发挥作用,A L,转录产物是先导,mRNA,（,2,）调控元件,启动子（,P,） 操纵基因（,O,）,调控基因,结构基因 催化分枝酸转变为色氨酸 的酶,trpR,trp,trpR,和,trpABCDE,不连锁；,操纵基因在启动子内,有衰减子,(attenuator)/,弱化子,trpa,启动子和结构基因不直接相连，二者被,前导序列,(Leader),trp,L,所,隔开,（,3,）结构特点,色氨酸操纵子表达的调控,阻遏系统,粗开关,主管转录是否启动,弱化作用（,attenuation),细调开关,主管已经启动的转录是否继续下去。,2.,阻遏物对色氨酸操纵子的负调控,(1),阻遏物,(,辅阻遏蛋白）,:,同二聚体蛋白质,(2),阻遏物本身不能与操纵基因,O,结合，必须和色氨酸结合才能与,O,结合，而阻遏结构基因的表达,(3),色氨酸是一种共阻遏物,trp,操纵子的阻遏系统,低,Trp,时：,阻遏物不结合操纵基因,;,高,Trp,时：,阻遏物,+Trp,结合操纵基因,3,、,衰减作用对色氨酸操纵子的调控,高浓度色氨酸使,trp,操纵子的表达水平降低,600,倍，而阻遏作用仅使转录降低,70,倍？,阻遏物失活突变不能完全消除色氨酸对,trp,操纵子表达的影响？,（,1,）前导序列：,在,trp mRNA5,端,trpE,基因的起始密码前一个长,162bp,的,mRNA,片段。该序列中含有,4,个能以两种不同的方式进行碱基配对的片段，分别以,1,、,2,、,3,、,4,表示。,前导肽：,前导序列中，发现有起始密码子,AUG,和终止密码子,UGA。,如果翻译起始于,AUG，,应该产生一个含有14个氨基酸的多肽。,特点：前导肽中在其第10和11位上有相邻的两个色氨酸密码子。,前导序列的特点：, 某些区段富含,GC,，,GC,之间容易形成茎环二级结构，接着有,8,个,U,构成一个不依赖于,因子的终止信号；, 由,(1),和,(2),区序列构成第二个发夹结构，其中,(1),区处于,14,个氨基酸的前导肽序列中；,(2),和,(3),区互补，可以形成发夹结构，与,(3),和,(4),形成发夹结构竞争；,14,个氨基酸前导肽中有,5,个核糖体强结合位点，之后还有一个,UGA,；,前导序列中并列,2,个色氨酸密码,（,2,）衰减子,衰减子,(,attenuator,),：原核生物操纵子中能显著减弱甚至过早终止转录作用的一段核苷酸序列（,123-150,区）。,衰减子区,mRNA,通过自我配对可以形成,茎,-,环,结构，有典型的,终止子,特点。,在,trp mRNA 5,端,trpE,基因的起始密码前有一个长,162bp,的,mRNA,片段被称为,前导区,，研究发现，当,trp,mRNA,合成起始以后，除非培养基中完全没有色氨酸，转录总是在前导区,123-150,区域终止，产生一个仅有,140,个核苷酸的,RNA,分子，终止,trp,基因转录。,研究引起终止的,mRNA,碱基序列,，,发现该区,mRNA,通过自我配对可以形成,茎,-,环,结构，有典型的,终止子,特点。,123150,（,3,）衰减作用的调控机制,-,其实质是以翻译手段来控制基因的转录,在原核生物中转录和翻译是同时进行的，一旦,RNA,聚合酶刚转录出,trp mRNA,中的前导肽编码区，核糖体便立即结合上去翻译这一序列。,当培养基中色氨酸不足时，,Trp-tRNA,Trp,数目有限，核糖体在两个色氨酸密码子处,(1,区,),停顿。这时核糖体只占据,l,区，前面由,RNA,聚合酶转录所产生的,2,区和,3,区便可配对，而,4,区以单链形式存在，不能形成发夹状终止结构。,RNA,聚合酶可以越过弱化子转录至结构基因区，得到完整的,mRNA,分子。