超高效液相色谱课件

,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,超高效液相色谱及其应用,环境科学班第五组,演讲人：孙硕,ppt制作：宋云龙,材料收集：,任苏瑜,石君,超高效液相色谱及其应用环境科学班第五组演讲人：孙硕ppt制作,1,随着科学技术的进步，对液相色谱技术的要求也不断提高，单从技术角度的改进已经不行。这就需要同时从科学与技术的角度出发，或者说从理论高度对液相色谱重新认识。因此，UPLC（超高效液相色谱）概念得以提出，将HPLC的极限作为自己的起点。,前言,随着科学技术的进步，对液相色谱技术的要求也不断提高，单从技术,2,概念,超高效液相色谱技术,（ultra performance liquid chcromatography，简称UPLC）是一种综合了小颗粒填料,、,非常低系统体积(死体积)及快速检测手段等全新的检测技术。在全面提升HPLC的速度、灵敏度及分离度的同时，保留其原有的实用性及原理。,概念超高效液相色谱技术（ultra performance,3,构造,构造,4,范德米特(Van Deemeter)方程,HETP=AdP+Bv+CdP2,HETP,：理论塔板高度,A,：涡流扩散系数,dP,：填料粒径,B,：分子径向扩散系数,C,：传质因子为流动相线速度,由该方程可得出结论：,颗粒度越小柱效越高；每个颗粒度尺寸有自己的最佳柱效的流速；更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速(线速度)方向移动，而且有更宽的线速度范围所以降低颗粒度不但提高柱效，同时也提高速度。,原理,HETP=AdP+Bv+CdP2HETP：理论塔板高度dP,5,优点,超高分离度,基于17 m小颗粒技术的UPLC与人们熟知的高效液相色谱技术，具有相同的分离原理。不同的是，UPLC不仅比HPLC具有更高的分离能力，而且结束了人们多年不得不在速度和分度之间取舍的历史。使用UPLC可以在很宽的线速度、流速和反压下进行高效的分离工作，并获得优异的结果。,优点超高分离度基于17 m小颗粒技术的UPLC与人们熟知的,6,由右图可见：UPLCTM可以大大提高分离度，同时色谱峰强度也得到了提高。,由右图可见：UPLCTM可以大大提高分离度，同时色谱峰强度也,7,超高速度,新一代UPLC系统用1.7 m颗粒，柱长可以比用5 m颗粒时缩短3倍而保持柱效不变，而且使分离在高3倍的流速下进行，结果使分离过程快了9倍而分离度保持不变。,较小的颗粒能提高分析速度而不降低分离度,；且,Van Deemter理论表明柱长缩短会加快分离速度，而颗粒度越小，最佳流速也越大，进而可以通过提高流速来进一步加快分离速度。,超高速度新一代UPLC系统用1.7 m颗粒，柱长可以比用5,8,图4:UPLC与HPLC：速度比较,图4:UPLC与HPLC：速度比较,9,图5：UPLC美国药典有关物质分析实例,原有HPLC分析需要4个不同的方法、三根不同的色谱柱，至少需要65分钟才能完成；UPLC使用了一根色谱柱、一种简单方法，在1分钟内即可完成。,图5：UPLC美国药典有关物质分析实例原有HPLC分析需要,10,超高灵敏度,由于待测有机物的浓度越来越低，使得灵敏度成为很多分析对象的关键。,UPLC使用小颗粒技术可以得到更高的柱效从而改善了分离度、更窄的色谱宽度，即更高的灵敏度。,超高灵敏度由于待测有机物的浓度越来越低，使得灵敏度成为很多分,11,图6:HPLC到UPLCTM：灵敏度的改善无需折衷,图6:HPLC到UPLCTM：灵敏度的改善无需折衷,12,方法转换简便,易与质谱串联,.,方法转换简便易与质谱串联.,13,应用,食品安全领域,1.1农药残留物检测领域,农药残留分析属于微量至超微量分析范畴，要求检测仪器有非常高的灵敏度；同时，由于其具有种类繁多、结构复杂等特点，对检测方法的通量和速度也提出了更高的要求。在农残分析检测中，,UPLC,与传统的,HPLC,相比较，不仅在分离度、灵敏度和分析速度上得到较大提高，而且很大程度上减少了样品和试剂的消耗量，具有很好的应用前景。,1.2食品添加剂分析检测中的应用,随着食品品种和添加剂种类的增加、多种添加剂的复配使用，迫切需要建立多种添加剂同时快速检测的方法。目前，,HPLC,技术是食品添加剂检测的最常用方法；而较这一传统方法而言，在技术性能上拥有优势的,UPLC,得到了更突出的应用。,应用食品安全领域1.1农药残留物检测领域1.2食品添加剂分析,14,药物开发领域,2.1化学药品分析,在针对药物合成的分析方面，,UPLC,可实现随时快速准确检测合成过程中的中间体、副产物或降解产物等。,2.2,中药药品分析,Waters,公司合成了,1,7 p,m,颗粒度的,Acquity UPLC,填料，减少了固定相表面残余硅羟基，因而在分析生物碱类样品时，流动相中只加入酸抑制剂，不需添加有机胺即可使其获得良好的分离。由于在流动相中避免了有机胺及盐的加入，可以在一定程度上降低质谱噪音、减少对质谱的污染，且使用的流速适合与质谱直接联用，无需分流，可以进一步提高检测灵敏度，为中药分析提供良好的平台。,药物开发领域在针对药物合成的分析方面，UPLC可实现随时快速,15,其他领域,农药残留检测,水质和环境监测,化妆品质量控制,.,其他领域农药残留检测水质和环境监测化妆品质量控制.,16,谢谢观看,谢谢观看,17,