尿理学及湿化学检验

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,尿理学及湿化学检验,医学检验系,尿液,pH,测定,原理,PH,试纸是多种指示剂适当配合的试带，显色范围为棕红至深黑,器材,洁净试管或尿杯。,试剂,pH,广泛试纸,1,套,(,包括试带和标准色板,),。,标本,新鲜尿液。,操作,将手洗净擦干或配戴手套，取试纸,1,条，将其一端浸入尿液约,0.5s,取出自然光线下与标准色板比色读取尿液,pH,。,注意事项,1,试带应密封、避光、干燥保存，远离酸性和碱性物质以防失效。,2,在规定时间内比色，,1min,内。,3,标本应新鲜，放置过久会因细菌繁殖或丧失挥发性酸而使,pH,增高。,尿比密测定（折射仪法）,目的,熟悉折射仪的工作原理、使用及校正方法。,原理,折射率与媒质的密度有关，密度越高，折射率越大；其次也与光的波长及温度有关。,经过大批量尿标本的研究，已经建立了折射率、比密和总固体量的经验公式，并将数字列成线图刻在目镜系列的适当位置中，测量时直接读数即可。,器材,临床折射计，尿杯、吸水纸、滴管、镊子。,标本,新鲜尿液。,操作,零点校准 每次测试前必须用纯净水进行零点校准：向标本室中加入足够的蒸馏水，轻微调节旋转螺丝使边界线重合在,1.000,刻线上。,标本测定程序 拭干标本室和标本盖上的蒸馏水，在标本室内滴入足够的尿液，通过接目镜读取数值或查表得出结果。,注意事项,1,用过的滤纸、棉球等应及时焚毁，以免污染环境。,2,尿酸盐所致的浑浊可影响结果，需要加温溶解后再测定，切不可弃去。,3,细胞等有形成分增多时，应离心后测定上清液，测试完毕后用纯净蒸馏水擦拭干净。,尿蛋白测定（磺基水杨酸法）,目的 掌握尿蛋白定性的磺基水杨酸法原理及,操作,原理 在酸性条件下，磺基水杨酸的磺酸根离子,与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不容性,的蛋白盐沉淀，沉淀的程度可反映蛋白质,含量。,器材 小试管、滴管、吸管,试剂,200g/l,磺基水杨酸溶液,标本 人工蛋白尿,操作,1,加尿液 取小试管,2,支，各加清晰尿液,lml,。,2,加试剂 于第,1,支试管内滴加磺基水杨酸溶,液,2,滴，轻轻混匀；另,1,支试管不加,试剂作空白对照，,1min,内观察结果。,3,判断结果 按,P70,表,2-2,判断阳性程度及蛋白,质的含量,注意事项,1,该法灵敏，极轻微反应无意义。判断结果应及时，否则会使阳性增高。,2,尿液偏碱时,(pH9),，磺基水杨酸法可呈假阴性；尿液偏酸,(pH3),也会引起蛋白定性假阴性。应先将尿液,PH,值调到,5,6,。,3,含碘造影剂、大剂量青霉素等也可使反应呈假阳性，但其反应与蛋白尿不同，应仔细观察并结合用药情况综合分析。,4,尽量指导患者采集中段尿，或离心后测定。,原理：根据葡萄糖氧化酶法反应原理，葡萄糖氧化酶特异性氧化葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使指示剂氧化而呈现颜色变化。,标本：新鲜尿,器材：一次性尿杯、尿糖试纸,尿葡萄糖定性检查,（一）尿糖试纸法,操作,、将试纸的试垫区浸入样本中约秒钟，并将其取出,、让试纸的边缘沿着样本容器口轻轻撩拭，以去除残余的尿液,、横握试纸，在秒内与瓶签上的比色图谱比较，记录结果。试纸与标准色版相同颜色即为尿样的尿糖值，如反应颜色在两个标准色版颜色之间，则该尿样的尿糖值也介于两者之间。,注意事项,、用清洁干燥的容器收集新鲜尿液并尽快检测，尿样在室温下的放置时间不可超过小时，否则应将尿样保存在冰箱中并在小时内检测，不要在尿样中加防腐剂，尿样不可离心，测试前要将尿样混匀。,注意事项,、温度越低，反应所需要的时间要相应延长,、尿糖浓度时通过试纸由蓝色棕色的颜色变化来指示，蓝色为无尿糖，棕色越深，尿糖越高。,（二）,班氏法,（讲解）,目的 掌握班氏法原理方法,原理 葡萄糖或其他还原性的糖的醛基在热硷性溶液中，能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氢氧化铜，进而形成红色氧化亚铜沉淀,器材 试管架、中试管、滴管、试管夹、酒精灯,试剂 班氏试剂,操作,1,鉴定班氏试剂质量 取中号试管,1,支，加入班氏试剂,2.0ml,，摇动试管徐徐加热至沸腾，观察试剂有无颜色及性状变化，若试剂仍为透明蓝色，可进行以下实验。,2,加尿液 向班氏试剂中加离心后的尿液,0.2ml(,约,4,滴,),，混匀。,3,加热煮沸 继续煮沸,1,2min,，或置沸水浴,5min,，自然冷却。,4,判断结果,注意事项,1,试剂与尿液的比例为,10,：,1,。,2,煮沸时应不时摇动试管以防爆沸喷出，也可在沸水浴中实验。,3,检验糖尿病患者尿液中葡萄糖，应空腹或餐后,2h,留取尿标本。,目的,掌握改良,Rothera,法尿酮体定性的方法。,原理,亚硝基铁氢化钠,Na,2,Fe(CN),5,2H,2,O,遇尿分解为,Na,4,Fe(CN),6,、,NaNO,2,、,Fe(OH),3,和,Fe(CN),5,3-,如尿中存在可检出量的酮体,(,丙酮、乙酰乙酸,),，在碱性环境中即与试剂作用生成异硝基,(HOON=),或异硝基胺,(NH,2,OON=),，后者与,Fe(CN),5,3-,生成紫红色化合物。,器材,试管或载玻片、药匙、滴管。,试剂,Rothera,试剂。,标本,新鲜尿液。,尿酮体测定（改良,Fe(CN),5,3-,法）,操作,1,加入酮体粉,于载玻片上,(,或试管内,),，加入,1,小勺酮体粉。,2,加尿液,滴加尿液于酮体粉上，至完全将酮体粉浸湿。,3,观察结果,观察酮体粉的颜色变化，,5min,内出现紫色者为阳性。,4,判断结果,判断结果的标准见,P76,表,2-5,。,尿酮体测定（改良,Fe(CN),5,3-,法）,作业,1.,列表比较湿化学法与试带法的不同,2.,列表说明,4,个实验的影响因素,