资源描述
,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,氨基酸类药物的生产,组员:刘盈 张艺 王鹏,1,项目内容,一 氨基酸是什么,二 氨基酸的作用,三,氨基酸,类药物的功效,四 氨基酸的提取和含量测定,五 实验分析与讨论,六 心得体会,2,氨基酸是什么,含有氨基和羧基的一类,有机化合物,的通称。生物功能,大分子,蛋白质的基本组成单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有一个碱性氨基和一个,酸性羧基,的有机化合物。氨基连在,-,碳上的为,-,氨基酸,。组成蛋白质的氨基酸均为,-,氨基酸。,3,氨基酸的作用,1,、,蛋,白质在机体内的消化和吸收是通过氨基酸来完成的:作为机体内第一营养要素的蛋白质,它在食物营养中的作用是显而易见的,但它在人体内并不能直接被利用,而是通过变成氨基酸小分子后被利用的。,2,、起氮平衡作用:当每日膳食中蛋白质的质和量适宜时,摄入的氮量由粪、尿和,皮肤,排出的氮量相等,称之为氮的总平衡。实际上是蛋白质和氨基酸之间不断合成与分解之间的平衡。正常人每日食进的蛋白质应保持在一定范围内,突然增减食入量时,机体尚能调节蛋白质的代谢量维持氮平衡。食入过量蛋白质,超出机体调节能力,平衡机制就会被破坏。完全不吃蛋白质,体内组织蛋白依然分解,持续出现负氮平衡,如不及时采取措施纠正,终将导致抗体死亡。,4,3,、转变为糖或脂肪:氨基酸分解代谢所产生的,a-,酮 酸,随着不同特性,循糖或脂的代谢途径进行代谢。,a-,酮酸可再合成新的氨基酸,或转变为糖或脂肪,或进入三羧循环氧化分解成,CO2,和,H2O,,并放出能量。,4,、参与构成酶、激素、部分,维生素,:酶的化学本质是蛋白质,(,氨基酸分子构成,),,如淀粉酶、胃蛋白酶、胆碱脂酶、碳酸酐酶、转氨酶等。含氮激素的成分是蛋白质或其衍生物,如生长激素、促甲状腺激素、肾上腺素、胰岛素、促肠液激素等。有的维生素是由氨基酸转变或与蛋白质结合存在。酶、激素、维生素在调节生理机能、催化代谢过程中起着十分重要的作用。,5,、人体必需氨基酸的需要量:成人必需氨基酸的需要量约为蛋白质需要量的,20%,,,37%,5,氨基酸,类药物的功效,1,、延年益寿,老年人如果体内缺乏,蛋,白质分解较多而合成减慢。因此一般来说,老年人比青壮年需要蛋白质数量多,而且对蛋氨酸、赖氨酸的需求量也高于青壮年。,60,岁以上老人每天应摄入,70,克左右的蛋白质,而且要求蛋白质所含必需氨基酸种类齐全且配比适当的,这样优质蛋白,延年益寿。,2,、氨基酸在医药上主要用来制备复方氨基酸输液,也用作治疗药物和用于合成多肽药物。目前用作药物的氨基酸有一百几十种,其中包括构成蛋白质的氨基酸有,20,种和构成非蛋白质的氨基酸有,100,多种。,6,由多种氨基酸组成的复方制剂在现代静脉营养输液以及“要素,饮食,”疗法中占有非常重要的地位,对维持危重病人的营养,抢救患者生命起积极作用,成为现代医疗中不可少的医药品种之一。,谷氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、,L-,多巴等氨基酸单独作用治疗一些疾病,主要用于治疗肝病疾病、消化道疾病、脑病、心血管病、呼吸道疾病以及用于提高肌肉活力、儿科营养和解毒等。此外氨基酸衍生物在癌症治疗上出现了希望。,7,氨基酸的提取和含量测定,1,水解:称取,10g,人发和,180ml30%,盐酸于,1000ml,的三口烧瓶中,左口装温度计套和温度计,右口装橡皮塞,中口安装回流装置,在球型冷凝管上方用尾接管、橡皮管和漏斗将,HCl,导入水中,打开电热套加热,从沸腾开始计时,在,110,118,之间回流,6,小时。在布氏漏斗内垫上三层滤纸,热抽滤得滤液,倒回三口烧瓶中,留次日使用。,2,中和:将装有滤液的三口烧瓶放在盛水的小盆内,冷却,保持温度在,40,50,,中口插入搅拌棒,左口放温度计套和温度计,右口放盛有,30%,氢氧化钠的滴液漏斗,开启搅拌器,滴加氢氧化钠,并不断用温度计蘸取溶液在广泛试纸上测定,pH,,当,pH,为,3,时,减慢氢氧化钠的滴加速度,并改用精密试纸,使,pH,为,4.8,5.1,之间,继续搅拌,15,分钟,使,pH,维持在,4.8,5.1,倒入烧杯中静置,留次日使用。