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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,10/15/2016,#,茶,叶中茶,多,酚含量测定,一、实验原理,茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇(儿茶素)类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主要为儿茶素,儿茶素占,6080%,。,茶,多酚能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯,微溶于油脂,。,强,酸强碱下都易变质。,酒,石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物,络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比,络合物在,540nm,处有最佳吸收。因此可以用比色方法测定,。,二、仪器与试剂,仪器:分光光度计、天平、,1ml,移液枪、,100ml,容量瓶*,6,100ml,量筒、,100ml,烧杯*,3,、,10ml,EP,管,试剂,:,(,1)FeSO47H2O 1.000g,,含,4,个结晶水的酒石酸钾,钠,5.000g,(2,)Na2HPO412H2O,6.020g,,,NaH2PO42H2O,0.500g,(3),茶多酚,标,准品,10mg,三、操作步骤,1,、溶液配制,(,1,),酒,石酸钾铁溶,液,。称取,FeSO47H2O 0.100g,,含,4,个结晶水的酒石酸钾钠,0.500g,,加蒸馏水溶解后,用蒸馏水稀释至,100mL,。,(,2,),pH7.5,的磷酸缓冲,液。,6.020g Na2HPO4,12H2O,,,0.500g NaH2PO4,2H2O,,加蒸馏水溶解后,用蒸馏水稀释至,100mL,。,(,3,)儿,茶素标准液。称取,10mg,儿茶素,用蒸馏水定容至,10ml,,浓度为,1000,g/ml,。分别稀释到,200,、,400,、,600,、,800,g/ml,,得,5,个浓度标准品溶液。,2,、,标准曲线:分别吸取,1ml,标准液,磷酸缓冲液,3ml,,酒石酸钾铁,1ml,混匀,,3000,转离心,10min,。吸取上清液,3ml,加入玻璃比色皿,用分光光度计测定,540nm,处的,OD,值三次求平均值,并绘制浓度,-OD,标准曲线。以蒸馏水代替标准品溶液加入同样的试剂作空白对照。,3,、取,提取物,10mg,,用蒸馏水定容至,10ml,。取,1ml,,按上述同样方法测定,540nm,处的,OD,值,3,次求平均值。以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白对照。,标,准曲线,四、计算,茶多酚含量,W=C/1000100%,W,茶多酚含量,%,C,所测吸光度带入标准曲线得到样品中茶多酚浓度(,g/ml,),1000,样品浓度(,g/ml,),
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