微生物代谢与调控

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第五章 微生物代谢与调控,新陈代谢：,发生在活细胞中的各种分解代谢（catabolism）和合成代谢（anabolism）,的总和。,新陈代谢=分解代谢+合成代谢,分解代谢：,指复杂的有机物分子通过分解代谢酶系的催化，产生简单分子、腺苷三磷酸（ATP）形式的能量和还原力的作用。,合成代谢：,指在合成代谢酶系的催化下，由简单小分子、ATP形式的能量和还原力一起合成复杂的大分子的过程。,1、代谢概论,复杂分子,（有机物）,分解代谢,合成代谢,简单小分子,ATP,H,物质代谢：物质在体内转化的过程.,能量代谢：伴随物质转化而发生的能量形式相互转化,.,按代谢产物在机体中作用不同分：,初级代谢：提供能量、前体、结构物质等生命活动所,必须的代谢物的代谢类型；产物：氨基酸、核苷酸等,.,次级代谢：在一定生长阶段出现非生命活动所必需的代谢类型；产物：抗生素、色素、激素、生物碱等,按物质转化方式分：,分解代谢：指细胞将大分子物质降解成小分子物质，并在 这个过程中产生能量。,合成代谢：是指细胞利用简单的小分子物质合成复杂大分子的过程。在这个过程中要消耗能量。,一切生命活动都是耗能反应，因此，能量代谢是一切生物代谢,的核心问题。,能量代谢的中心任务，是生物体如何把外界环境中的多种形式的,最初能源转换成对一切生命活动都能使用的通用能源-ATP。,这就是产能代谢。,最初,能源,有机物,还原态无机物,日光,化能异养微生物,化能自养微生物,光能营养微生物,通用能源,（ATP）,生物氧化作用：细胞内代谢物以氧化作用释放（产生）能量的化学反应。氧化过程中能产生大量的能量，分段释放，并以高能键形式贮藏在ATP分子内，供需时使用。,生物氧化的方式,：,和氧的直接化合：,C,6,H,12,O,6,+6O,2,6CO,2,+6H,2,O,失去电子：Fe,2+,Fe,3+,+e,-,化合物脱氢或氢的传递:CH,3,-CH,2,-OH CH,3,-CHO,NAD,NADH,2,生物氧化的概念,2、微生物的能量代谢,生物氧化就是发生在或细胞内的一切产能性氧化反应的总称,生物氧化的功能：,产能(ATP),产还原力,【,H,】,小分子中间代谢物,生物氧化的过程,一般包括三个环节：,底物脱氢（或脱电子）作用（该底物称作电子供体或供氢体）,氢（或电子）的传递（需中间传递体，如NAD、FAD等）,最后氢受体接受氢（或电子）（最终电子受体或最终氢受体）,底物脱氢的途径,(1)、EMP途径,(2)、HMP,(3)、ED,(4)、TCA,2.1化能异养微的生物氧化,底物脱氢的途径,葡萄糖的酵解作用,(又称：Embden-Meyerhof-Parnas,途径，简称：,EMP,途径,),活化,移位,氧化,磷酸化,葡萄糖激活的方式,己糖异构酶,磷酸果糖激酶,果糖二磷酸醛缩酶,甘油醛-3-磷酸脱氢酶,磷酸甘油酸激酶,甘油酸变位酶,烯醇酶,丙酮酸激酶,葡萄糖经转化成6-磷酸葡萄糖酸后，在6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的催化下，裂解成5-磷酸戊糖和,CO,2,。,磷酸戊糖进一步代谢有两种结局，,磷酸戊糖经转酮转醛酶系催化，又生成磷酸己糖和磷酸丙糖（3-磷酸甘油醛），磷酸丙糖借,EMP,途径的一些酶，进一步转化为丙酮酸。称为不完全,HMP,途径。,由六个葡萄糖分子参加反应，经一系列反应，最后回收五个葡萄糖分子，消耗了1分子葡萄糖（彻底氧化成,CO,2,和水），称完全,HMP,途径。