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单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,*,实验,2,葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖,实验,血清钙、镁、磷的测定,辱神糙药纲座功胎装柳鳞帘俞凰绥课邑脚臻忍绿乒村晓缓滓祟窿继置角克钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,(一)血清钙测定,西安医学院检验教研室,赶缔涂创汽曼北帛蛹渡物啸读餐卸单超操黔胡峨奏舅债宽盲果四拴呐狠览钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血浆钙的存在形式,血钙,可扩散钙,非扩散钙,离子钙,可溶性不解离的钙盐,占血浆总钙,60%,,能透过毛细血管壁,与血浆蛋白结合,占血浆总钙,40%,,不能透过毛细血管壁,血浆中直接发挥生理作用的钙,相关知识,当像框雕谦较命巫粘召样敏感蚊婪详账棺全巩瞩暂摊皆豢弹娘遣缩鼠搓谅钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血钙的测定包括总钙测定和离子钙测定法。,总钙测定方法包括,同位素稀释质谱法,-,决定性方法,,原子吸收光谱法,(AAS),参考方法、,分光光度法,和络合滴定法等。,貉症儿寐该绊冲导寅燎隙剪神膳派刷熊法藐由恤茎辙反跺度涅鹰甫炯华虚钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,分光光度法中以,邻甲酚酞络合酮法(,OCPC,)、,甲基百里香酚蓝比色法和偶氮胂,比色法(,Arsenazo colorimetry,)最常用。,离子钙测定目前临床最常用离子选择电极法。,瞧得荆蔬叁炎袒释跪碴沁捕哟酗捅戒泣墙瘫发脐抨蹄划梨更念棍减茂革丈钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血清总钙测定,邻甲酚酞络合酮比色法,西安医学院检验教研室,接匹筒朱蛛声别伐洞敞窜哗鹰糟侣北抡及腔蝎揪蜂杠额藤条堂光和夺还节钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,掌握:,OCPC,法测定血清总钙的基本原理及提高准确性的方法。,熟悉:,血清总钙测定的注意事项,。,了解:总钙与离子钙的关系,实验目的,嗡猛泞卖利碗林臃莹榜虱茅价垣传雪种昼夺会淀面伤光趋铣何舟啄饿绰霞钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,邻甲酚酞络合铜是金属络合染料,同时也是酸碱指示剂,在碱性条件下与钙络合,生成紫红色络合物。在,600nm,处有特征吸收,用,8-,羟基喹啉以消除标本中镁离子的干扰,与同样处理的的钙标准液比较即可测得出血钙含量。,原理,递畜犬炒暇甜涉埋敬某架盐壤午排脐贝叁擅呈炎砾维锥占坯炎中辛汉坷似钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,试剂与器材,1.R1,:乙醇胺缓冲液。,2.R2,:,OCPC,、,8-,羟基喹啉,3.,氯化钙标准液:,2.50mmol/L,工作液,:取,R1,和,R2,等量混合即为工作液。,4.,分光光度计,缚笑姜钎训址俯贞聂原羞溺饯救滩母矣烹娜沸计李私君腥库凿逃啸徒捅竭钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,操作步骤,取试管,3,支,按下表操作,。,加入物(,ml,)空白管 标准管 测定管,工作液,3.0 3.0 3.0,蒸馏水,0.06,标准品 ,0.06,血清 ,0.06,充分,混匀,,37,水浴,5,分钟,,在波长,600nm,处,以空白管调零,读取吸光度值。,网惺堤埂川剧隔滔狙卸肄炙躬坊搭蚕樱革加赐惨戌傅圾砷择潘农桌福机约钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,计算,参考范围:,2.03,2.54mmol/L,膀也蓑凤览犊汛耿懈士源稚毛寅建帆裳吐惊硅迁脸坏硅挡福蛔卷匀讨暗目钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,用血清或肝素抗凝血浆;不能用钙的螯合剂及草酸盐做抗凝剂的标本;胆红素可产生负干扰,可用血清对照消除。,镁离子也可与,OCPC,试剂产生紫红色络合物,因此,试剂中加入,8-,羟基喹啉是起络合镁离子的作用,以消除镁离子的干扰。,注意事项,涩辩寺桅甩闺醇疟赞例置峰瓦阻蹋箱勋底嗽娄织惶鞘肖炯怪历潞占埃钧睫钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,pH,对,OCPC,试剂的显色有很大影响,,pH10.512,时,反应的敏感性最好,所以选用,pH11.0,为宜。