,3,脱色(精制)将昨日溶液抽滤得粗品,称量后放入三口烧瓶内,加入,140ml15%,盐酸,粗品重量,4,5%,的活性炭,,0.1%EDTA,,煮沸回流半小时,溶液抽滤后,倒回三口烧瓶,冷却,保持温度在,40,50,,用,15%,氢氧化钠中和,使,pH,维持在,4.8,5.1,之间,静置一夜后将结晶混合液抽滤,并用水冲洗漏斗壁,烘干得成品。,8,大家有疑问的,可以询问和交流,可以互相讨论下,但要小声点,9,3.,超声波提取法,称取,3,份试样,(,精确至,0,001 g),于小烧杯中,,每份,0,1 g,,均加入,6 molL-1,盐酸溶液,10 mL,,置,于超声波清洗器中分别超声提取,30,、,60,、,90 min,,取,下,用氢氧化钠溶液调节,pH,值,7,8,,用,0,45“m,水相滤膜过滤,待测。,10,(一)样品,1,氨基酸标准溶液:,(,1,),0.01mol/L,丙氨酸:称取丙氨酸,8.9mg,溶于,90%,异丙醇溶液至,10ml,。,(,2,),0.01mol/L,精氨酸:称取精氨酸,17.4mg,溶于,90%,异丙醇溶液至,10ml,。,(,3,),0.01mol/L,甘氨酸:称取甘氨酸,7.5mg,溶于,90%,异丙醇溶液至,10ml,。,2,混合氨基酸溶液:将,0.01mol/L,丙氨酸、精氨酸、甘氨酸按等体积制成混合溶液,11,(二)试剂,1,硅胶,G(C.P.),2,0.5%,羧甲基纤维素钠(,CMCNa,):取羧甲基纤维素钠,5g,溶于,1000ml,蒸馏水中,煮沸,静置冷却,弃沉淀,取上清备用。,3,展开溶剂:按,80:10:10,比例(,V/V,)混合正丁醇、冰醋酸及蒸馏水,临用前配制。,4,0.1%,茚三酮溶液:取茚三酮(,A.R.,),0.1g,溶于无水丙酮(,A.R.,)至,100ml,。,5,展层,-,显色剂:按照,10:1,比例(,V/V,)混匀展开剂和,0.1%,茚三酮溶液。,12,(三)仪器及器材,1,层析板(,815cm,);,2,小烧杯;,3,量筒(,100mL,);,4,小尺子;,5,吹风机;,6,毛细玻璃管;,7,层析缸;,8,烘箱。,13,(四)操作步骤,1,制板,(,1,)调浆:称取硅胶,3g,,加,0.5%,的羧甲基纤维素钠,8ml,,调成均匀的糊状。,(,2,)涂布:取洁净的干燥玻璃板,a,均匀涂层,b,。,(,3,)干燥:将玻璃板水平放置,室温下放置,0.5h,,自然凉干。(,4,)活化:,70c,烘干,60,分钟。,a.,玻璃板要清洁平整,无油污。,b.,粘在玻璃板侧面边上的硅胶粉应去掉,否则在层析时会有较强的边缘效应。,c.,应逐步加温,温度过高易导致涂层裂开。,14,2,点样,(,1,)标记:用铅笔距底边,2cm,水平线上均匀确定,4,个点并做好标记。每个样品间相距,1cm,。,(,2,)点样:用毛细管分别吸取丙氨酸、精氨酸、甘氨酸及混合氨基酸溶液,轻轻接触薄层表面点样。加样原点扩散直径不超过,2mm,。点样后用电吹风,a,轻轻吹干,必要时重复加样,b,。,a.,用冷风吹干,避免破坏氨基酸。最好从玻板背面吹。,b.,重复点样时必须等第一点样品干后再点第二点。,15,3,层析,将薄层板点样端浸入展层,-,显色剂,展层,-,显色剂液面应低于点样线,a,。盖好层析缸盖,b,,上行展层。当展层剂前沿离薄板顶端,2cm,时,停止展层,取出薄板,用铅笔描出溶剂前沿界线。,a.,样点不能浸入到溶液中。,b.,将层析缸盖涂上凡士林,防止层析液挥发。,4,显色用热风吹干或在,90,下烘干,30min,,即可显出各层斑点。,16,实验分析与讨论,问题解析,(,1,)斑点拖尾,不集中硅胶颗粒太小;层析液因为挥发浓度降低。,(,2,)斑点未显色茚三酮因存放时间长失效;显色时未用热风吹干,或者烤箱温度不足。,17,心得体会,1、经过本次项目的学习,我们对核酸类药物有了进一步的认识和了解,加深了对生物药品的印象。,2、本次项目中的有关实验中,我们积极配合,共同完成了实验目标。但其中也存在不少问题:,自主能动性还是有待提高;,很少主动思考问;,实验操作不够严谨,以致出现问题很难查找主要原因。,18,
展开阅读全文