弧菌科及检验课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,弧菌科常规检验,弧菌科常规检验,1,弧菌科种类,弧菌属,气单胞菌属,邻单胞菌属,发光菌属等,弧菌科种类弧菌属,弧菌科共同特征,革兰阴性菌,需氧兼性厌氧,营养要求不高,氧化酶,发酵葡萄糖产酸不产气,弧菌科共同特征革兰阴性菌,弧菌科三个菌属的鉴别,试验,弧菌属,气单胞菌属,邻单胞菌属,甘露醇,+/-,+,-,鸟氨酸,+/-,-,+,精氨酸,+/-,+/-,+,O/129,敏感,S,R,S,TCBS,生长,+,-,-,嗜盐性,+/-,-,-,弧菌科三个菌属的鉴别试验弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属甘露醇+/,霍乱弧菌,是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体,包括古典生物型和ElTor生物型,O139是新的流行菌株,霍乱弧菌是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体,形态染色,革兰阴性,弧形或逗点状,单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样”,无芽孢，无荚膜,在新鲜粪便中成“鱼群样”排列,形态染色革兰阴性,霍乱弧菌,革兰染色,鞭毛染色,霍乱弧菌革兰染色鞭毛染色,培养特性,兼性厌氧,营养要求不高,耐碱不耐酸，常用pH8.49.2碱性培养基,在液体培养基中形成菌膜,菌落圆形、较大、扁平,培养特性兼性厌氧,霍乱弧菌常用培养基,碱性蛋白胨水,碱性琼脂平板,庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）,硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）,亚碲酸钾琼脂平板,霍乱弧菌常用培养基碱性蛋白胨水,生化反应,试验名称,结果,试验名称,结果,氧化酶,+,吲哚,+,硝酸盐还原,+,葡萄糖,+,赖氨酸,+,蔗糖,+,鸟氨酸,+,甘露醇,+,精氨酸双水解,-,0,、,1,NaCl,+,V-P,d,7,、,10,NaCl,-,明胶液化,+,生化反应试验名称结果试验名称结果氧化酶+吲哚+硝酸盐还原+葡,抗原结构和分型,O抗原,H抗原,抗原结构和分型O抗原,霍乱弧菌生物型,O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生物型,两种生物型具有相同的抗原结构,两种生物型多数生物学性状相似,霍乱弧菌生物型O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生物型,霍乱弧菌两种生物型的鉴别,鉴别试验,古典生物型,ElTor,生物型,V-P,-,+,羊红细胞溶解,-,+,50U,多粘菌素,S,R,鸡红细胞凝集,-,+,组噬菌体裂解,+,-,组噬菌体裂解,-,+,霍乱弧菌两种生物型的鉴别鉴别试验古典生物型ElTor生物型V,霍乱弧菌分群、型,O,抗原是霍乱弧菌分群和型的基础,根据,O,抗原不同分为,139,个血清群,O1,群包括古典生物型和,ElTor,生物型,其他群称为非,O1,群（非凝集弧菌）,O1,群血清型（见下表）,血清型,A,抗原,B,抗原,C,抗原,小川型（,AB,）,+,+,-,稻叶型（,AC,）,+,-,+,彦岛型（,ABC,）,+,+,+,霍乱弧菌分群、型O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础血清型A抗原B,抵抗力与变异,ElTor型抵抗力较古典型强，,在水中存活时间长,对酸性物质敏感,对庆大霉素耐受,多次传代可失去典型形态而成为杆状,抵抗力与变异ElTor型抵抗力较古典型强，,临床意义,致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。,所致疾病：,经,肠道传染,，引起烈性肠道传染病霍乱，为甲类传染病。,典型病人粪便呈“米泔水”样,病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。,我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。,临床意义致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，,作用机制示意图,作用机制示意图,弧菌科及检验课件,微生物检验,标本采集,发病早期采集标本,以“米泔水”样便为主，及时送检,卡布培养基保存,严密包装，专人送检,微生物检验标本采集发病早期采集标本,检验程序,标本,增菌培养,碱性蛋白胨水,分离培养（,TCBS,、碱性平板）,生化鉴定分型,血清学鉴定,确诊报告,初步报告,快速诊断,直接涂片,动力、制动试验,检验程序标本 增菌培养 