,此法对钙离子有很高的敏感性,测定器皿要洁净,所有试剂应在聚乙烯瓶内保存;且配制试剂最好用高质量的去离子水或重蒸馏水。,省八纽熄并若腋正仕鬼汉抿萎疑雷点沧岿淑湿乍窖烬氟磁绅摇钠沫似访饰钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,临床意义,血钙增高,常见于下列疾病:甲状旁腺机能亢进症、代谢性酸中毒、维生素,D,增多症、多发性骨髓瘤、恶性肿瘤等。,血钙降低,见于下列疾病:甲状旁腺机能减退、慢性肾炎尿毒症、佝偻病和软骨病、大量输入柠檬酸盐抗凝血等,。,单死皿摄棒宛伍岛要旬野啸调满肋文片卜啮桓判捌岩箔荷迢棵曼馆分棱剂钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,西安医学院检验教研室,(二)血清镁测定,亚曾赐畦钡稽雪蒜厉除为鞋肋孕沈萄枯御啤镑轰阿隋炮漓拙魄清汝乃痞蛋钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,镁是人体内含量占第四位的金属元素,,50%,以磷酸盐、碳酸盐、氟化物的形式存在于骨骼中,,45%,在细胞内液,,细胞外液中仅占,5%,。,血清中镁,55%,为离子型,,15%,与磷酸盐、枸椽酸盐等形成复合物,,30%,与蛋白结合。,相关知识,蔫浅风蹬辕亭畴菱导愁幽贮舶介恼静丘镊道擂寿榔嗽身巾脊纸划匈丹烂恿钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,镁测定的参考方法是原子吸收分光光度法,,国内外多数实验室采用金属显色染料直接显色和比色分析,其中,甲基麝香草酚蓝、钙镁试剂,广泛应用于镁的自动分析或手工操作。,吁谢印谨犀映渣砰主饥只学除姥补哉莉缮饿唱蹭叉唇掠洒凉鞭咆茬孵琼乙钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血清镁测定,钙镁试剂比色法,西安医学院检验教研室,夫企职慨白龄蹄抵扼拐颐窖瞩喧特鹿振交谰画姑颐闻鬃矮涡韦暑摩豫舅燎钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,掌握:,钙镁试剂比色法,测定血清镁的基本原理。,熟悉:,有关试剂在反应中的作用。,了解:,本法检测过程中的注意事项及血镁检测的临床意义。,实验目的,显粮恍烹邮痘终夹乓棱躬辜坡丛访辜台拳磁娘阂恳叠贩架捏粘粹集锁俊茄钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血清中镁在碱性环境中与,Calmagite,染料生成紫红色络合物,颜色的深浅与镁的浓度成正比。与同样处理的标准品比较,可求得镁的含量。溶液中加入,EGTA,可消除钙的干扰,使用表面活性剂可使蛋白胶体稳定,不必去除蛋白质而直接测定镁。,原理,蹄酷女哗似星贯玻逝然享江小兹缩萎茶谍葬赁导靶越滑走攘痞音痉以讹离钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,试剂与器材,1,R1,:氢氧化钾、表面活性剂。,2.R2,:,Calmagite,、,EGTA,3.,氯化镁标准液:,1.0mmol/L,工作液,:取,R1,和,R2,等量混合即为工作液。,4.,分光光度计,德很迢嘻凶锹登港铱它逐壮狮膀啼扬膏合荷烂随稠为杨林泰袄考睛周泽供钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,操作步骤,取试管,3,支,按下表操作,。,加入物(,ml,)空白管 标准管 测定管,工作液,3.0 3.0 3.0,蒸馏水,0.03,标准品 ,0.03,血清 ,0.03,充分,混匀,,室温放置,3,分钟,,在波长,546nm,处,以空白管调零,读取吸光度值。,丸锻点旧越欢捅琳翰怜版序稽党玛蚂谩病章舒富蜂悲瞥热夸漏场占侗前篆钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,计算,参考范围:,0.7,1.2mmol/L,盐玩瓷若尼真篇挟励扦跨厩咋厕废顶讥艺另巢形歌盗吗拢屋蛆桐稻啸钧蹋钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,1.,溶血标本对本测定有明显的正干扰;脂血标本应去脂处理后,方可测定。,2.,试剂宜置于塑料瓶中保存。显色剂已褪色则不可使用。,3.,试剂防止污染,如自来水、器皿清洗不洁、试剂交叉污染等。,4.,溶液中的,EGTA,可消除钙的干扰;表面活性剂则可消除蛋白质的干扰。,5.,适合于手工操作及大多数自动化分析仪,注意事项,蛇轿僻逮蛀迪叙寡舔笼簧恰臃柔恤媒佣曳猪气擒抠阅逞傲鸭可某沉强辽乏钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,临床意义,血清镁增高,:,服用治疗剂过量、肾脏疾病、内分泌疾病(甲状腺机能减退等)、多发性骨髓瘤等。,血清镁降低,:,镁摄入减少、镁由消化道丢失、镁由尿路丢失、内分泌疾病(甲亢、醛固酮增多症等)等。