一食品微生物检验的一般步骤

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,一食品微生物检验的一般步骤,一食品微生物检验的一般步骤,第1页,一,.,食品微生物检验普通步骤,样品采集,样品处理,样品保留,选择参考菌群,检验前准备,菌落总数,大肠菌群,致病菌,分离培养,分离培养,增菌,纯化,染色镜检,生化试验,血清学试验,动物试验,结果汇报,一食品微生物检验的一般步骤,第2页,二,.,检验前准备,准备好所需各种仪器。,按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌，冷却后送无菌室备用。,准备好所用各种试剂，做好普通营养琼脂或其它选择必培养基。,做好无菌室或超净工作台灭菌工作，提前,1h,灭菌,3060min.,工作衣、鞋、帽、等灭菌后备用。,工作人员进入无菌室后，试验没有完成之前不得随便出入无菌室。,一食品微生物检验的一般步骤,第3页,三,.,样品采集,一食品微生物检验的一般步骤,第4页,（一）采样目标和意义,便于食品卫生质量监督管理,判别食品中是否存在有毒有害物质。,为新产品、新资源利用、新食品化工产品、新工艺投产前进行卫生判定。,一食品微生物检验的一般步骤,第5页,（二）样品种类,大样,，就是一整批；,中样,，是从样品中各个别取得混合样品，普通为,200g,；,小样,，也称检样，做分析用，普通为,25g,。,一食品微生物检验的一般步骤,第6页,（三）采样步骤,采样前调查现场观察确定采样方案采样 样品封存 开具采样证实,一食品微生物检验的一般步骤,第7页,（四）采样要求,1,、严格恪守样品采集操作规程。,2,、所采样品必须含有代表性。,3,、采样操作要预防污染，预防变质、损坏、丢失。,4,、不得加入防腐剂、固定剂等。,5,、样品采集和现场测定必须有二人以上参加。,一食品微生物检验的一般步骤,第8页,（五）食品微生物检验采样方案,一食品微生物检验的一般步骤,第9页,1,、食品卫生学微生物检验取样方案,检验目标：检验食品微生物卫生指标是否合格。,一食品微生物检验的一般步骤,第10页,取样方案有：,ICMSF,取样方案；,美国,FDA,取样方案；,世界粮农组织（,FAO,）取样方案；,我国食品取样方案。,一食品微生物检验的一般步骤,第11页,2,、食物中毒微生物检验取样,检验目标：查找食物中有何病原菌。,一食品微生物检验的一般步骤,第12页,3,、人畜共患病病原菌检验取样,检验目标：判定畜禽及其产品是否带有些人兽共患病原菌。,一食品微生物检验的一般步骤,第13页,（六）食品微生物检验采样方法,采样标准：,上能采取完整包装样品就不拆开取样，必须拆开包装取样应按无菌操作进行取样,.,一食品微生物检验的一般步骤,第14页,1,、液体样品采样方法,充分混匀后，无菌操作打开包装，用,100mL,无菌注射器抽取,注入无菌盛样容器,.,一食品微生物检验的一般步骤,第15页,2,、半固体样品采样方法,无菌操作打开包装，用无菌勺子从几个部位挖取样品，放入无菌容器。,一食品微生物检验的一般步骤,第16页,3,、固体样品采样方法,大块整体食品用无菌刀具和镊子从不一样部位割取，并注意其代表性；,小块大包装食品应从不一样部位小块上切取样品，放入无菌容器。,若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质情况，应从深部取样。,一食品微生物检验的一般步骤,第17页,4,、冷冻食品采样方法,大包装小块冷冻食品按小块个体采取；,大块冷冻食品可用无菌刀从不一样部位削取或用无菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。,若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质情况，应从深部取样。,一食品微生物检验的一般步骤,第18页,5,、生产工序监测采样,车间用水：从车间各龙头采样；,车间台面、用具、及加工售货员手卫生监测：用,5cm,2,孔无菌采样板和,5,支无菌棉签擦拭,25cm,2,面积，擦拭后马上用无菌剪刀将棉签头剪入无菌容器中。,一食品微生物检验的一般步骤,第19页,车间空气采样：将,5,个直径,90mm,普通琼脂平板分别置于车间四角和中部，打开平皿盖,5min,，然后盖盖送检。,平皿,一食品微生物检验的一般步骤,第20页,（七）采样标签填写,标签内容主要：,编号、样品名称、生产单位、生产日期、产品批号、产品数量、存放条件、采样时间、采样人姓名，现场情况。,一食品微生物检验的一般步骤,第21页,采样单,样品编号：产品名称（商品名）,_,规格型号,_,注册商标,_,生产厂家,_,通讯地址,_,邮政编码,受检地点,_,通讯地址,_,邮政编码,采样地点,_,采样日期,_,采样基数,_,生产日期,_,批号,_,产品依据标准,_,有效成份及含量,_,检验目地,_,检测项目,_,采样人仔细阅读以下句子，然后签字我认真负责地填写了该样品采样单，认可以上填写正当性，被该采亲单位所证实样品系按照采样方法取得，该样品含有代表性、真实性和公正性。