,当培养基中色氨酸浓度较高时，,Trp-tRNA,Trp,充足，核糖体能顺利翻译出整个前导肽至终止密码子,UGA,处停止。此时，核糖体占据了,l,区和,2,区,(UGA,位于,1,区和,2,区之间,),，其结果是,3,区和,4,区配对，形成转录终止子结构，于是转录在弱化子处终止。,弱化作用的特点是外部事件控制内部终止所需要的,发夹结构,的形成。另外很重要的一个方面是,转录和翻译过程是前后相连（,closely coupled,）的,。,弱化子的弱化作用与阻抑作用无关，缺失弱化子后，基础水平转录和去阻抑转录都增强。,为什么要有弱化系统？,细菌通过弱化作用弥补阻遏作用的不足，因为阻遏作用只能使,转录不起始,，对于已经起始的转录，只能通过弱化作用使之中途停下来。,为,什么要有弱化系统？,是在有大量外源色氨酸存在时，阻止非必需的先导,mRNA,的合成，它使这个系统更加经济。,阻遏作用的信号是,细胞内色氨酸的多少,；弱化作用的信号则是,细胞内载有色氨酸的,tRNA,的多少,。它通过前导肽的翻译来控制转录的进行，在细菌细胞内这两种作用相辅相成，体现着生物体内周密的调控作用。,（四）阿拉伯糖操纵子 （,arabinose operon),araB,基因、,araA,基因和,araD,形成一个基因簇，简写为,araBAD,磷酸戊糖途径,第一阶段,第二阶段,5-,磷酸木酮糖,C,5,5-,磷酸木酮糖,C,5,7-,磷酸景天糖,C,7,3-,磷酸甘油醛,C,3,4-,磷酸赤藓糖,C,4,6-,磷酸果糖,C,6,6-,磷酸果糖,C,6,3-,磷酸甘油醛,C,3,6-,磷酸葡萄糖,(C,6,),3,6-,磷酸葡萄糖酸内酯,(C,6,),3,6-,磷酸葡萄糖酸,(C,6,),3,5-,磷酸核酮糖,(C,5,),3,5-,磷酸核糖,C,5,3NADP,+,3NADP+3H,+,6-,磷酸葡萄糖脱氢酶,3NADP,+,3NADP+3H,+,6-,磷酸葡萄糖酸脱氢酶,CO,2,ara,操纵子的调控有两个特点：,第一，,araC,表达受到,AraC,的自身调控。,第二，,AraC,既是,ara,操纵子的正调节蛋白（需,cAMP-CRP,的共同参与，起始转录），又是其负调节蛋白。这种双重功能是通过,AraC,蛋白的两种异构体来实现的（,Pi,和,Pr),。,体系中葡萄糖水平较高，阿拉伯糖水平较低时：,体系中有阿拉伯糖但无葡萄糖存在时：,转录调控是基因表达最经济的调控方式，但仍需要在翻译或翻译后水平进行微调，包括：,阻断其翻译,及时去除已合成的,mRNA,使已合成的蛋白质失活,二、 转录后水平上的调控,RBS,（核糖体结合位点）,：,mRNA,链上起始密码子,AUG,上游的一段非翻译区。,RBS,的结合强度取决于,SD,序列的结构及其与起始密码子,AUG,之间的距离。,SD-,4-10,（,9,）,-,AUG,1,、,mRNA,自身结构元件对翻译起始的调控,Shine-Dalgarno sequence,(SD,序列,),RBS,是指起始密码子AUG上游的一段能被核糖体识别和结合的非翻译区，其中含有SD序列。,SD序列：原核生物mRNA翻译起点上游与核糖体小亚基上16SrRNA互补的序列。,mRNA 5,端二级结构的细微改变即可影响,30S,亚基与,mRNA,的结合，造成蛋白质合成的差异。,翻译一个顺反子需要,二级结构,的改变。,mRNA,上有多个核糖体存在时，第一个顺反子的翻译会破坏,mRNA,原有的二级结构，使核糖体能够与下一个顺反子的翻译起始区域结合。,E.coli,的,RNA,噬菌体,MS,2,，,R17,，,f2,和,Q,都非常小（直径约为,250,），是最简单的病毒。基因组长,3600,4200nt,，只含,4,个基因：,A,、,cp,、,Rep,和,Lys,。