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食品微生物检验技术,一级标题,二级标题,三级标题,*,Click To Edit Title Style,一、实验目的,一、实验目的,一、实验目的,一级标题,二级标题,三级标题,Click To Edit Title Style,国家高等职业教育食品加工技术专业教学资源库子项目,食品检验工,国家高等职业教育食品加工技术专业教学资源库子项目食品检,食品中亚硝酸盐的含量测定,(分光光度法),主讲教师:韩晋辉,国家高等职业教育食品加工技术专业教学资源库子项目,食品中亚硝酸盐的含量测定主讲教师:韩晋辉国家高等职业教育食,食品中亚硝酸盐的含量测定,掌握样品制备、提取的基本操作技能,掌握分光光度计的使用方法,掌握,比,色法测定亚硝酸盐的操作要点,学习标准曲线的制作以及数据处理,一、实验目的,食品中亚硝酸盐的含量测定掌握样品制备、提取的基本操作技能一、,食品中亚硝酸盐的含量测定,样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下,亚,硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,生成的重氮化合物,再与,盐酸萘乙二胺,偶联成紫红色的重氮染料,产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比,可以比色测定。,二、实验原理,食品中亚硝酸盐的含量测定 样品经沉淀蛋白质,除去脂肪,食品中亚硝酸盐的含量测定,1.,仪器,比色管,移液管,分光光度计,小型绞肉机,2.,试剂,饱和硼砂溶液、,0.4,对氨基苯磺酸溶液、,0.2,盐酸萘乙二胺溶液、亚硝酸钠标准溶液、,乙,酸锌,溶液、亚铁氰化钾溶液,。,三、仪器和试剂,食品中亚硝酸盐的含量测定1.仪器三、仪器和试剂,食品中亚硝酸盐的含量测定,参考,GB/T 5009.,33,20,10,食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定,以午餐肉样品为例,1.,试样预处理,从每个待检样中,随机取样,10g,,,经绞肉机绞碎,后,得到混匀的原始样。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定参考GB/T 5009.33201,食品中亚硝酸盐的含量测定,2,提取,称取,5,(精确至,0.01 g,)制成匀浆的试样,置于,10,0 mL,烧杯中,加,12.5 mL,饱和硼砂溶液,搅拌均匀,以,70,左右的水约,300 mL,将试样洗入,500 mL,容量瓶中,于沸水浴中加热,15 min,,取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定 2 提取四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定,3 提取液净化,在上述提取液中加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入 5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置30 min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30 mL,滤液备用。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定3 提取液净化四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定,四、亚硝酸盐的测定,食品中亚硝酸盐的含量测定四、亚硝酸盐的测定,食品中亚硝酸盐的含量测定,注意事项:,NaNO,2,标准溶液要准确量取,移液偏差会导致测定结果不准确。,对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺的加入顺序不能颠倒,反应需先重氮化再偶合。,用蒸馏水定容至刻度后,要混匀,不然染料颜色集中在比色管底部。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定 注意事项:四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定,五、标准曲线的绘制,y=1.2914x,食品中亚硝酸盐的含量测定五、标准曲线的绘制y=1.2914x,食品中亚硝酸盐的含量测定,五.计算,食品中亚硝酸盐的含量测定 五.计算,食品中亚硝酸盐的含量测定,如:样品滤液的吸光值为0.028,即:y=0.028,五、计算,食品中亚硝酸盐的含量测定 如:样品滤液的吸光值为0.028,,食品中亚硝酸盐的含量测定,总结分光光度法测定午餐肉中亚硝酸钠含量的操作关键。,六、思考题,食品中亚硝酸盐的含量测定总结分光光度法测定午餐肉中亚硝酸钠含,
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