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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,实验一,PDA,斜面培养基的制备,一、实验目标:,1,、掌握,PDA,斜面培养基的制备。,2,、了解培养基的多样性。,二、仪器设备与材料,电磁炉、锅、高压灭菌锅;,葡萄糖、琼脂、马铃薯。,三、,PDA,培养基的配方,马铃薯,200,克;葡萄糖,20,克;,琼脂,1520,克;自来水,1000,毫升;,自然,PH,。,粉状,条状,三、培养基的,制作,1,、营养液制作,(,1,)准备工作,2,、称量、材料预处理,按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、挖掉芽眼后称量,100g,,,切成,1cm,见方的小块。,3,、熬煮,将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中,煮至酥而不烂。,4,、过滤、加可溶药物,用,3,层沙布过滤,取滤汁,放在电饭锅中加入糖,10g,。,5,、熬琼脂、定容,在沸腾状态下加入琼脂,10g,,直到琼脂完全溶化为止,定容至,500ml,。,6,、营养液分装,(,1,)用注射器分装(直接分装),(,2,)分装标准,:,分装量为试管长度的,1/41/5,。注意培养基不能沾污试管口。,(,3,)塞棉塞,棉塞松紧适度,,1/3,在管外,,2/3,在管内。,(,4,)扎捆,56,支试管捆在一起,棉塞上包好防水纸,直立放入高压灭菌锅中。,灭菌处理,在,1.01.5 kg/cm,2,压力下维持,20min,。,高压灭菌锅:,(,1,)手提式,(,2,)立式,(,3,)卧式,摆斜面,灭菌结束后锅盖开,1/5,的小缝,用余热烘干报纸和,棉塞,然后摆斜面。斜面长是试管总长的,1/2,。,7,、检查灭菌效果,28,培养,23,天。,
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