,CP,(coat protein),编码外壳蛋白 多,A,（,atachment,）编码附着蛋白 少,Rep,（,replicase,）编码复制酶 中,lys,（,lysis,） 编码裂解蛋白,mRNA,的二级结构,- Q,噬菌体,一个,RNA,噬菌体基因组进入宿主细胞后，核糖体仅附着到,cp,基因开始的核糖体结合位点上，而不附着到,A,蛋白基因或,rep,基因的开始处，因为它们的核糖体结合位点被病毒,RNA,的二级结构所保护。相比之下，,CP,蛋白的起始密码子,AUG,处被核糖体所附着，因它曝露在二级结构的未端,由于,A,和,rep,两个位点被封闭在二级结构中，首先打开的是,cp,位点。,当核糖体阅读到,cp,位点时，使形成二级结构的氢链断裂。,随着翻译的进行，将其下游的,rep,位点也冲开了。这样,rep,基因总是依赖于位于前面的,cp,位点和核糖体的结合。,虽然,rep,的核糖体结合位点每次都被,cp,基因的翻译所打开，但是,RNA,噬菌体的,cp,蛋白多肽链产生的量要比复制酶多得多，为什么？,新产生的外壳蛋白的亚基可以特异地附着到,rep,基因的核糖体结合位点，阻止了核糖体的附着。这样外壳蛋白就成了复制酶基因翻译的特异阻遏物。,在感染,10,分钟后，外壳蛋白足以阻断复制酶的进一步合成。,A,蛋白的翻译正是趁以负链为模板开始复制时，新合成的“”链在,尚未形成二级结构之前,核糖体结合到其,A,位点上，进行翻译，产生,A,蛋白。,2,、,mRNA,自身稳定性对转录水平的影响,mRNA,是否被核酸酶降解取决于它们的,二级结构,反向重复序列（,inverted repeat,，,IR,）,能够促进茎环结构的形成，防止核酸外切酶的降解作用,在,E.coli,的麦芽糖操纵子中的,malE,和,malF,基因之间存在,2,个,IR,顺序。由于在,malE 3,端有,2,个,IR,存在，可以形成茎环保护其不被外切酶所降解，从而使得,malE,的产物要比,malF,的产物的含量高,20-40,倍。若,IR,区缺失，那么,malE,产物的量就会减少到原来的,1/9,。,RNA,结合蛋白,能够促进,mRNA,的降解,静止期细菌以糖原形式储藏糖，快速生长周期则通过糖酵解途径消耗糖，这两个过程的平衡由,CsrAB,调节系统,完成。,CsrA,蛋白可激活糖酵解过程并抑制葡萄糖和糖原的合成。在糖原合成途径中，如果,CsrA,蛋白结合到,glg,基因的,mRNA,分子上，该,mRNA,分子就易于受核酸酶攻击，加速降解，作为蛋白质合成模板的功能就受到抑制。,CsrA,蛋白调控,glg mRNA,的稳定性,3.,调节蛋白的调控作用,细菌中有些,mRNA,结合蛋白,可激活靶基因的翻译，如,BidA,蛋白对转录调控蛋白,fis,mRNA,翻译的激活。,mRNA,特异性抑制蛋白,则通过与核糖体竞争性结合,mRNA,抑制翻译的起始，如核糖体蛋白。,蛋白质合成的自体调控（,autogenous regulation),操纵子的表达都受操纵子自身的一些基因产物的调控。,当一个,蛋白质调控自身的产量时,，就发生了,自体调控。,核糖体蛋白质是每个操纵子的调控蛋白质。,核糖体蛋白对自身,mRNA,翻译的抑制,rRNA,基因正常转录和翻译，产生核糖体蛋白。由于这些蛋白与,rRNA,亲和力较强，只要细胞中有足够的,rRNA,，核糖体蛋白就不会结合到自身,mRNA,上。,当细胞中缺乏足够,rRNA,时，核糖体蛋白只能结合到自身,mRNA,上，导致该,mRNA,的,RBS,位点被封闭，蛋白质合成停止。,这种机制保证了,rRNA,和核糖体蛋白在数量上的平衡。,4.,反义,RNA,的调节作用,.,反义,RNA(anti sense RNA),是与,mRNA,互补的,RNA,分子。反义,RNA,能与,mRNA,分子特异性地互补结合，从而抑制该,mRNA,的加工与翻译。