氨茶碱的血药浓度测定及药动学研究课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,实验,7.7,氨茶碱的血药浓度测定及药动学研究,实验7.7氨茶碱的血药浓度测定及药动学研究,1,【,目的,】,学习氨茶碱血药浓度的紫外测定方法，验证其药动学模型。,【,原理,】,1.,氨茶碱为临床常用平喘药，由茶碱与乙二胺缩合而成。在酸性条件下,可用有机溶剂从血清中提取出茶碱,再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出。测量,274,和,298,处的吸光度（,A,274,为茶碱和本底，即溶剂、血清的吸光度，,A,298,为本底的吸光度），,A=A,274,-A,298,。,【目的】,2,茶碱吸收度曲线,茶碱,本底,274,298,A,茶碱吸收度曲线茶碱本底274298A,3,2.,氨茶碱经静脉进入血液，随血液循环进行组织分布，达到平衡后转入消除相。时量曲线呈二房室动力学模型。,3.,房室模型是抽象的数学模型，它的划分与解剖学部位或生理学功能无关。药物转运速率相同或相近的部位可划分为同一房室。房室模型可以分为一室模型、二室模型、多室模型。大多数药物在体内的转运和分布符合二室模型。即药物静脉注射入血后，首先快速进入血流量大的组织，如心、肝、肾、肺、脑等，然后缓慢地向血流量小的组织，如脂肪组织、静止的肌肉组织等转移。,2.氨茶碱经静脉进入血液，随血液循环进行组织分布，达到平衡后,4,【,器材与药品,】,754,型紫外分光光度计，液体涡旋混和器，数学坐标纸、半对数坐标纸各一张。氨茶碱标准液，,0.1mol/L HCl,0.1mol/L NaOH,异丙醇：氯仿抽提液（,5:95,）。,【,实验动物,】,家兔,【器材与药品】,5,【,实验步骤,】,1,取体重,2.5-3kg,健康家兔,1,只，一耳缘静脉注射氨茶碱,15mg/kg,，另一耳用锐利刀片切割取血。分别在给氨茶碱后,5,、,10,、,20,、,30,、,60,、,120,、,180,、,300,、,420min,取血。,2,分离血清，各管均取血清,0.5ml,于,15ml,试管中，加,0.1mol/L,盐酸,0.2ml,、抽提液,5ml,，振摇混合，,2500r/min,离心,10min,。,【实验步骤】,6,3,吸取下层氯仿液,4ml,置另一试管中，加入,0.1mol/L NaOH,溶液,4ml,，振摇混匀，,2500r/min,离心,10min,。,4,吸取上层碱液，以,0.1mol/L NaOH,溶液作参比，测定其在,274,和,298,处的吸收度（,A,274,和,A,298,），计算,A,。,5.,制作茶碱标准曲线：取,5,支试管，依次加入茶碱标准液,20,、,40,、,60,、,80,、,100l,，各加入,0.1mol/L NaOH,溶液,4ml,，终浓度依次为,0.5,、,1.0,、,1.5,、,2.0,、,2.5g/ml,，测定各管的,A,274,和,A,298,，计算,A,。以茶碱浓度为横坐标，,A,为纵坐标描点绘图，用,Excel,软件求直线回归方程，即为茶碱标准曲线的直线方程（图示）。,3吸取下层氯仿液4ml置另一试管中，加入0.1mol/L,7,将茶碱浓度和吸光度的数据录入,Excel,的工作表中。,茶碱标准曲线的制作,将茶碱浓度和吸光度的数据录入Excel的工作表中。茶碱标,8,茶碱标准曲线的制作,选取,Excel,表上任一格，点击菜单“插入,/,图表”，,出现“图表指南”，选取“,XY,散点图”，进行下一步。,茶碱标准曲线的制作 选取Excel表上任一格，点击菜单“插,9,茶碱标准曲线的制作,“,数据区域”选取茶碱浓度和吸光度相关数据，“系列产生在列”，直至完成。,茶碱标准曲线的制作“数据区域”选取茶碱浓度和吸光度相关数据,10,茶碱标准曲线的制作,选取所得图形，用右键点击,5,个散点中任一点，,出现对话框，点选“添加趋势线”选项。