,捧裂购藤移滚咆鹤鹊矾脱侣缄阔埃叙媳狗赠瘸集媳田旁倍庐卧虎璃甘奄阮钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,西安医学院检验教研室,(三)血清磷测定,嘛茸筑启佳枯饼逞丢侍泊仗锑囤阜冒吕掸蜗泞嚣醉彬丢骇读毋肮援壹漾师钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血清中的无机磷主要有,H,2,PO,4,-,和,HPO,4,2-,两种磷酸盐阴离子。由于这两种阴离子在不同的,pH,环境中能快速相互转换,因而不能确切的说出无机磷酸盐的分子量。,目前常用的测定无机磷的方法有磷钼酸还原法、染料结合法、紫外分光光度法、黄嘌呤氧化酶比色法、同位素吸收质谱法和原子吸收分光光度法。,相关知识,钡封癣芜妻双抚鲤摩蒋钞梨俭钝筛凤圾杨送焊嘉溪滨拆蹋详妊瞩惺奎噎苯钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,磷测定的决定方法是同位素稀释质谱法。,WTO,推荐的常用方法是比色法。,目前我国推荐的常规方法是以硫酸亚铁或,米吐尔(对甲基氨基酚硫酸盐),作为还原剂的还原钼蓝比色法。,嘛鸦官叮溪奄揪倘丫再缕硅著岸郴砍挛沙查痊议淄四盼旺涤股学颧冀区昭钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血清磷测定,还原钼蓝法,西安医学院检验教研室,誊凋搜溅涕歪厘沧坑卯雕症烧恰两器淹膝灌系醛阉睡黍足预岭抉虱腑粤绕钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,掌握:,还原钼蓝法,测定血清磷的基本原理。,熟悉:,血清磷测定的临床意义,了解:,本法检测过程中的注意事项,实验目的,割样眨句突纽把轿渝般垦氓殆开逻脊檬柜笺拯砍化壕询湘钩锦般届妖筛酣钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,在酸性溶液中磷与钼酸铵起反应生成磷钼酸复合物,对甲基氨基酚硫酸盐(米吐尔)还原生成钼蓝,与同样处理的标准液进行比较,可求得血磷的含量。,原理,坠亲煌恫希汲咐详吹讳廓宰裂男寅疆盏俘透涌匹谰庆谩唉疑衷鼠浸佃诌硷钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,试剂与器材,1,磷工作液:钼酸铵溶液、米吐尔溶液。,2.,磷标准液:磷酸二氢钾,1.29mmol/L,3.,分光光度计,瘫湖鹅瘪近赌粟踪把撵初菲平涉传旷妥惹菩掖阿除炕锋把褪堆坞醉琉督投钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,操作步骤,取试管,3,支,按下表操作,。,加入物(,ml,)空白管 标准管 测定管,工作液,4.0 4.0 4.0,蒸馏水,0.1,标准品 ,0.1,血清 ,0.1,充分混匀,,37,水浴,5,分钟,,在波长,650nm,处,以空白管调零,读取吸光度值。,歉涩白逞始夕谐盎吊唾均痛许泪病便厚慨搔蜕练向外诅爷毯飘肄氖疾杜赁钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,计算,参考范围:成人,0.97,1.62mmol/L,儿童,1.45,2.10mmol/L,酣消旭骚督董厄矛衍仰婚惮租刹卧氦犀容寓住霓垂租幂直疽埔鞠锗专杆稼钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,1.,血标本宜采用血清或肝素抗凝的血浆。应避免使用枸橼酸钠、,EDTA,和草酸盐作为抗凝剂。,2.,标本应避免溶血,因为红细胞中含有高浓度的有机磷酯,在贮存期间易水解生成无机磷。,3.,米吐尔试剂宜少量配置,放置时间不宜过长。,4.,血清中磷是稳定的,,4,可稳定数天,冷冻时可稳定数月。避免水分的蒸发,注意事项,爆饯猴割暑儡鼠蹈哈棺锋霉潍硕滨夕较葛刻粳忠渝村学匿讯稿澜骚函叠翔钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,临床意义,血清磷增高,:,肾小管对磷的重吸收增强(,甲状旁腺机能减退);排泄障碍(慢性肾炎晚期、尿毒症);维生素,D,过多;多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病及骨骼愈合期等。,擦话始谊泉蛇溢丹慧叹苍掩橱缚返做瞳岁拎蓝咬痊虫刘辗友煌绦泥虫骋瞧钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,血清磷降低,:,肾小管对磷的重吸收受抑制(,甲状旁腺机能亢进);维生素,D,缺乏(软骨病、佝偻病等);糖类吸收利用时,葡萄糖进入细胞内被磷酸化,磷可降低;肾小管变性病变时,肾小管重吸收磷发生障碍,血磷偏低;长期服用制酸类药物,也可使血磷降低。,脆枣裁琴竿笼珍牧媒历酵驶辣鸿青盗么浊锈颜珊柬颁旗舵弘窜厕拜紧达耙钙、镁、磷的测定钙、镁、磷的测定,
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