API使用培训

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20E,氧,化,化,酶,酶-,革,兰,兰,氏,氏,阳,阳,性,性,杆,杆,菌,菌,分,分,类,类,革兰氏阳性杆菌,触,酶,酶-,触,酶,酶+,短,小,小,脱,脱,色,色,含,含,有,有,异,异,染,染,颗,颗,粒,粒,slightdiscoloration,(granulations),短,球,球,杆,杆,菌,菌,延,长,长,状,状,杆,杆,菌,菌,细,小,小,不,不,透,透,光,光,菌,菌,落,落,20-25,C,有,有,动,动,力,力,37,C,无,无,动,动,力,力,李斯特菌鉴定,API Listeria,乳酸菌鉴定,API 50CHL,棒状杆菌鉴定,API Coryne,大,体,体,积,积,产,产,芽,芽,孢,孢,杆,杆,菌,菌,芽孢菌鉴定,API 50CHB,定,向,向,试,试,验,验,革,兰,兰,氏,氏,阳,阳,性,性,球,球,菌,菌,分,分,类,类,革兰氏阳性球菌,凝固,酶,葡萄球菌鉴定,API STAPH,触,酶,酶-,触,酶,酶+,金,黄,黄,色,色,萄,萄,葡,葡,球,球,菌,菌,溶,血,血,链球菌鉴定,API STREP,+,-,-,在,在,细,细,菌,菌,学,学,里,里,最,最,普,普,遍,遍,的,的,染,染,色,色,方,方,法,法,革,兰,兰,氏,氏,染,染,色,色,步,骤,骤,G(,),G(,),-,染,染,色,色,前,前,,,,,所,所,有,有,细,细,胞,胞,是,是,透,透,明,明,的,的,-,结,结,晶,晶,紫,紫,着,着,色,色,後,後,用,用,碘,碘,增,增,加,加,染,染,料,料,与,与,菌,菌,体,体,结,结,合,合,-,乙,乙,醇,醇,从,从,G(,),菌,体,体,洗,洗,脱,脱,结,结,晶,晶,紫,紫,-,用,用,番,番,红,红,液,液,复,复,染,染,,,,,革,革,兰,兰,氏,氏,阴,阴,性,性,菌,菌,呈,呈,粉,粉,红,红,色,色,,,,,革,革,兰,兰,氏,氏,阳,阳,性,性,菌,菌,呈,呈,兰,兰,紫,紫,色,色,接,解,解,酶,酶,试,剂,剂,-,原,原,理,理,-,传,传,统,统,方,方,法,法,H,2,O,2,2,H,2,O+O,2,接,解,解,酶,酶,玻,片,片,法,法,试,管,管,法,法,氧,化,化,酶,酶,试,试,验,验,-,原,原,理,理:,TMPD,氧,化,化,TMPD,氧,化,化,酶,酶,(TMPD=2,甲,甲,基,基,一,一,对,对,一,一,苯,苯,撑,撑,二,二,胺,胺),货号:55922,纸片:,浸,浸泡饱,和,和,TMPD,储存:2-8,C,于暗处,有效期:1,年,年,组成:2,x30,片小瓶,装,装,纸片,货号:70460,储存:2-30,C,于暗处,组成:1个,小,小瓶,液,体,体试剂,(深紫,色,色),(透明),氧化酶,纸,纸片法,液体,氧,氧化酶,试,试剂,试剂方,法,法:,-用2个试,管,管载1-2ml无菌,水,水,-第,一,一管为,阴,阴性对,照,照:,加,加一滴OX试,剂,剂,-第,二,二管为,测,测试管:加,可,可疑菌,落,落然,后再加,二,二滴OX试剂,-比,较,较二支,管,管的颜,色,色:,阴,性,性对照:,透明,浅,浅紫,色,色,结,果,果:,OX(-):透,明,明,浅,紫,紫色,OX(+):,紫,紫色,深,紫,紫色,生化鉴,定,定,容易使,用,用,API,结,结果,原理:,-生,化,化结果,组,组合跟,资,资料库,內,內的典,型,型条目(Taxa),作,作出比,较,较,-经,计,计算後,,,,,鉴定百,比,比率(%Id,),)机,会,会率,,指,指示出,不,不同菌,类,类的比,较,较,T值(T index)=,指,指示出,在,在同一,個,個菌类,的,的相似,程,程度,生化鉴,定,定,可靠及,具,具创意,的,的选择,最典型,生化普,菌种X,T,值,资料库,生化结,果,果,(菌种X),(菌種X),API,结,结果,跟据T,值,值及%Id的,组,组合,,作,作出评,语,语:,(i)Excellent Identification%Id,99.9及T,0.75,(ii)VerygoodIdentification%Id,99.9及T,0.75,(iii)Good Identification%Id,90.9及T,0.25,(iv)AcceptableIdentification%Id,80.0及T,0,(v)Doubtfulprofile其,中,中一个,生化反,应,应出现,严,严重违,反,反典型,生,生化结,果,果,API20E/Rapid20E,-,肠,肠道杆,菌,菌科,细菌在,环,环境中,及,及动物,产,产品中,非,非常普,遍,遍,其,中,中部份(沙,门,门氏、,耶,耶尔森,氏,氏)是,致,致病菌,-API20E,是,是常规,鉴,鉴定中,的,的标准,-其,他,他新鉴,定,定系统,比,比较的,金,金标准,-方,便,便使用,,,,4或24小,时,时出报,告,告,API20E,试剂条,接,接种要,点,点,先做氧,化,化酶试,验,验,氧,化,化酶为,阴,阴性时,接,接种,API20E,氧化酶,为,为阳性,时,时接种,API20NE,试剂条,塑料培,养,养盒中,加,加水5,ml,放入试,剂,剂条,,记,记录标,本,本资料,。