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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,高效液相色谱仪操作条件选择,组员:魏鹏翔、崔建哲、张龙、韩守印、李淼、孙磊。,指导教师:姜洪文,目录,实验目的,实验原理,仪器与试剂,实验步骤,仪器清洗,(结束工作),一、实验目的,掌握色谱分析的原理,掌握高效液相色谱仪的基本结构和工作原理,掌握,SY-8100,高效液相色谱仪的基本操作步骤,掌握,HPLC,条件试验的方法以及分离条件的确定,二、实验原理,本次实验采用,ODS-C18,色谱柱,以甲醇,+,水混合液为流动相,根据混合物中萘、联苯和菲在固定相与流动相间分配性质的不同,进行分离。不同比例的甲醇,+,水混合液为流动相,流动相的极性发生改变,因此混合液的分离条件也发生了改变,选择能将混合液中各组分能充分分离并且相对分析时间短的条件,综合确定,HPLC,法分析萘、联苯、菲的分析条件,完成对混合液的分析。,检测器采用紫外分光(,UV,)检测器,检测波长为,254nm,。,三、仪器与试剂,仪器:,SY-8100,高效液相色谱仪,1,台,KQ-50B,超声波清洗器,1,台,AP-01P,真空泵,1,台,过滤装置,1,套,微量注射器,50L1,支,容量瓶,50mL7,只,药品:,萘(,G.R.,)、联苯(,G.R.,)、菲(,G.R.,)、甲醇(,G.R.,)、二次蒸馏水,四、实验步骤,流动相的准备,1,、流动相的过滤,安装抽滤装置,选用有机相过滤膜,过滤试剂甲醇;选用无机相过滤膜,过滤二次蒸馏水。,2,、流动相的脱气,将盛有过滤好甲醇、二次蒸馏水的试剂瓶分别放于超声波清洗器中,进行脱气处理。,仪器的准备,1,、更换流动相,将,A,泵的输液管放入处理好的甲醇试剂瓶中;,B,泵的输液管放入处理好的二次蒸馏水试剂瓶中。,2,、分别排除,A,、,B,两个泵输液管中的气泡,3,、开启高压泵,A,、高压泵,B,、,UV,检测器、混合器的电源,打开工作站,分析步骤,1,、分别设置两个高压泵的流量,使总流量为,F,1.00mL/min,,分别启动两泵,2,、待基线稳定后,完成标样的分析,记录分析所获得的各组分的保留时间、理论塔板数、分离度。数据填表,3,、选择最佳流动相配比,调整,A,、,B,两泵的流量。待基线稳定后吸取标样,完成分析后建立组分表,再完成试样的分析,测得试样中萘、联苯和菲的含量,完成实验,实验数据,保留时间,分离度,理论塔板,次数,萘,联苯,菲,萘,联苯,菲,萘,联苯,菲,五、仪器的清理(结束工作),更换流动相,将流动相重新更换为处理过的甲醇,以利于色谱柱的保护。,清洗“进样阀”,用适量的甲醇清洗进样器、进样阀,以避免样品组分的残留。,THE END,THANKS,PPT,模板下载:行业,PPT,模板:,节日,PPT,模板:素材下载:,PPT,背景图片:图表下载:,优秀,PPT,下载:教程:,Word,教程:教程:,资料下载:课件下载:,范文下载:试卷下载:,教案下载:,
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