,茶碱标准曲线的制作 选取所得图形，用右键点击5个散点中任一,11,茶碱标准曲线的制作,在“添加趋势线”对话框的“选项”一栏，选中“显示公式”,和“显示,R,平方值”，然后“确定”。,茶碱标准曲线的制作 在“添加趋势线”对话框的“选项”一栏，,12,茶碱标准曲线的制作,标准曲线的直线方程和,R,2,值自动出现。,R,（相关系数）表示曲线方程对原始数据拟合的程度。,茶碱标准曲线的制作 标准曲线的直线方程和R2值自动出现。R,13,6.,将测得血清样品的,A,代入标准曲线的方程，求得相应的,C,，,C10,即为茶碱的血药浓度。以时间为横坐标，浓度对数为纵坐标，用,CAPP,软件描点做图，判断氨茶碱在体内代谢的房室模型。,时间（,min,）,A,C,（,g/ml,）血药浓度（,g/ml,）,5,10,20,30,60,120,180,300,420,6.将测得血清样品的A代入标准曲线的方程，求得相应的C，,14,将取血时间和茶碱血药浓度输入,CAPP,软件。,将取血时间和茶碱血药浓度输入CAPP软件。,15,添加消除相的数据点，点击“更新曲线”。,添加消除相的数据点，点击“更新曲线”。,16,添加分布相的数据点，点击“更新曲线”。,添加分布相的数据点，点击“更新曲线”。,17,氨茶碱体内代谢的时量曲线即绘制完成，曲线方程和相关的药动学参数值亦同时列出。,氨茶碱体内代谢的时量曲线即绘制完成，曲线方程和相关的药动,18,【,注意事项,】,1.,紫外分光光度计使用前需预热,30min,并激发氢灯。,2.,振摇混匀药液时防止溅出并准确加样。,3.,样品离心前需配平。,4.,测量时若更换波长，必须重新调节,0,和,100,。,【,讨 论,】,1.,氨茶碱的时量曲线呈几房室模型？为什么？,2.,为何要测两个波长下茶碱的吸光度并取其差值？,3.,试述药动学参数,V,1,、,V,d,、,t,1/2,、,t,1/2,、,K,10,、,K,12,、,K,21,、,Cl,、,AUC,的含义。,【注意事项】,19,眼到、手到、心到，一个不良也逃不掉。,11月-24,11月-24,Monday,November 11,2024,成就团队辉煌，助我人生成长。,19:46:39,19:46:39,19:46,11/11/2024 7:46:39 PM,安全相伴，因为亲人在盼。,11月-24,19:46:39,19:46,Nov-24,11-Nov-24,为己为家为国、安全必须牢记。,19:46:39,19:46:39,19:46,Monday,November 11,2024,日常记录好习惯，追溯分析利改善。,11月-24,11月-24,19:46:39,19:46:39,November 11,2024,客户服务，重在回访仔细倾听，你认心情。,2024年11月11日,7:46 下午,11月-24,11月-24,宁绕百丈远不冒一步险。,11 十一月 2024,7:46:39 下午,19:46:39,11月-24,健康的身体离不开锻炼，美满的家庭离不开安全。,十一月 24,7:46 下午,11月-24,19:46,November 11,2024,安全就是生命，责任重于泰山。,2024/11/11 19:46:39,19:46:39,11 November 2024,时代精神演绎灵魂，优质精神构筑时代精神。,7:46:39 下午,7:46 下午,19:46:39,11月-24,严格要求安全在，松松夸夸事故来。,11月-24,11月-24,19:46,19:46:39,19:46:39,Nov-24,安全规程是真经，规章制度血写成。,2024/11/11 19:46:39,Monday,November 11,2024,消防法规系生命，自觉遵守是保障。,11月-24,2024/11/11 19:46:39,11月-24,谢谢大家！,眼到、手到、心到，一个不良也逃不掉。9月-239月-23Fr,20,