,这类,RNA,称为,干扰,mRNA,的互补,RNA,，,间称,micRNA,(mRNA-interfering complementary RNA),反义,RNA,是直接将单链的,RNA,放进细胞与,mRNA,互补。,RNA,干扰,是将一段双链互补的,RNA,放进细胞，在细胞中某种蛋白质的作用下降解为单链再与,mRNA,互补，,RNA,干扰是线虫等低等生物本身具有的免疫机制，其效率比反义,RNA,高得多。,反义,RNA,的作用机制,(1),反义,RNA,直接作用于靶,mRNA,的,SD,序列和,(,或,),部分编码区，直接抑制翻译，或与靶,mRNA,结合形成双链,RNA,，从而易被,RNA,酶,降解；,(2),反义,RNA,与,mRNA,SD,序列的上游非编码区结合，引起,mRNA,构象变化，抑制翻译；,(3),反义,RNA,则直接抑制靶,mRNA,的转录。其机理为反义,RNA,和,mRNA,结合形成类似,-,不依赖性的转录终止子而在转录水平上抑制靶基因的表达。,调控,RNA,与阻遏操纵子的,蛋白质,的不同点是,RNA,没有,变构,的性质，它不受其它小分子影响而改变识别靶分子的能力。因此它的调控作用随着其产生而形成，随着酶将其降解而消失。,例子：,大肠杆菌外膜蛋白有两种，一种为,ompC,，,一种为,ompF,，,OmpC,和,OmpF,两个基因编码了,OmpC,和,OmpF,两种外膜蛋白，这两个基因并不连锁，但却受到培养基的渗透压的控制。它们的表达和渗透压改变有关。,高渗透压,时，,ompC,合成增多，,ompF,的合成受到抑制。,低渗透压,时，,ompF,合成增多，,ompC,的合成受到抑制,它们如何对渗透压的改变作出反应呢？,EnvZ,基因编码一种作为渗透压感受器的一种,受体蛋白,。当渗透压增加时，,EnvZ,激活,OmpR,的产物（一种正调节蛋白）。它可以激活,Omp,C,和调节蛋白,mic F,两个基因转录。,micF,的产物是一条长174,nt,的,RNA，,称为,micRNA（mRNA-interfering-complementary mRNA ）,即干扰,mRNA,的互补,RNA。,一般都称之为反义,RNA( antisense RNA )。,MicF RNA,可以和,OmpF mRNA,上包含核糖体结合位点的翻译起始区互补结合，形成双链区。,MicF RNA,通过和,OmpF mRNA,的结合,来作为一种调节物并阻止其翻译。,当渗透压增加时会导致,micRNA,的合成，而关闭了,OmpF mRNA,的翻译,。,micF RNA,能够与,ompF mRNA,的前导序列中的44个核苷酸（包括,SD,序列）以及编码区域（包括起始密码子,AUG）,形成杂合双链，从而抑制,ompF mRNA,的翻译。,反义,RNA,的概念可以用于研究基因的功能,反义,RNA,的合成能抑制原核基因或真核基因的靶,RNA。,人工合成的编码反义,RNA,的基因已被引入大肠杆菌中，它们可通过与,mRNA,互补阻止特异靶基因的表达。,细菌铁蛋白储存细胞中过剩的铁离子。,bfr,基因编码细菌铁蛋白，而,anti-,bfr,基因编码反义,RNA,。无论细胞中铁离子浓度高低，,bfr,基因都正常转录成,mRNA,，而,anti-,bfr,基因的转录却受感应铁离子浓度变化的,Fur,蛋白的调控。,细胞中铁离子过多时，,Fur,蛋白作为抑制因子起作用，关掉与铁摄取有关的众多操纵子，,anti-,brf,基因不表达，使,bfr,基因能正常翻译出铁蛋白，储存过剩的铁离子。,在铁离子浓度低时，,anti-,bfr,基因转录产生大量反义,RNA,，与,bfr,的,mRNA,配对，阻止细菌铁蛋白基因的翻译。