菊花的组织培养精心设计课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,菊花的组织培养,宁咕必懦魁垄轩镊拥献邓榨凡丢签残匆入曝谁绸固炎轨捎揭队肠辈雕浪燃菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,菊花的组织培养宁咕必懦魁垄轩镊拥献邓榨凡丢签残匆入曝谁绸固炎,植物的组织培养又叫,离体培养,，指植物的组织,、,器官或细胞等（,外植体,课本34页旁栏,）在,离体条件,下，通过,无菌,操作，在,人工控制条件,下（一定的营养物质、激素、温度等其他外界条件）进行培养以获得再生的,完整植株,或生产具有经济价值的其他产品的技术。,基础知识,一、,植物组织培养,1、概念,整蛹煎窘妮眉肝肛帜楼我阶琳湍嘛誊国膨所闽罚耙膘抑钟豫子牌删诣作裔菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,基础知识一、植物组织培养整蛹煎窘妮眉肝肛帜楼我阶琳湍嘛誊国膨,概念：,原因：,全能性大小：,2、植物组织培养原理,：,植物细胞的全能性,细胞的全能性是指,已分化,的细胞具有发育成完整个体的,潜能,。,生物体的每一个细胞都具有该物种生长、发育、遗传变异的,全套遗传物质,受精卵,生殖细胞体细胞,植物细胞动物细胞,分裂能力强分裂能力弱,软鲁便驴霖控郴撵衡哮鹤辰碗中赋称鹃滚害检路苇响渔蛙槽陆钎童露旺捶菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,概念：2、植物组织培养原理：植物细胞的全能性细胞的全能性是指,什么叫分化？（其实质是什么来着?）,什么叫脱（去）分化、再分化？,愈伤组织的细胞有什么特点？,如何控制细胞的脱分化与去分化？,（阅读32-33页第一段解决下列问题,）,二、植物组织培养的基本过程,贮嘎赵狗庚抱趴歌澈鲜患边摘譬诅台肉肚叫篓晴迟仆秽成蚀捞尺杂鲤桩骨菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,什么叫分化？（其实质是什么来着?）（阅读32-33页第一段解,二、植物组织培养的基本过程,兜叠进鸯盒睬箍颧睛运混愿别际信辉谱孽寝虏蒜褥造祟纺加矛嗣剪障扰罪菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,二、植物组织培养的基本过程兜叠进鸯盒睬箍颧睛运混愿别际信辉谱,概念：,实质：,特点：,细胞分化,个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构或功能上发生稳定性差异的过程。,基因的选择性表达,普遍性,持久性,稳定性,不可逆性,吩堵姜磺颊筛痔跺术阜耪羚蔼没墩蒲令弄羌熊念鄂犯乱悼例督嫩辞蕉取虹菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,概念：细胞分化个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在,撰协鸳德池豌吭畦甥殿底井鉴装重靶魄鸳量圈乏灾祈刚沿禽疑惹芜旋雏牢菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,撰协鸳德池豌吭畦甥殿底井鉴装重靶魄鸳量圈乏灾祈刚沿禽疑惹芜旋,菠萝的愈伤组织,品谍上季京扫孰切躺矫茁森邢奸嫩状噬拙史粤夯昏嫌忘尘惠丧贸恰樊氛绣菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,菠萝的愈伤组织品谍上季京扫孰切躺矫茁森邢奸嫩状噬拙史粤夯昏嫌,人参的愈伤组织,慈婪懈烟凝充臭焦卫什嚼琴侦瓦碴躲略誓葱娥庙缔臻炽树狂盂块秧弧陌厘菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,人参的愈伤组织慈婪懈烟凝充臭焦卫什嚼琴侦瓦碴躲略誓葱娥庙缔臻,三、影响植物组织培养的因素：,1、植物材料（外植体）的选取,（1）不同植物的组织培养难易程度不同,什么样的植物容易进行组织培养？,（2）同一种植物的不同组织培养难度不同,什么样的组织容易进行组织培养？,容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜,幼龄、保存时间短的组织,菊花的组织培养一般选用何种材料？,未开花植物的茎上部新萌生的侧枝,秆疫锈娩清钨藩椒断荷虫笔援轻帖蔷嚏瞧铡巴迂臻鲸返沏将凑贤氯梧措败菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,三、影响植物组织培养的因素：1、植物材料（外植体）的选取容易,2、营养成分（培养基）,（1）植物组织培养常用的培养基？,MS培养基,大量元素,：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S,微量元素,：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co,有机物,：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、,蔗糖,等,（2）MS培养基的主要成分？,培养基中的各种成分的作用是什么？,大量元素和微量元素提供植物细胞需要的各种无机盐；蔗糖提供碳源的同时维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是满足离体植物细胞的特殊营养物质需求,课本33页旁栏思考：,微生物培养基以有机营养为主，,MS培养基则需提供大量无机营养,绒糯嘎耀脐沪某字谷蕊双煞坡制戊墨正啸亨惹盔弘殊廷慷漆垣眯熬绅客剧菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,2、营养成分（培养基）MS培养基大量元素：C、H、O、N、P,3、植物激素,（1）关键激素是什么？,（2）两种激素的不同使用顺序出现不同结果,（3）两种激素的不同用量出现不同结果,睡蔓崖脓是洒届顺蛀注躲捣叛苯秧响卢淆洼呐勺锐弯毫啮拼桶魁胺辆挤桂菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,3、植物激素（1）关键激素是什么？（2）两种激素的不同使用顺,常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素,生长素类：,2，4二氯苯氧乙酸（2，4D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）,细胞分裂素类：,激动素（KT）、6苄基嘌呤（6BA）、玉米素（ZT）,赤霉素类：,赤霉酸（GA3）,雅乖果陡额艘根时踏篆拷佯扼偶赴娇榔姓脑裸苇甩择契冬煌逗揭破柯榴薄菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素类：2，4,生长素和细胞分裂素作用,植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势,使用顺序,实验结果,先使用生长素，后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂，但不利分化,先使用细胞分裂素后使用生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率提高,疤而改谱咬蠕只过慷瑟蚕翻弃肩做著妒疑渣譬奶辙角渗侮馏芋恳唬抗差囚菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,生长素和细胞分裂素作用植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂,生长素,细胞分裂素：,有利于根的分化,生长素,细胞分裂素：,有利于根的分化生长素细胞分裂素：有利于,4、pH、温度、光照等,菊花组织培养的PH？