目的基因分离克隆

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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,一目的基因的化学合成,特点：,3,5,合成，合成长度,200bp,过程：,推出基因序列后，用,DNA,合成仪合成,作用：,合成引物,二,PCR,合成目的基因,定义：,分离纯化出的目的片段用,PCR,仪扩增,（详见主要技术）,引物设计原则,长度：,15-30bp,退火温度：,序列：,少相似，防错配,引物,3,末端：,避免为,A,（易错配）,CG,含量：,40%-60%,未知序列时：,用近缘生物对应片段参考,RT-PCR,间接合成：,以,mRNA,为模板逆转录出,cDNA,，再以,cDNA,为模板,PCR,cDNA,：,定义：,以,mRNA,为模板逆转录合成的无内含子,单链环状,DNA,特点：,无内含子、单链环状，,逆转录酶属于,DNA,聚合酶，需引物,三基因文库分离目的基因,基因组文库的建立：,cDNA,文库的建立：,四基因图位克隆,染色体步移法：,染色体登陆：,本章总结,

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