,反义,RNA,对,bfr,基因翻译的抑制作用,反义,RNA,对,bfr,基因翻译的抑制作用,5,、稀有密码子对翻译的影响,在原核生物中，有时同一个操纵子中的基因其功能并不相关，那么它们的产量就不可能要求一致，但又同在一个操纵子中，如何来进行调节呢？,所谓的稀有密码子是在一般的编码中利用频率很低的密码子,。,由于,对应于稀有密码子的,tRNA,较少,，高频使用稀有密码子的基因翻译时，核糖体在,mRNA,上行进的时间延长，翻译的速度降低，从而影响蛋白合成量，尤见于调控蛋白。,6,、重叠基因对翻译的影响,重叠的密码保证了同一核糖体对两个连续基因进行翻译的机制,翻译偶联,可能是保证两个相邻的基因产物在数量上相等的重要手段。,TrpB,谷氨酸,-,异亮氨酸,-,终止,GAA,-,AUC,-,UG,A,-,UGG,-,AA,A,UG,-,GAA,甲硫氨酸,谷氨酸,trpA,trpE,苏氨酸苯丙氨酸终止,ACU - UUC - UG,A,- UGG - CU,AUG,A,UG GCU,甲硫氨酸,-,丙氨酸-,trpD,翻译终止时核糖体立即处在起始环境中，这种重叠的密码子保证了同一核糖体对两个连续基因进行翻译的机制。,E. coli,的,gal,操纵子中,E,、,T,、,K,基因中，,T,与,K,翻译应保持一致参与,gal,代谢,。而,galE,却不和,galT,偶联，由于,UDP-Gal,既可作为碳源又是合成细胞壁的原料，无外源,Gal,时,galE,表达的异构酶参与,UDPG,转变为,UDP-Gal,。,galK,起始密码子虽然与,galT,的终止密码子间隔,3,个核苷酸，,galK,的,S-D,序列却位于,galT,终止密码子之前。,当,galT,翻译终止时，核糖仍结合在,mRNA,上，,继续翻译,galK,，使,galT,和,galK,翻译保持一致。,7,、翻译的阻遏,E.coli,的,RNA,噬菌体,Q,病毒基因组只含,3,个基因：与组装和吸附相关的成熟蛋白基因,A,、外壳蛋白基因,cp,和复制酶基因,Rep,。,噬菌体,Q,感染细菌，,Q(+)RNA,进入细胞并指导合成复制酶，但是，正链上此时已经有不少核糖体，从,5,到,3,方向进行翻译，这将影响复制酶催化的,3-5,方向进行的,(-),链合成。,复制酶作为翻译阻遏物进行调节,纯化的复制酶可以和外壳蛋白的翻译起始区结合，抑制外壳蛋白的合成,8,、魔斑核苷酸水平对翻译的影响,细胞如何保证蛋白质合成的总速度与蛋白质合成机器主要成分,rRNA,的合成速率一致？,如何保证不进行蛋白质合成时没有,RNA,的合成？,严谨反应,(strigent response),当细菌在不良的营养条件下生长时，由于缺乏足够的氨基酸，蛋白质合成受到抑制，并由此影响到细胞的许多生理生化活性，代谢水平下降，生长速度变慢。细菌对于不良的营养条件所产生的这一系列的反应叫做严谨反应,。,细菌仅进行很少且有限的代谢过程以节约使用有限的资源，当营养条件得到改善时，细菌将停止这种应急调控，重新开放各代谢过程。,rRNA,和,tRNA,的合成大量减少10-20倍，部分种类的,mRNA,合成减少,蛋白质降解速度加快，核苷酸、糖和脂类的合成量下降。,氨基酸缺乏时，不负载氨基酸的,tRNA,增多，这种空载的,tRNA,仍能与核糖体,A,位结合，触发空转反应。,蛋白质合成成肽反应的终止，导致转运,AA-tRNA,所需的,GTP,冗余，大量,GTP,被用于合成魔斑核苷酸前体。,严紧反应的触发器是位于核糖体,A,位点中的空载,tRNA,鸟苷四磷酸,鸟苷五磷酸,魔斑,(magic spot),：,细菌在氨基酸饥饿时，出现两种特殊的核苷酸，其电泳的迁移率和一般的核酸不同，在色谱上能检测到相应的特殊斑点，称为“魔斑,”,和“魔斑,”,，即,ppGpp,和是,pppGpp,。