生物安全柜讲座ppt课件

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Company name,*,单击此处编辑母版标题样式,海淀,CDC,生物安全柜,海淀区疾病预防控制中心,微生物检验科 刘方遥,1,海淀CDC生物安全柜 海淀区疾病预防控制中心 1,主要内容,1,生物安全柜标准,2,原理等级和种类,3,生物安全柜操作,4,生物安全柜选购,2,主要内容1生物安全柜标准2原理等级和种类3生物安全柜操作4生,为什么使用生物安全柜？,病原微生物名称,危害程度分类,实验活动所需生物安全实验室级别,病毒培养,动物感染实验室,未经培养的感染材料的操作,灭活材料的操作,无感染性材料的操作,艾滋病毒（,I,型和,II,型）,第二类,BSL-3,ABSL-3,BSL-2,BSL-1,BSL-1,甲型肝炎病毒,第三类,BSL-2,ABSL-2,BSL-2,BSL-1,BSL-1,乙型肝炎病毒,第三类,BSL-2,ABSL-2,BSL-2,BSL-1,BSL-1,丙型肝炎病毒,第三类,BSL-2,ABSL-2,BSL-2,BSL-1,BSL-1,丁型肝炎病毒,第三类,BSL-2,ABSL-2,BSL-2,BSL-1,BSL-1,戊型肝炎病毒,第三类,BSL-2,ABSL-2,BSL-2,BSL-1,BSL-1,BSL-2,要求有生物安全柜和高压灭菌锅,3,为什么使用生物安全柜？病原微生物名称危害程度分类实验活动所需,生物安全柜标准,美国标准,NSF 49:2002,欧洲标准,EN 12469:2000,澳大利亚标准,AS 2252,日本标准,JIS K 3800:2000,主要国际标准,4,生物安全柜标准美国标准欧洲标准 主要国际标准4,2005,年,7,月,18,日,2002,年,2000,年,5,月,2000,年,5,月，欧洲标准化委员会,(CEN),颁布了生物,安全柜欧洲标准,EN12469:2000,，正式替代了德国,DIN 12950,、英国,BS5726,和法国,NF X-44-201,等欧盟,成员国生物安全柜的标准，成为欧盟区域内生物安,全柜的统一标准。,欧洲标准化委员会,美国,中国,中国的标准的产生,生物安全柜标准,5,2005年7月18日 2002年 2000年5月 20,2005,年,7,月,18,日,2002,年,2000,年,5,月,NSF49,在上世纪,70,年代就已经出现，被公认为目前,生物安全柜领域最完善的标准。在,2002,年，,NSF49,正式,获得了美国国家标准学会的官方认可，成为美国生物,安全柜的统一标准。,欧洲标准化委员会,美国,中国,中国的标准的产生,生物安全柜标准,6,2005年7月18日 2002年 2000年5月 NS,2005,年,7,月,18,日,2002,年,2000,年,5,月,2006,年,6,月,1,日，中华人民共和国医药行业标准,YY0569-2005,正式实施，这是国家食品药品监督管理局,于,2005,年,7,月,18,日发布的医药行业关于生物安全柜的,强制性标准。,欧洲标准化委员会,美国,中国,中国的标准的产生,生物安全柜标准,7,2005年7月18日 2002年 2000年5月 20,我们国家医药行业的,YY0569-2005,标准的编制是参照欧洲标准化委员会,(CEN),颁布的生物安全柜,欧洲标准,EN12469:2000,和由美国国家标准学会官方认可的,美国,NSF49,生物安全柜标准。标准积极吸收采纳了,EN12469,和,NSF49,这两个生物安全柜标准中的重要部分，并将这两个标准中相对薄弱的部分作出了提高修改，使中国的,YY0569-2005,标准成为世界上生物安全柜领域,最权威,的标准。,生物安全柜标准,8,我们国家医药行业的YY0569-2005标准的编制,原理,:,气流原理和实验室通风橱一样，不同之处在于排气口安装有,HEPA,（高效空气粒子过滤器）过滤器。由前窗操作口向内吸入的负压气流保护人员的安全，而排出的气流须经,HEPA,过滤来保护环境不受污染。