,。,取1个1mm大小,1824hr菌龄,的,的菌落,,,,分散,于,于5ml悬浮,液,液(20150)中,,,,使达0.5,MacFarland,浊度。,小心沿,内,内壁加,菌,菌悬液,到,到微量,生,生化杯,中,中。其,中,中:有,U,形框标,记,记的项,目,目(,CIT,、,、VP,、,、GEL),,将菌液,加,加满;,有,有下划,线,线标记,的,的(,ADH,、,、LDH、ODC、H,2,S、URE、),,加好菌,悬,悬液后,,,,用无,菌,菌液体,石,石蜡封,口,口。,剩余的,菌,菌液可,用,用于涂,玻,玻片、,染,染色,,接,接种于,非,非选择,性,性平板,做,做次代,培,培养。,盖好孵,育,育盒盖,,,,放置,几,几分钟,,,,观察,每,每个微,量,量杯都,应,应呈阴,性,性反应,的,的颜色,。,。,孵育盒,放,放入37摄氏,度,度温箱,培,培养24小时,。,。,API20E,反应结,果,果阅读,要,要领(,),一、若,GLU,(,(,葡萄糖,),)为阳,性,性,则,记,记录,GLU,的结果,,,,在,TDA,、,、IND、VP,孔中加,入,入相应,的,的附加,试,试剂,1分钟,内,内读取,TDA,、,、IND,的结果,,,,510分,钟,钟内读,取,取,VP,的结果,。,。同时,读,读并记,录,录取其,它,它反应,的,的结果,,,,用生,化,化鉴定,结,结果组,成,成一个7位数,编,编码。,二、若,GLU(,葡萄糖)为阴,性,性,但,有,有多于2个的,反,反应呈,阳,阳性,,则,则按上,述,述方法,读,读取并,记,记录结,果,果。,三、若,GLU,(,(,葡萄糖,),)为阴,性,性(非,发,发酵菌,),),且,其,其它呈,阳,阳性的,反,反应不,多,多于2,个,个,则,不,不要加,试,试剂,,放,放回温,箱,箱中再,培,培养24hr,后,按第一,条,条的方,法,法读取,结,结果。,同,同时用,次,次代培,养,养物接,种,种2个,APIOF,培养基,证,证实葡,萄,萄糖代,谢,谢类型,;,;接种1个,APIM,培养基,观,观察动,力,力;划,线,线接种MacConkey,平,平板。,培,培养24hr,后,后将其,结,结果记,录,录到,API20E,报告单,,,,与生,化,化鉴定,结,结果一,起,起得到,一,一个9,位,位数编,码,码。,API20E,反应结,果,果阅读,要,要领(,),ONPG:,淡黄色,黄色,为,为阳性,,,,无色,为,为阴性,。,。,ADH,、,、LDC、ODC、URE,以苯酚,红,红为指,示,示剂,,橙,橙色,红,红色为,阳,阳性,,黄,黄色为,阴,阴性。,CIT,:,:,管口处,出,出现兰,色,色为阳,性,性,黄,色,色绿,色,色为阴,性,性。,H,2,S:,黑色,为,为阳,性,性,,无,无色,浅,灰,灰色,为,为阴,性,性。,TDA、IND、VP,加试,剂,剂后,出,出现,红,红色,为,为阳,性,性,不出,现,现红,色,色为,阴,阴性,。,。,GEL:,黑色,素,素扩,散,散为,阳,阳性,,,,不,扩,扩散,为,为阴,性,性。,GLUARA,为糖,类,类的,酸,酸化,反,反应,,,,指,示,示剂,溴,溴百,里,里香,酚,酚兰,显,显黄,色,色为,阳,阳性,,,,蓝,、,、绿,色,色为,阴,阴性,。,。,GLU,为阴,性,性时,,,,记,录,录其,结,结果,,,,并,在,在,GLU,孔中,按,按先,后,后顺,序,序分,别,别加,一,一滴,NIT1,和,NIT2,试剂,,,,出,现,现红,色,色时,NO,2,为阳,性,性,,N,2,为阴,性,性;,不,不出,现,现红,色,色时,,,,加,少,少许Zn,粉,粉,,此,此时,出,出现,红,红色,,,,则,NO,2,为阴,性,性,,N,2,为阳,性,性。,有动,力,力,,MOB,为阳,性,性,,无,无动,力,力则,为,为阴,性,性。,麦康,凯,凯平,板,板上,生,生长,,,,McC,为,为阳,性,性,,不,不生,长,长为,阴,阴性,OF,培养,管,管下,部,部变,色,色为,发,发酵,型,型,,OF-F,为阳,性,性,,下,下部,不,不变,色,色,OF-F,为阴,性,性;,OF,培养,管,管上,部,部变,色,色为,发,发酵,型,型,OF-O,为,为阳,性,性,,上,上部,不,不变,色,色OF-O为,阴,阴性,API20E,反应,结,结果,阅,阅读,要,要领,(,(,),),API20NE,-,非,非发,酵,酵G(-)杆,菌,菌存,在,在,于空,气,气、,水,水及,表,表面,-,部,部份,细,细菌,(,(如,绿,绿脓,假
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