,当细胞缺乏氨基酸时产生,ppGpp，,可在很大范围内做出如抑制核糖体和其他大分子合成的应急反应，活化某些氨基酸操纵子的转录表达，抑制与氨基酸转运无关的系统，活化蛋白水解酶等，以节省或开发能源，度过难关。,(,p)ppGpp,的作用范围十分广泛，它们不是只影响一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以它们是超级调控因子。,1,、关于管家基因叙述错误的是,(A),在生物个体的几乎各生长阶段持续表达,(B),在生物个体的几乎所有细胞中持续表达,(C),在生物个体全生命过程的几乎所有细胞中表达,(D),在生物个体的某一生长阶段持续表达,(E),在一个物种的几乎所有个体中持续表达,D,2,、一个操纵子（元）通常含有,(A),数个启动序列和一个编码基因,(B),一个启动序列和数个编码基因,(C),一个启动序列和一个编码基因,(D),两个启动序列和数个编码基因,(E),数个启动序列和数个编码基因,B,3,、下列情况不属于基因表达阶段特异性的是，一个基因在,(A),分化的骨骼肌细胞表达，在未分化的心肌细胞不表达,(B),胚胎发育过程不表达，出生后表达,(C),胚胎发育过程表达，在出生后不表达,(D),分化的骨骼肌细胞表达，在未分化的骨骼肌细胞不表达,(E),分化的骨骼肌细胞不表达，在未分化的骨骼肌细胞表达,A,4,、乳糖操纵子（元）的直接诱导剂是,(A),葡萄糖,(B),乳糖,(C) ,一半乳糖苷酶,(D),透酶,(E),异构乳糖,E,5,、,Lac,阻遏蛋白结合乳糖操纵子（元）的,(A) CAP,结合位点,(B) O,序列,(C) P,序列,(D) Z,基因,(E) I,基因,B,6,、,cAMP,与,CAP,结合、,CAP,介导正性调节发生在,(A),葡萄糖及,cAMP,浓度极高时,(B),没有葡萄糖及,cAMP,较低时,(C),没有葡萄糖及,cAMP,较高时,(D),有葡萄糖及,cAMP,较低时,(E),有葡萄糖及,CAMP,较高时,C,7,、,Lac,阻遏蛋白由,(A) Z,基因编码,(B) Y,基因编码,(C) A,基因编码,(D) I,基因编码,(E),以上都不是,D,8,、色氨酸操纵子（元）调节过程涉及,(A),转录水平调节,(B),转录延长调节,(C),转录激活调节,(D),翻译水平调节,(E),转录翻译调节,E,(A) Lac,阻遏蛋白,(B) RNA,聚合酶,(C),环一磷酸腺苷,(D) CAP-cAMP (E),异构,乳糖,9,、与,O,序列结合,10,、与,P,序列结合,11,、 与,CAP,结合,12,、与,CAP,位点结合,A,B,C,D,13,、乳糖、阿拉伯糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是,A,与启动子结合,B,与,DNA,结合影响模板活性,C,与,RNA,聚合酶结合影响其活性,D,与蛋白质结合影响该蛋白质结合,DNA,E,与操纵基因结合,D,14,、,DNA,损伤修复的,SOS,系统,A,是一种保真性很高的复制过程,BLexA,蛋白是一系列操纵子的阻遏物,CRecA,蛋白是一系列操纵子的阻遏物,D,它只能修复嘧啶二聚体,B,15,、以下关于,cAMP,对原核基因转录的调控作用的叙述错误的是,AcAMP,可与分解代谢基因活化蛋白,(CAP),结合成复合物,BcAMP-CAP,复合物结合在启动子前方,C,葡萄糖充足时，,cAMP,水平不高,D,葡萄糖和乳糖并存时，细菌优先利用乳糖,E,葡萄糖和乳糖并存时，细菌优先利用葡萄糖,D,21,、,Lac,阻遏蛋白由,_,基因编码，结合,_,序列对,Lac,操纵子（元）起阻遏作用。,22,、,Trp,操纵子的精细调节包括,_,及,_,两种机制。,I,O,阻遏机制,弱化机制,