,保护,样品,保护,实验者,保护,环境,原理等级和种类,9,原理:原理等级和种类9,等级：,生物安全柜,biosefety cabinets,共,分为,三个级别,共,六种型号,种类：,I,级,II,级,：,A1型,、,A,2,型,、 B,1型,、B,2,型,III,级,原理等级和种类,10,等级：原理等级和种类10,生物安全柜（,BSC,）种类,BSC,排气,循环,进风,(,m/s,),送风,(,m/s,),排处,连接,100%,0%,0.38,0,室外,硬管, A1,30%,70%,0.4,0.38,室内,无, A2,30%,70%,0.4,0.38,室外,套管, B1,70%,30%,0.5,0.38,室外,套管, B2,100%,0,0.5,0.38,室外,硬管,100%,0,不适,不适,均可,均可,11,生物安全柜（BSC）种类 BSC排气循环 进风(m/s),级生物安全柜原理图,A,：前开口，,B,：可视窗，,C,：排风,HEPA,过滤器，,D,：压力排风系统。,级生物安全柜不能保护样品,目前已较少使用,12,级生物安全柜原理图A：前开口，12,级生物安全柜,二级生物安全柜是目前应用,最为广泛,的柜型，是有前窗操作口的安全柜，操造者可以通过前窗操作口在安全柜内进行操作，对操作过程中的人员、产品及环境进行保护。,13,级生物安全柜 二级生物安全柜是目前应用最为广泛,级,A1,型生物安全柜原理图,1,、风机将房间空气经前面的开口引入安全柜内并进入前面的进风格栅内,2,、空气流入速度至少应该达,0.4 m/s,3,、供气先通过送风,HEPA,过滤器，再向下流动通过工作台面,4,、空气在向下流动到距工作台面大约,6,18 cm,处分开，其中的一半通过前面的排风格栅，而另一半则通过后面的排风格栅排出,5,、所有在工作台面形成的气溶胶立刻被向下的气流带走，并经两组排风格栅排出，从而为实验对象提供最好的保护,14,级A1型生物安全柜原理图1、风机将房间空气经前面的开口引入,级,A1,型生物安全柜原理图,A,：前开口；,B,：窗口；,C,：排风,HEPA,过滤器；,D,：后面的压力排风系统；,E,：送风,HEPA,过滤器；,F,：风机,15,级A1型生物安全柜原理图A：前开口；B：窗口；15,A1,型生物安全柜,可保护,:,样品,操作人员,环境,适用于生物安全,1,、,2,、,3,级的样品，要求样品没有挥发性有毒化学物质及挥发性放射核素,16,A1型生物安全柜可保护: 16,级,A2,型生物安全柜原理图,环境空气,污染的空气,HEPA,过滤的空气,含压的污染空气,70%,气体循环使用,30%,气体排出，既可以接管道外排，也可以不接管道直接排放在实验室,17,级A2型生物安全柜原理图环境空气 70%气体循环使用1,适用于：,含有微量挥发性有毒化学物质或痕量放射性核素的微生物学研究,A,：前开口；,B,：窗口；,C,：,排风,HEPA,过滤器；,D,：,供风,HEPA,过滤器；,E,：负压压力排风系统；,F,：风机；,G,：送风过滤器,安全柜需要有与建筑物排,风系统相连接的排风接口,级,B1,型生物安全柜原理图,18,适用于：A：前开口；B：窗口；级B1型生物安全柜原理图18,“全排”,0%,气体循环利用,.,100%,气体外排，适用于,P3,实验室,环境空气,污染的空气,HEPA,过滤的空气,負压的污染空气,级,B2,型生物安全柜原理图,19,“全排” 环境空气 级B2型生物安全柜原理图19,可保护,:,样品,操作人员,环境,B2,可以用于生物安全,1, 2,或,3,级,的样品，如,病原微生物,，以及在这些微生物研究中用到的,挥发性有毒化学品,及,放射性核素,级,B2,型生物安全柜原理图,20,可保护:级B2型生物安全柜原理图20,级,B2,型生物安全柜,21,级B2型生物安全柜21,级,B2,型生物安全柜,22,级B2型生物安全柜22,三级生物安全柜是为,4,级,实验室生物安全等级而设计的，柜体,完全气密,，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称,手套箱,，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验。