分离培养（TCBS、碱性,检验方法,显微镜检查,涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注意形态、排列,动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意运动方式,制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动力消失,检验方法显微镜检查涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注意形,分离培养,标本接种碱性蛋白胨水增菌68小时，转种TCBS或庆大霉素琼脂，,TCBS：出现黄色菌落,庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落,分离培养标本接种碱性蛋白胨水增菌68小时，转种TCBS或庆,鉴定,生化反应：粘丝试验、霍乱红反应,确定血清群：,O1,群诊断血清与可疑菌落作玻片凝集，以确定是否为,O1,群,确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以确定血清型别,确定生物型：,第,组噬菌体裂解试验,多粘菌素,B,敏感试验,鸡红细胞凝集试验,溶血试验,鉴定生化反应：粘丝试验、霍乱红反应,副溶血性弧菌,生物学性状,革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢，无荚膜,营养要求 不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5NaCl，无盐培养基不生长,TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落,神奈川现象：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔红细胞，不溶解马红细胞,副溶血性弧菌生物学性状革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无,副溶血性弧菌,临床意义,致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和耐热相关溶血素）,所致疾病：,食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引起食物中毒,副溶血性弧菌临床意义致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和耐,气单胞菌属,形态染色：,革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端鞭毛，无芽孢,生长条件：,兼性厌氧；营养要求不高,生长温度较宽，,0,45,嗜冷菌,37,以下生长,嗜温菌,10,42,生长,气单胞菌属形态染色：,气单胞菌属,生长现象,TCBS,上不生长,血平板：灰白、光滑、凸起菌落,肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落,生化反应,氧化酶、触酶,发酵葡萄糖产酸产气,6.5,NaCl,不生长,O129,不敏感,多数菌株产,-,内酰胺酶，对青霉素耐药,气单胞菌属生长现象,气单胞菌属,临床意义,致病物质：溶血毒素、细胞毒素,所致疾病：,肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌,肠外感染：败血症、伤口感染等,多数菌株产,-,内酰胺酶，对青霉素耐药,气单胞菌属临床意义致病物质：溶血毒素、细胞毒素,检验程序,标本,增菌,分离培养,（血平板、,Mac,）,全面生化反应,可疑菌落,肠毒素测定,初步生化反应,涂片,染色镜检,血标本,氧化酶,TCBS,生长,O/129,耐盐试验,检验程序标本 增菌 分离培养全面生化反应可疑菌落,鉴定试验,与肠道杆菌、非发酵菌鉴别,与邻单胞菌属和弧菌属鉴别,气单胞菌属种间鉴别,鉴定试验与肠道杆菌、非发酵菌鉴别,肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别,鉴定试验,肠杆菌科,非发酵菌,弧菌科,氧化酶,葡萄糖氧化,/,发酵（,O/F,）,F,O,F,鞭毛,周鞭毛,单、丛、周,单、丛,肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科,鉴定依据,革兰阴性杆菌，丛鞭毛,肠道选择平板上无色透明菌落,氧化酶、葡萄糖发酵,O/129：R,TCBS：,6.5NaCl：,鉴定依据革兰阴性杆菌，丛鞭毛,邻单胞菌属,主要性状,只有一个菌种：类志贺邻单胞菌,革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无荚膜,兼性厌氧，营养要求不高,在,SS,平板形成不发酵乳糖菌落,氧化酶，葡萄糖发酵,O/129,：,S,TCBS,：不生长,6.5,NaCl,：不生长,赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均,多数菌株产,-,内酰胺酶，对青霉素耐药,邻单胞菌属主要性状只有一个菌种：类志贺邻单胞菌,邻单胞菌属,临床意义,腹泻、食物中毒，多见于夏季,败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。,邻单胞菌属临床意义腹泻、食物中毒，多见于夏季,邻单胞菌属,检验程序,标本,增菌,分离培养,（血平板、,Mac,）,全面生化反应,可疑菌落,初步生化反应,涂片,染色镜检,血标本,氧化酶,TCBS,生长,O/129,耐盐试验,邻单胞菌属检验程序标本 增菌 分离培养全面生,邻单胞菌属,鉴定,与志贺菌属鉴别：氧化酶、动力、血清学,与气单胞菌属鉴别：O/129，肌醇试验,与弧菌属鉴别：TCBS、6.5NaCl生长试验,邻单胞菌属鉴定与志贺菌属鉴别：氧化酶、动力、血清学,