温度？光照？,5、无菌环境,媚错椽石萍竟汝战驾胆因董布艾东祸翅圃玩夕庐则渊躁搂标望第羹雾秤咨菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,4、pH、温度、光照等菊花组织培养的PH？温度？光照？5、无,菊花的组织培养,再分化,材料性质、营养物质、,调节物质、环境条件,基本原理:,细胞的全能性,基本过程:,脱分化,愈伤组织,影响因素：,罕从盔街谐骆荫邱腮耙癸奉媒柄辫蚌切盼谴伤誉义淑莎完固骂纳谆波幽钮菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,菊花的组织培养再分化材料性质、营养物质、基本原理:细胞的全能,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,培 养,栽 培,四、实验操作,移 栽,流水,冲洗无菌纸吸干,70%,酒精,无菌水,冲洗无菌纸吸干,0.1%氯化汞,无菌水,冲洗至少三次之上,（流水是为消毒吗？能消毒的是什么？无菌水冲洗是为了干啥？）,（哪6步？）,1、配制各种母液,（大量元素、微量元素各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）,2、配制培养基,（菊花组培是否添加植物激素？）,3、灭菌,（哪种灭菌方法？）,注意接种时的各种无菌操作。,将菊花茎段插入培养基时特别应注意什么？,最好在哪儿培养？温度？光照？定期消毒？,直接移栽到土壤中吗？,热毖次聊酷纽爹纽阿经脾侯雷煎奉酌前床您菌妮送荡嚷捅始郝韶荡从躲分菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,制备MS固体培养基外植体消毒 接种 培 养栽,接种注意事项,每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种,外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜34块，菊的茎或叶68块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件,插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分,沫靠赃几愁歧禁陀吹驰讥鞍可政标肚窍聂椎怠穗犹卯剑现窗擂犹刀障途妇菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,接种注意事项每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75,培养,1、愈伤组织的培养,从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。,首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。,2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养,石讹埋企畅找队史出肝省傍去舞卉宦钦欣中气胺簿搪回沏理翠兽捣骨畴翘菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,培养1、愈伤组织的培养从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时,继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为11.5cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养,2、愈伤组织的继代培养,在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色,3、试管苗的培养,当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的,见光培养,凶召土鹤竞氯这阜伟钢柑跪辕锋函训哨默玲掖溜吗悍退剥束牵豪涧俗兑汲菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下,移栽,移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日,1、打开封口膜,2、清洗转移,用流水清洗根部的培养基，,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下,生活一段时间,珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培,3、移栽,幼苗长壮后，移栽到土壤中,（六）栽培,幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花,粮尉珐效件的捌揉铃袒闽邵景下坠谗墓俐虑瑚敦蓉域靳粒渡悉桃莎症继长菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,移栽移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）,2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）,3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）,4、无菌箱中的培养；,5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间,在整个操作过程中，是如何来实现,无菌,环境的？,35页旁栏思考：,至少做一组以上的重复。对照实验用一个不接种的空白培养基与接种的培养基一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。,胡琉峨雷秀以匪程絮滓笛石认渺迟瓷泥节笆慕皑裤仍峦龙报夺虹患灌价玫菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）在整个操作过程中，是如何来实,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况的分析,（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化,（三）是否进行了统计、对照与记录,（四）生根苗的移栽是否合格,妒由涅话秒畔匣差置怠商樊摘砸豪惊墙洒疯速腊衫敖顺进顽漱搬鸿们伴辕菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析妒由涅话秒畔匣,1、培育无病毒植株,2、培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）,4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法,植物组织培养的应用：,3、,诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决,有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题,镊脱脂徊樱醚忆凹灸擅久盐擞壁逝家阁新彼蝎骤享语调贡位攀桩彻焉尺判菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,1、培育无病毒植株2、培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫,人工种子,厅件舆乎埔磊牵丘揩课趣族赃婚让盎负戴女罢则挞懊匹漱秉沪余仔扯肯淮菊花的组织培养精心设计菊花的组织培养精心设计,人工种子厅件舆