中国胃癌HER2检测指南解读

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,中国胃癌,HER2,检测指南解读（,2011,版）,概述,本指南推荐,IHC,与,FISH,和（或）,DSISH,相结合的检测策略,胃癌有必要进行准确的,HER2,检测,HER2,状态检测首先选用免疫组织化学法（,IHC,）,IHC 3+,的病例视为,HER2,阳性,IHC 2+,的病例建议进一步行原位杂交（,ISH,：,FISH,和或,DSISH,）检测，,IHC 2+/ISH+,的病例视为,HER2,阳性,IHC 1+,和,IHC 0,病例，,IHC 2+/ISH -,病例视为,HER2,阴性,胃癌,HER2,检测应在有能力的实验室进行,检测质量取决于标本的采集、处理过程、,IHC/ISH,检测方法和评判标准的执行,问题一,1.,请问您所在的医院胃癌,HER2,检测是否属于常规检测项目？,是,否,不清楚,问题二,请问您所在的医院，由谁决定是否做胃癌,HER2,免疫组化检测？,病理科,外科,肿瘤内科,消化内镜室,问题三,请您对多学科合作对胃癌,HER2,检测的重要性打分（,0-5,重要性逐渐递增），请按投票器选择,0,1,2,3,4,5,胃癌,HER2,检测,切片,脱水,包埋,固定,HER2,检测的相关流程,切片,检测,判读,标本,收取,问题四,贵单位胃癌手术标本送到病理科处理的时间？,A 30,分钟内,B 1,小时内,C 2,小时内,D 2,小时,E,不清楚,问题五,贵单位手术标本固定时间？,不固定直接取材,固定时间在,8,小时内,固定时间在,12,小时左右（过夜）,固定时间,12-24,小时,不清楚,标本类型,原发病灶的,手术切除标本,原发病灶的,胃镜活检标本,建议取,6-8,块，以获得,足够的样本组织,，,多点活检,对准确的检测有必要,切除标本离体后,20,30,分钟内,进行标记、切开、固定等初步处理后，及时送病理科,活检标本的大小,2x2x2mm,3,原发灶活检组织、手术切除组织皆有的病例，,建议使用手术切除组织进行检测,标本采集,问题六,贵单位送检标本采用何种固定液？,不用固定液，直接送病理科,10%,福尔马林固定液（蒸馏水配）,10%,福尔马林固定液（中性缓冲液配）,10%,甲醛固定液,不清楚,标本固定,采用新鲜配制,10%,中性缓冲福尔马林,作为固定液,固定液的量应为组织的,10,倍,手术切除标本的固定时间为,8,48h,(,至少,1h/mm,组织,),活检标本的固定时间,不超过,24h,(,至少,1h/mm,组织,),不宜使用其它固定液，非,10%,中性缓冲福尔马林制剂可能会妨碍,IHC,和,ISH,检测的可靠性,不宜用微波快速固定组织,规范的标本固定是,HER2,检测质量的保障；保存良好的组织形态，防止细胞内蛋白和核酸的丢失,标本准备,固定,1,小时,固定,52,小时,固定,4,小时,固定,2,周,固定时间影响,HER2,染色结果,固定,22,小时,图片由,of A Morey, St Vincents Hospital, NSW, Australia,提供,固定较差示例：乳腺癌,HER2 IHC,检测,固定较差会导致染色结果的异质性,胞质染色可能是由固定较差导致,图片由,W Hanna,提供,固定较差示例：胃癌,HER2,IHC,检测,固定不完全会导致假阳性检查结果,胞质染色可能由于使用了不恰当的固定方式,图片由,Targos Molecular Pathology.,提供,固定较差示例：,HER2 ISH,检测,图片由,Abbott/Vysis.,提供,固定不完全,-,SISH,，,“,空,核”,固定不完全导致探针信号较弱或缺失,过度染色会导致持续性自发荧光 