,级生物安全柜,23,三级生物安全柜是为4级实验室生物安全等级而设计的，柜体,级生物安全柜原理图,24,级生物安全柜原理图24,级生物安全柜,25,级生物安全柜25,级生物安全柜,26,级生物安全柜26,生物安全柜操作,个人防护,使用安全柜时必须穿,防护服,、戴,手套,、,口罩,和,帽子,，手套应套在防护服的外面。,操作前准备,紫外灯照射,30,分钟，关闭紫外灯。打开安全柜的日光灯和风机,5,分钟以上。将实验用品集中消毒擦拭后按从洁净区到污染区的方向摆放。,27,生物安全柜操作个人防护27,干净的物品,理想的工作台摆放原则（,清洁,污染区,）,在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行,被污染的区域,废弃物托盘,垃圾袋,生物安全柜操作,干净的物品 理想的工作台摆放原则（清洁污染区）被污染,生物安全柜操作,工作时操作规范,双臂,垂直缓慢,进入前面的开口，在生物安全柜中等待大约一分钟，以使安全柜调整完毕后才可对物品进行处理。,所有操作应在离前窗,10cm,以外的,工作区,进行。,废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器。,29,生物安全柜操作工作时操作规范29,操作注意事项,缓慢移动原则,：为了避免影响正常的风路状态，柜内操作时手应该尽量平缓移动。,物品平行摆放原则,：为了避免物品和物品之间的交叉污染现象产生，在柜内摆放的物品应该尽量呈横向一字摆开，避免回风过程中造成交叉污染。同时避免堵塞背部回风隔栅影响正常风路。,避免震动原则,：柜内尽量避免震动仪器（例如离心机、旋涡振荡器等）的使用，因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落，导致操作室内部洁净度降低，同时如果在前操作面平衡失败还会引起安全柜对操作者的污染。,30,操作注意事项30,操作注意事项,不同样品柜内移动原则,：柜内两种及以上物品需要移动时，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移动原则，避免污染性高的物品在移动过程中产生对柜体内部的大面积污染。,明火使用原则,：柜内尽量不要使用明火！因为在明火使用过程中产生的细小颗粒杂质将被带入滤膜区域，这些高温杂质会损伤滤膜。无法避免一定需要使用的时候，宜使用低火苗的本生灯或电热灭菌器。,31,操作注意事项31,操作注意事项,工作结束后,要求,继续运行,安全柜至少,3,分钟,完成净化,。柜内物品应使用消毒剂擦拭后才能移出柜外，然后全面擦拭生物安全柜的内壁和台面。等待,5,分钟后，关闭前窗，关灯，关风机，紫外灯照射,30,分钟。,32,操作注意事项32,操作注意事项,生物安全柜维护保养,保持生物安全柜,表面清洁,和,无污染,状态,用,75%,酒精,或者合适的,消毒剂,擦拭内壁和工作台面；,如果使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，需要用,无菌水,再次进行 擦拭除去残余的消毒剂；,定期,抬起工作台面,对其下面的区域进行清洁；,消毒后，用玻璃清洁器对,前窗玻璃,和,紫外灯,进行清洁,定期保养,用湿布擦拭内壁和工作台面。,每年按需要,更换,紫外灯和日光灯。,33,操作注意事项33,操作注意事项,污染清除,甲醛、过氧化氢,熏蒸,等方法应由有资质的专业人员来完成。,在以下情况下需要进行熏蒸,：,在检查和维修之前；,在更换,HEPA,滤器之前；,在移动安全柜之前；,安全柜被严重地污染；,变换使用目的；,长时间未用；,需要熏蒸的其它时间,。