蜡样芽孢杆菌检测

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,蜡样芽孢杆菌检验,刘晓川,中心实验室,-20121128,GB/T 4789.14-2003 GB 4789.14-,征求意见稿,检测程序,错误纠正及细节修改,形态观察,生化试验,主要修改如下：,修改标准的中英文名称,增加第二法,MPN,法,更改,MYP,培养条件,增加根状生长实验,增加溶菌酶实验,增加附录,A,、附录,B,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,GB/T 4789.14-2003,检验程序：,与,6.1,操作步骤不一致，此处稀释液培养不执行。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,菌数测定,将原来,5,个稀释度调整为,2-3,个稀释度。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,GB 4789.14-XXXX,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,附加试剂异常问题,甘露醇卵黄多粘菌素（,MYP,）培养基,异常 正常,50%,卵黄生产时污染微生物，平板培,养后变黄，同时有异味。,联系厂家换货。,自行配置,50%,卵黄。（无菌操作，卵黄与等量灭菌生理盐水混合）,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,标准菌株,蜡样芽孢杆菌标准菌株,ATCC11778,ATCC,菌株不需要配置活化液，复溶后可直接涂抹平板。,生长温度范围为,20-45,，最适生长温度为,30-37,。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,菌落形态,ATCC 11778,产生卵磷脂酶,不发酵甘露醇,发酵甘露醇,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,蜡样芽孢杆菌显色培养基（海博）,蜡样芽孢杆菌呈现,蓝绿色,，菌落较大。,苏云金芽孢杆菌呈现,蓝绿色,。,单增李斯特菌呈现深蓝色。,其他菌呈现黄色或无色。,G-,菌抑制。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,形态观察,芽孢（隐藏的生命）,营养体,条件合适,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,芽孢染色,染液：,孔雀绿,+,沙黄,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,芽孢,在一定条件下，,生长发育后期,细胞质高度浓缩脱水所形成的一种,抗逆性很强,的球形或椭圆形的,休眠体,。,芽孢所处的位置不同，有的在中部，有的在偏端，有的在顶端。芽孢一般呈圆形、椭圆形、圆柱形,（前孢子）。,有些细菌中，芽孢的直径小于菌体直径，称,芽孢杆菌,。,另一些细菌中，芽孢的直径大于菌体直径，使整个菌体呈梭形或鼓槌状，这些细菌称为,梭状芽孢杆菌,，为,厌氧菌,。,2,，,6-,吡啶二羧酸（,DPA,）,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,培养特性,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,生化性状,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,生化鉴定套装,可使用陆桥或海博生化鉴定套装,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,生化试验(陆桥),柠（枸）动 硝,VP,木 明 葡（厌氧）甘,-+-+-,明胶、硝酸盐穿刺接种，其他滴加菌液,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,生化试验(海博),1.,揭开盖板,2.,撕开封口膜,3.,标记,4.,制备菌液，加入试剂孔,5.,盖上盖板，培养后填写结果,表并报告。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,明胶液化实验,注意事项：,1.,明胶观察结果时，需放,4,30min,而后观察结果，,呈液体状态为阳性，,固态为阴性。,2.,葡萄糖利用试验，需厌氧条件培养，变为黄色为阳性。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,过氧化氢酶实验,3%,过氧化氢溶液，临用前配置，用水稀释,挑取单个菌落置于洁净试管内，滴加,3%,过氧化氢溶液,2ml,，观察结果,阳性,半分钟内产生气泡,阴性,不产生气泡,原理：,过氧化氢 水,+,氧气,载玻片接触酶实验,不建议将过氧化氢直接滴加于平皿上,过氧化氢酶,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,溶血实验,胰酪胨大豆养血（,TSSB,）琼脂,陆桥,CM136,（,TSSB,基础）,+P62,（无菌脱纤维羊血）,301,培养,242h,，,菌落浅灰色，不透明，似白色毛玻璃状，有草绿色溶血环或完全溶血环,。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,根状生长实验,间隔,0.5cm,左右距离划平行直线于营养琼脂平板上，,301,培养,24h2h,。蕈状芽胞杆菌形成根状生长的特征。,蜡样芽胞杆菌菌株不具形成根状生长的特征。,蜡样芽胞杆菌,蕈状芽胞杆菌,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,酪蛋白酶实验,酪蛋白琼脂,培养基成分中,酪蛋白不会溶解,接种可以菌落，,361,培养,482h,阳性,菌落周围培养基出现澄清透明区，,表示产生酪蛋白酶。,阴性,反应继续培养,72h,观察,原理：蜡样芽孢杆菌代谢产生碱性蛋白酶，可水解酪蛋白成为小分子肽段，使菌落周围的培养基变透明。,采用点种的方式接种，可以清晰的看到透明环。,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,蛋白质毒素结晶试验,步骤：,1.,取室温放置,3 d,4 d,的营养琼脂培,养物少许涂于载玻片。,2.,自然干燥，微火固定，甲醇作用,30s,，,火焰干燥,.,3.,滴,0.5,碱性复红,，火焰加热（微,见蒸气，勿使染液沸腾,),持续,1 min,2,min,，移去火焰。更换染色液加温,30 s,，,水清洗、晾干后镜检。,结果观察：,观察有无游离芽胞（浅红色）和染成深,红色的菱形、正方形或其它形状的蛋白,结晶体,（,伴孢晶体,）。,芽孢,蛋白结晶体,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,溶菌酶耐性试验,用接种环取纯菌悬液一环，接种于溶菌酶肉汤中，,361,培养,24 h,。蜡样芽胞杆菌在本培养基,(,含,0.001,溶菌酶,),中能生长。如出现阴性反应，应继续培养,24h,。,结果观察：混浊现象,培养基：溶菌酶肉汤基础,+,溶菌酶溶液,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTATION TITLE&DATE 20.09.09,内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司,INNER MONGLIA MENGNIU DAIRY(GROUP)CO.,LTD,蜡样芽胞杆菌生化特征与其它芽胞杆菌的区别,內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙內蒙,PRESENTA