探针信号可能较弱或缺失,HER2,检测,HER2,过表达的检测,HER2,扩增的检测,免疫组织化学染色方法（,IHC,）,自动化,原位杂交方法 （,ISH,）,FISH,Dual SISH,实验室总体要求,应当在有条件的实验室进行，拥有试验所需的仪器和设备及空间条件,实验室掌握包括标本的制备、抗体的选择、抗原修复方法及其它相关技术；探针的选择、检测预处理方法及其它相关技术,实验室经过严格的内部和外部质量控制程序验证，建立完善的,实验室标准操作流程（,SOP,）,实验室技术员具备相关资质及经过合格培训,HER2,检测,-IHC,IHC,方法,试验方法根据实验室条件可以选择手工染,色、半自动染色和全自动免疫组化染色,建议使用全自动染色方法,建议使用,我国相关部门,（,SFDA,）批准的试剂盒,自行组配和分装的抗体必须经过严格的内部和外部质,量控制程序验证，并与权威机构批准的检测试剂盒进,行比对，以保证检测结果的可靠性,IHC,抗体,结果判读和分析,普通光学显微镜,荧光显微镜,病理医生需要经过培训,IHC,评分标准和乳腺癌有所不同,样本：活检组织和切除组织有所不同,观察：高异质性需要全面观察所有肿瘤组织,沟通：结果不确定时需要与肿瘤科医生沟通,IHC,判读标准,（参照,ToGA,经验，所有图片来自,SCC,）,0,无反应或肿瘤细胞膜染色,10%,1+,10%,肿瘤细胞微弱或隐约膜染色，,细胞膜仅部分区域着色,2+,10%,肿瘤细胞弱到中度的完全或,细胞基底部和两侧边膜染色,3+,10%,肿瘤细胞完全性或基底部和,两侧边膜强染色（对,3+,的病例同时,表明百分率，注明是否有异质性）,IHC,结果判读时应注意：细胞质着色应忽略不计，正常胃黏膜上皮细胞不应着色,HER2,检测,-IHC,原位杂交检测方法（,ISH,）,荧光原位杂交（,FISH,）,双色银染原位杂交（,Dual SISH,，,DSISH,）,探针,建议使用我国相关部门（,SFDA,）批准的试剂盒,FISH,，,HER2,红色信号增多，局部呈簇状，,CEP17,信号,1-2,个，,比值,7.2,，有扩增（,100,）,FISH,，,HER2,和,CEP17,信号各,1-2,个，比值,1.65,，无扩增（,100,）,FISH,：严格按照试剂盒标准程序执行,HER2,检测,-FISH,图片来自,SCC,DSISH HER2,黑色信号扩增，呈簇状；,CEP17,红色信号,1-2,个；比值,15,，有扩增,(100),DSISH HER2,和,CEP17,信号各,1-2,个，比值,0.8,，无扩增,(100),DSISH,：实验室应先进行严格的对比试验和程序优化,严格按照所用全自动染色仪器的优化程序和,SOP,执行,HER2,检测,-DSISH,图片来自,SCC,请问贵院是否有统一的,HER2,检测病理报告格式？,是,否,问题七,检测报告内容,胃癌,HER2,IHC/ISH,检测报告,临床信息：,姓名,性别,年龄,门诊住院号,送检医师,联系方式,检测日期,年,月,日,标本信息：,病理号,/,蜡块号,标本类型： 手术切除 活检,肿瘤部位： 胃食道交界处 胃底 胃体 胃窦 幽门管 转移灶,标本固定液种类（,10,中性缓冲福尔马林）是否,标本离体至固定时间,(,如有记录,),分钟,标本固定的时间,(,如有记录,),分钟,组织学类型,/,分级,Laur,n,分型,临床分期,T N M,HER2 IHC,检测报告,检测信息：,抗体信息,(,克隆号生产商,),检测方法 手工,/,半自动 全自动 ,对照设置情况,3+ 0 ,样本量是否足够用于评估是否,具有膜着色的肿瘤细胞的百分比,%,着色的异质性有无,肿瘤细胞膜染色模式 完整 基底和侧膜（,U-shaped),两者皆有,判读结果：,0 l+ 2+ 3+ ,无法判读,结论：,阳性；不确定；阴性；无法判读,检测人员：技术员,病理医师,HER2 