,34,操作注意事项34,选购原则,国际安全柜认证,中华人民共和国医药行业标准：,YY0569-2005,选择适合的安全柜级别、类型,生物安全柜选购,35,选购原则国际安全柜认证 选择适合的安全柜级别、类型 生物安全,生物安全的国际符号,描述,安全等级,BSL-,1,安全等级,BSL-,2,安全等级,BSL-,3,安全等级,BSL-,4,普通无害细菌、微生物、病毒,一般性可致病细菌、微生物、病毒,烈性,/,致命细菌、微生物、病毒，可治愈,烈性,/,致命细菌、微生物、病毒，不可治愈,生物安全等级,36,生物安全的国际符号描述安全等级BSL-1安全等级BSL-2安,人间传染的病原微生物名录,37,人间传染的病原微生物名录 37,各生物安全等级适用的生物安全柜,实验室生物安全等级,应用的生物安全等级,所能提供的保护,人员,试验品,环境,1-3,I,可,否,可,1-3,II(A1,A2,B1,B2),可,可,可,4,III,可,可,可,38,各生物安全等级适用的生物安全柜 实验室生物安全等级应用的生物,生物安全柜选购,六大要素：,高效空气过滤器的过滤效果,安全柜的柜体结构和气密性,生物安全柜柜体防泄漏性能测试,优化的气流流速和优良的风机,优良的自感应风机,必备的报警提示功能,39,生物安全柜选购六大要素：39,我需要购买的是生物安全柜还是超净工作台 ？,超净工作台提供的是对样品的保护，对操作者和环境是不提供保护的；广义上的生物安全柜同时提供对操作者、环境和样品的保护。所以，从您需要的保护情况上，可以得出正确的选择,生物安全柜选购问题,40,我需要购买的是生物安全柜还是超净工作台 ？生物安全柜选购问题,我应该购买哪种类型、防护级别的生物安全柜 ？,一般来说，除非需要做一些未知菌种和病毒和活体的研究需要使用三级生物安全柜，二级生物安全柜已经能基本满足我们的正常工作需要。对于不含有毒、放射性、挥发刺激性溶剂的样品的实验，,A1/A2,型生物安全柜就已经满足使用要求，对于医院系统采购，因为病毒及菌种类别较复杂，而且实验条件变化大，建议使用,B2,全排型生物安全柜；,生物安全柜选购问题,41,我应该购买哪种类型、防护级别的生物安全柜 ？生物安全柜选购问,为什么报警装置里面需要有低风速报警？ 在欧美地区，按照欧美的标准，每一台生物安全柜都推荐做一次主要技术指标的校检。我们买回生物安全柜并使用一段时候以后，生物安全柜是否还处于对操作者、环境和样品的正常保护，作为操作使用人员，我们是没有办法知道的，而一旦由于滤膜堆积而造成沉降风速降低，就会产生样品污染可能，如果进风风速降低，那么就可能造成人员被污染。在现有的国情下，我们很难做到每年的技术校检，因为存在不小的费用，所以低风速报警很重要。,生物安全柜选购问题,42,为什么报警装置里面需要有低风速报警？ 在欧美地区，按,我们需要定购一些什么附件？,柜内一般会需要使用一些用电设备，柜内的防溅电源插座是需要的，由于目前国内使用欧洲仪器比较普及，鉴于欧洲电源线的接地和我国的插座不相容，所以会在欧式仪器上产生一定的静电，静电会影响到生物安全柜内垂直沉降的风流，会有一定吸附作用，因此如果可能最好配置一个欧式防溅电源插座。由于柜体操作室内部污染不是很大，最大的污染在负压保护腔内，所以紫外灯系统可以考虑选配，来达到更好的灭菌消毒功能。分体设计的安全柜需要配支架。,生物安全柜选购问题,43,我们需要定购一些什么附件？ 柜内一般会需要使用一些用,在寻求生产商产品认证的同时，用户也需注意以下事项：,1.,当生产商声称自己生产的安全柜符合某项国际标准时，可要求其,出示证明,-,合法的认证机构所签署的独立检测报告；,2.,一些标准可能与安全柜安全性能无直接关联，例如生物安全柜生产商声称获得,ISO9001,质量认证,，而,ISO9001,并不会对安全柜性能进行以上国际安全柜标准的检测；,3.,认证必须是由独立、合法的安全柜认证机构测试和颁布的；,生物安全柜选购问题,44,在寻求生产商产品认证的同时，用户也需注意以下事项：1. 当,谢谢大家！,45,谢谢大家！45,