实验二球菌杆菌

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验二球菌，杆菌,化脓性球菌,革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌,革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌,N.gonorrhoeae,N.meningitidis,S.pneumoniae,staphylococcus,Streptococcus,菌落中等大小、不透明、表面光滑、边缘整齐,完全溶血、,金黄色,金黄色葡萄球菌,不溶血、白,色,表皮葡萄球菌,不溶血、,柠檬色,腐生葡萄球菌,葡萄球菌鉴别,菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐,G+,、链状,完全溶血,乙型,溶血性,链球菌,不溶血,丙型,溶血性,链球菌,草绿色不完全溶血环,甲型链球菌 肺炎链球菌,胆汁溶菌试验,-,（混浊）,+,（澄清）,链球菌鉴别,脓汁或,喉拭子,涂片、革兰染色、镜检,血琼脂平板,观察菌落特征,及溶血情况,生化反应、致病力试验及药敏试验,脓汁标本病原性球菌的分离鉴定,由,脑脊液标本,中发现中性粒细胞内外有,G,-,双球菌,，可初步诊断为,脑膜炎球菌,由,泌尿、生殖系统来源的标本,中发现中性粒细胞内外有,G,-,双球菌,，可初步诊断为,淋球菌,37 24h,脓汁标本病原性球菌的分离鉴定,根据菌落特点及涂片检查作出初步判断，然后：,菌落中等大小、完全溶血、不透明、金黄色、,G+,，葡萄状排列，可能是,金黄色葡萄球菌,，可进一步做血浆凝固酶试验和甘露醇发酵试验，确定其致病力。,菌落小、半透明、完全溶血、,G+,、链状，为,乙型溶血性链球菌,菌落小、半透明、绿色不完全溶血环，,G+,、短链状，为,甲型溶血性链球菌,或,肺炎链球菌，,通过胆汁溶菌和菊糖发酵试验进一步鉴别。,葡萄球菌血浆凝固酶试验,取一个载玻片，划分,3,格，标记,1,、,2,、,3,。,在格内分别滴加：,1,：兔血浆一滴,2,：兔血浆一滴,3,：盐水一滴,以接种环挑取细菌混悬于液滴中：,1,：金黄色葡萄球菌,2,：白色葡萄球菌,3,：金黄色葡萄球菌,立即观察结果。,粪便标本肠道杆菌的分离鉴定,克氏双糖铁,培养基,尿、靛、动,培养基,分析结果,SS,平板,EMB,平板,挑取可疑菌落,玻片凝集试验,粪便,SS,平板分离肠道病原菌的强选择培养基,成分和作用,：,基础培养基,：提供氮源和碳源,胆盐、枸橼酸钠、煌绿,：可抑制肠道非致病菌的生长，而对肠道致病菌抑制作用弱。,乳糖，中性红,（,，红橙黄）：致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨产生碱性物质菌落淡黄色；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈红色,病原菌,:,小,无色,半透明,非致病菌,:,大,红色,EMB,（,Eosin Methyl Blue),平板分离肠道病原菌的弱选择培养基,成分和作用,：,基础培养基,：提供氮源和碳源,伊红、美蓝：可抑制肠道非致病菌的生长，而对肠道致病菌抑制作用弱。,乳糖，,伊红、美蓝：致病菌不分解乳糖菌落,无色半透明,；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈,紫黑色,病原菌,:,半透明,无色,非致病菌,:,紫黑色,克氏双糖铁培养基,接种方法,如何观察,上层含乳糖部分,乳糖发酵：致病菌红色，非致病菌黄色,H,2,S,然后观察下层,发酵葡萄糖（产酸产气）,动力,乳糖,硫酸亚铁,固体,葡萄糖,半固体,指示剂,:,酚红,乳糖 葡萄糖 硫化氢 尿素 靛基质 动力,大肠杆菌 黄色,+-+,痢疾杆菌 红色,+-+/-,伤寒杆菌 红色,+/-,+,副伤寒杆菌 红色,+-,+,变形杆菌 红色,+,+/-,+,肥达试验,(Widal Test),原理：用已知伤寒沙门菌,O,、,H,抗原，以及甲型副伤寒、肖氏沙门菌、希氏沙门菌,H,抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。,用途：辅助诊断伤寒，副伤寒,方法,：,取小试管,32,支，分成,4,排，每排,8,支，依次标号。,于小试管内各加入,0.5ml,生理盐水。,在每一排第,1,管中各加患者血清,0.5ml,，吸打混匀，吸取,0.5ml,加入第,2,管作对倍稀释,依次稀释至第,7,管弃去,0.5ml,，第,8,管为对照。,23,排按同法稀释。,按,8.7.1,列的顺序,，分别对第,1,排各管加入伤寒,H,抗原,0.5ml,；第,2,排各管加入,O,抗原,0.5ml,；同样对第,3,排各管加甲型副伤寒（,PA,）,H,抗原,0.5ml,；第,4,排各管加乙型副伤寒（,PB,）,H,抗原,0.5ml,。,将各管混匀，置,37,水浴箱中,1618,小时后观察结果。,肥达试验,结果观察,根据凝集反应的强弱，分别以“,+,、,+,、,+,、,+”,记录：,+,：液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底。,+,：液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底。,+,：液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物。,+,：液体较混浊，可见极少量凝集物。,-,：液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点（与对照管相似）。,血清效价（或滴度）,：能与一定量的抗原发生肉眼可见的明显凝集（即“,+”,凝集）的血清最高稀释倍数，称为血清的效价。血清的效价代表着血清中抗体的含量，其效价愈高，所含抗体的量愈多。如血清最低稀释倍数（,140,）仍无凝集，则视为阴性或效价低于,140,；如血清的最高稀释倍数（,11280,）仍完全凝集，则示血清效价高于,11280,。,