NA的粗提取与鉴

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,知识,目标,1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。,2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。,能力目标,掌握DNA粗提取及鉴定方法，能利用DNA的性质进行实验设计和操作。,态度观念目标,通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。,1、鸡血细胞做实验材料，一是因为鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。,2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，,3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶，其作用是分解蛋白质，使提取出的DNA纯度较高,4、预冷的乙醇溶液具有以下优点：一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解，二是降低分子运动，易于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂；,5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁，破坏细胞膜，同时也能使蛋白质变性；,6、在6075度条件下加温处理，蛋白质变性，而DNA结构不会受到破坏，提取纯度较高的DNA,7、,二苯胺的沸水浴,能使DNA染成,蓝,色,根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案：,方案一：,30mL含DNA的滤液2mol/L NaCl同方向搅拌，DNA溶解加入蒸馏水DNA析出过滤得到过滤物放到2mol/LNaCl溶液中溶解DNA-NaCl溶解液,方案二：,30mL滤液嫩肉粉（木瓜蛋白酶）静置1015分钟DNA滤液,方案三：,30mL滤液6075恒温保温1015分钟过滤获得DNA滤液,两种材料的DNA粗提取与鉴定过程,以鸡血为材料,以花菜为材料,释放组织细胞中的DNA，,粗提取DNA，,将粗提取的DNA进一步纯化，,鉴定提取物是DNA,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,2mol/L,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,5、过滤取纱布上的滤物,纱布过滤,6、再次溶解DNA,2mol/LNaCl溶液,取滤物,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,7、加冷酒精使DNA析出（纯化）,冷酒精,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,DNA的鉴定,DNA的粗提取与鉴定,实验原理,DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同,DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同,DNA与二苯胺呈现蓝色反应,DNA粗提取,选择适宜材料,破碎细胞,DNA的溶解和析出,DNA的纯化,鉴定DNA,与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应,总结：,1.下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是,A氯化钠的浓度越低，对DNA的溶解度越大,B人血也可代替鸡血进行实验,C柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂,DDNA不能溶于酒精,2.在破碎鸡血细胞时，要先加入20ml的蒸馏水，其作用是,A.DNA溶解于水 B 血细胞破裂，DNA释放,C稀释血液，防止凝固 D 有利于搅拌,3.若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐，加入食盐的目的是,A.利于DNA的溶解 B.分离DNA和蛋白质,C.溶解细胞膜 D.溶解蛋白质,4.在DNA粗提取实验中，向在溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是,A有利于溶解DNA B有利于溶解杂质,C减少DNA的溶解度 D减少杂质的溶解度,