,代表单位（章）代表单位（章）,签字 签字,日期年月日 日期 年月日,备注,一食品微生物检验的一般步骤,第22页,四,.,样品送检要求,1,、要快速运输：不要超出,3,小时；,2,、若路途遥远，可在,15,低温下运输；,3,、要注意防污染、防散漏、防变质；,4,、要填写检验申请单。,一食品微生物检验的一般步骤,第23页,五,.,样品处理方法,（一）液体样品,（二）固体样品,（三）冷冻样品,一食品微生物检验的一般步骤,第24页,(,一,),液体样品处理,瓶装液体样品处理,盒装或软塑料包装样品处理,一食品微生物检验的一般步骤,第25页,1.,瓶装液体样品处理,用点燃酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开；含有二氧化碳样品可倒入,500mL,磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样,25mL,检验。,一食品微生物检验的一般步骤,第26页,2.,盒装或软塑料包装样品处理,将其开口处用,75%,酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液纱布在剪开个别，直接吸收样品,25mL,，或倾入另一灭菌容器中再取样,25mL,检验。,一食品微生物检验的一般步骤,第27页,（二）固体样品处理,捣碎均质法,剪碎振摇法,研磨法,整粒振摇法,胃蠕动均质法,一食品微生物检验的一般步骤,第28页,1.,捣碎均质法,将中样,(100g),剪碎或搅拌混匀，从中取,25g,放入带,225mL,稀释液无菌均质杯中，,800010000r/min,均质,12min,即可。,一食品微生物检验的一般步骤,第29页,2.,剪碎振摇法,将中样,(100g),剪碎或搅拌混匀，从中取,25g,检样深入剪碎，放入带,225mL,稀释液和直径,5mm,左右玻璃珠稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇,50,次，振幅要大于,40cm,。,一食品微生物检验的一般步骤,第30页,3.,研磨法,将中样,(100g),剪碎或搅拌混匀，从中取,25g,检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有,225mL,无菌稀释液稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。,一食品微生物检验的一般步骤,第31页,4.,整粒振摇法,直接称取,25,g,整粒样品置于,带有,225mL,稀释液和直径,5mm,左右玻璃珠稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇,50,次，振幅要大于,40cm,。,一食品微生物检验的一般步骤,第32页,（三）冷冻样品,冷冻样品，先将中样在,04,下解冻，时间不能超出,18h,，或在,45,下解冻，时间不能超出,15min,。再取检样,25g,做稀释处理。,一食品微生物检验的一般步骤,第33页,六,.,致病菌检验参考菌群选择,一食品微生物检验的一般步骤,第34页,一食品微生物检验的一般步骤,第35页,一食品微生物检验的一般步骤,第36页,蛋及蛋制品：沙门氏菌、葡萄球菌、变形杆菌等,水产品海产品：链球菌、副溶血性弧菌,乳制品：沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌、链球菌、蜡样芽胞杆菌,畜禽肉类：肠道致病菌和致病性球菌,米面类：蜡样芽胞杆菌、变形杆菌、酵母霉菌等,罐头：耐热性芽胞杆菌、嗜热脂肪杆菌、大芽胞杆菌、凝值芽胞杆菌,一食品微生物检验的一般步骤,第37页,七,.,样品检验,（一）、收样：,1,、收到样品后逐一查对验收，登记编号；,如,年收到,50,号样品，编号可写成：,0050,2,、马上将样品放在冰箱或冰盒中，并主动做好准备工作。,一食品微生物检验的一般步骤,第38页,（二）、检验,1,、选择检验方法：,我国：国家标准,国外：,国际标准：如,FAO,标准、,WHO,标准；,每个进口国标准：如美国,FDA,标准、日本厚生省标准、欧共体标准等,一食品微生物检验的一般步骤,第39页,2,、检验要求,（,1,）按照标准操作规程进行检验操作，边工作边做原始统计。,（,2,）检测结束，连同结果一起交同条线技术人员复核。复核过程中发觉错误，复核 人应通知检测人更正，然后重新复核。,（,3,）检测人和复核人在原始统计上署名，并编写“检测汇报底稿”。,（,4,）全部检测项目完成后，检测人员将原始统计、样品卡、汇报书底稿交科主任作全方面校核。,一食品微生物检验的一般步骤,第40页,3,、样品保留,（,1,）阴性样品：在发出汇报可及时处理；,（,2,）阳性样品：在发出汇报以后,3,天才能处理样品；,（,3,）进口食品阳性样品：要保留,6,个月才能处理。,（,4,）微生物检验不进行复检,一食品微生物检验的一般步骤,第41页,八、检验结果汇报,经审核后汇报底稿、样品卡、原始统计，上交打印正式汇报二份。,将汇报正本交审核人及同意人署名，并在汇报书上盖上“检验专用章”,CMA,章和中心公章后对外发文。,收文科室或收文人要在检测申请书上收件人一栏内签字，以示收到该汇报正式文本。,在汇报正式文本发出前，任何相关检测数据、结果、原始统计都不得外传，不然作为违反保密制度论处。,一食品微生物检验的一般步骤,第42页,