茶叶中咖啡碱含量的测定（精品）

*,*,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,茶叶中咖啡碱含量的测定,紫外分光光度法,制作人：汪小钢,实验目的,咖啡碱是茶汤中苦味的重要物质基础，它具有兴奋神经中枢和利尿等药理功能，对茶叶品质有非常重要的影响。因此，测定其含量是化学评价茶叶品质的需要。,老人、儿童以及一些不适应咖啡碱人群需要饮用低（或无）咖啡碱茶叶及其制品，对它们进行咖啡碱含量测定也是必需的。,茶叶深加工和综合利用的需要。,实验原理,咖啡碱易溶于水，在,274nm,左右有强烈的吸收。由于茶叶中儿茶素、没食子酸等多酚类物质在同一波长范围内也有很强的吸收，因此需要用碱式醋酸铅等先除去茶汤中多酚等干扰物质，然后再用紫外可见分光光度计在,274nm,测定咖啡碱的吸光度值，根据咖啡碱的标准曲线求得茶汤中咖啡碱的浓度，以此计算茶叶或相关制品中咖啡碱的含量。,试剂,碱式乙酸铅溶液：称取碱式醋酸铅,50,克 溶于,100,毫升水中，静置过夜，倾出上清液过滤备用。,0.01M,盐酸溶液：取盐酸,0.9,毫升，加水稀释至,1,升，摇匀。,4.5M,硫酸溶液：取硫酸,250,毫升，用水稀释至,1,升，摇匀。,咖啡碱标准溶液：称取咖啡碱（纯度不低于,99%,）,100,毫克，溶于,1000,毫升水中，此溶液咖啡碱浓度为,100 ug/ml,。,主要仪器,紫外分光光度计,分析天平。,测定方法（,I,）,标准曲线的制作,分别吸取,0,、,1,、,2,、,5,、,10,、,12 ml,咖啡碱标准溶液于一组,100 ml,容量瓶中，各加入,0.01M,盐酸,4.0 ml,，加水定容，混匀。,用,10 mm,石英比色皿，于波长,274 nm,处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度。,以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并求出回归方程。,测定方法（,II,）,茶汤制备：称取磨碎茶样,3 g,于,500 ml,锥形瓶内，加沸水,450 ml,，于沸水浴中加热,45 min,，每隔,10 min,摇瓶一次。抽滤，并用热水洗涤,2,3,次，滤液移入,500 ml,容量瓶中，冷却后加水定容。,测定：准确吸取茶汤,25 ml,于,250 ml,容量瓶中，加,0.01M,盐酸溶液,10 ml,、碱式醋酸铅,2 ml,，加水定容，混匀，静置过滤。吸取滤液,50 ml,于,100 ml,容量瓶中，加,4.5M,硫酸溶液,0.2 ml,，加水定容，摇匀，过滤。用,10 mm,比色皿，于波长,274 nm,处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度。将所测吸光度值代入回归方程计算出茶汤中咖啡碱的浓度。,结果计算,测试效果,此方法是我国现行标准方法，其测定值由于茶叶中其它嘌呤类化合物茶叶碱、可可碱等的影响而略偏高，但重现性好，建议每个样品做三个平行。,