ISH,检测报告,检测信息：,探针信息,(,生产商,/,商品号,),检测方法,对照设置情况 阳性对照 阴性对照,样本量是否足够用于评估是否,IHC,检测结果,0 l+ 2+ 3+ ,无法判读,判读结果：,用于评估的肿瘤细胞数量,HER2,信号总数,CEPl7,信号总数,HER2,信号数平均值细胞核,CEPl7,信号数平均值细胞核,17,号染色体是否为多体是否,结论： 阳性,(,扩增,) ,阴性,(,无扩增,) ,无法判读 ,检测人员：技术员 病理医生,实验室质量控制,（,1,）,HER2,蛋白和基因扩增的检测均应在内、外部质量控制良好的病理实验室进行,检测必须严格按照指南要求执行，以保证结果可靠,不具备,HER2,检测条件的单位应按照指南要求，妥善处理和准备好标本，提供给有质量保证的病理实验室进行检测,实验室质量控制,（,2,）,实验室内、外部质量控制和,SOP,的主要要求如下,准备开展,GC HER2,检测的实验室应选择,1,2,家已较好开展该项检测的实验进行,25,100,例标本的对比验证,或通过参加有关外部质量控制活动来实现，外部质控阳性和阴性结果的一致性应达到,90,以上，每年应进行,1,2,次,从事,GC HER2,检测的实验室技术人员和病理医师应进行必要的培训和资格考核,实验室质量控制,（,3,）,实验室应建立完善的,SOP,，并做好每次检测情况的记录和存档工作,任何改变操作程序和试剂的行为均应重新进行严格的验证,内部质控应包括同一组织不同批次染色结果的重复性分析，每次染色阳性、阴性对照的设置，如有可能还应没置包括低表达低扩增对照,检测相关的仪器和设备需定期维护、校验,类似乳腺癌,亮视野检测方法有优势,Her2,检测流程,样本收集,镜下观察,异质性高,需要观察,整张,切片,检测所需时间,胃癌进展快，宜及时获得结果,多学科,参与,结果判读,与乳腺癌有所不同,胃癌,HER2,检测： 基本过程和特殊性,数量、质量合适的含有肿瘤组织的,活检,标本,具有代表性的,手术切除,标本,多学科协作共同努力 医生和技术员,知识更新和观念改变 患者和医生,多学科协作检测,HER2,：,临床医生之角色,采样 手术和胃镜活检（,6-8,块组织）,固定,10%,中性缓冲福尔马林,样本送检（离体时间）,30,分钟,结果解读,HER2 +,IHC 0 1+ 2+ 3+,HER2,阳性,多学科协作检测,HER2,：病理医生之角色,Wolff AC,et al.,J Clin Oncol,2007;25:118145.,检测结果分析,检查备检标本是否可用,正确设立内部对照组,依照国际评分系统进行评分,检测结果报告,使用标准化,HER2,检测结果报告表,报告内容应包括标本取样，固定，检测方法及评分系统,多学科检测治疗小组,(,MDT,),会议,学科协作检测,HER2,：技术员之角色,处理,:,避免影响检测结果之因素,-,最佳固定时间及固定方法,-,石蜡包埋,-,组织切片的合理时间,(,最好,于,HER2,检测前切片,),-,标本脱蜡,方法,:,使用标准化,/,经验证之检测步骤,-,IHC,-,ISH,FISH,Dual,SISH,Wolff AC,et al.,J Clin Oncol,2007;25:118145.,患者,病理医生,技术人员,肿瘤科,/,内科医生,病理医生,外科,/,内窥镜,医生,获取肿瘤组织并按照规范进行固定后转送病理科,标本处理和制片,病理诊断,选取有代表性的组织,按照规范检测,结果判读和评分,签发报告,与临床医生沟通 并作必要的解释,评估检测需求、提出手术或活检以获得标本,成功且及时的,HER2,检测需要多学科合作,建议,提高检测率 离体时间和固定时间,自动化检测,IHC,区域性检测中心,FISH/DSISH,培训,临床研究,