,HMP途径(戊糖磷酸途径)（Hexose Monophophate Pathway）,耗能阶段,C,6,2C,3,产能阶段,4,ATP 2ATP,2C,3,2,丙酮酸,2,NADH,2,C,6,H,12,O,6,+2NAD,+,+2ADP+2Pi 2CH,3,COCOOH+2NADH,2,+2H,+,+2ATP+2H,2,O,HMP途径的总反应,HMP途径的重要意义,为核苷酸和核酸的生物合成提供戊糖,-,磷酸。,产生大量,NADPH2，,一方面为脂肪酸、固醇等物质的合成提供还原力，另方面可通过呼吸链产生大量的能量。,与,EMP,途径在果糖,-1,，,6-,二磷酸和甘油醛,-3-,磷酸处连接，可以调剂戊糖供需关系。,途径中的赤藓糖、景天庚酮糖等可用于芳香族氨基酸合成、碱基合成、及多糖合成。,途径中存在,37,碳的糖，使具有该途径微生物的所能利用利用的碳源谱更为更为广泛。,通过该途径可产生许多种重要的发酵产物。如核苷酸、若干氨基酸、辅酶和乳酸（异型乳酸发酵）等。,HMP,途径在总的能量代谢中占一定比例，且与细胞代谢活动对其中间产物的需要量相关。,又称2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡糖酸（KDPG）裂解途径。,存在于多种细菌中（革兰氏阴性菌中分布较广）。ED途径可不依赖于EMP和HMP途径而单独存在，是少数缺乏完整EMP途径的微生物的一种替代途径，未发现存在于其它生物中。,ED途径,ATP ADP NADP,+,NADPH,2,葡萄糖 6-磷酸-葡萄糖 6-磷酸-葡萄酸,激酶,（,与EMP途径连接,）,氧化酶,(与HMP途径连接),EMP途径 3-磷酸-甘油醛,脱水酶,2-酮-3-脱氧-6-磷酸-葡萄糖酸,EMP途径 丙酮酸,醛缩酶,有氧时与TCA环连接,无氧时进行细菌发酵,ED途径的特点,葡萄糖经转化为2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸后，经脱氧酮糖酸醛缩酶催化，裂解成丙酮酸和3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛再经EMP途径转化成为丙酮酸。结果是1分子葡萄糖产生2分子丙酮酸，1分子ATP。,ED,途径的特征反应是,关键中间代谢物,2-,酮,-3-,脱氧,-6-,磷酸葡萄糖酸（,KDPG）,裂解为丙酮酸和,3-,磷酸甘油醛。,ED,途径的特征酶是,KDPG,醛缩酶,.,反应步骤简单，产能效率低,.,此途径可与,EMP,途径、,HMP,途径和,TCA,循环相连接，可互相协调以满足微生物对能量、还原力和不同中间代谢物的需要。好氧时与,TCA,循环相连，厌氧时进行乙醇发酵,.,ED途径的总反应,ATP,C6H,12,O,6,ADP,KDPG,ATP 2ATP NADH,2,NADPH,2,2,丙酮酸,6,ATP 2,乙醇,(,有氧时经过呼吸链,),（无氧时进行细菌乙醇发酵）,关键反应：2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸的裂解,催化的酶：6-磷酸脱水酶，KDPG醛缩酶,相关的发酵生产：细菌酒精发酵,优点：代谢速率高，产物转化率高，菌体生成少，代谢副产物少，发酵温度较高，不必定期供氧。,缺点：pH5，较易染菌；细菌对乙醇耐受力低,由表可见，在微生物细胞中，有的同时存在多条途径来降解葡萄糖，有的只有一种。在某一具体条件下，拥有多条途径的某种微生物究竟经何种途径代谢，对发酵产物影响很大。,TCA循环,丙酮酸在进入三羧酸循环之,先要脱羧生成乙酰,CoA，,乙酰,CoA,和草酰乙酸缩合成柠檬酸再进入三羧酸循环。,循环的结果是乙酰,CoA,被彻底氧化成,CO,2,和,H,2,O，,每氧化1分子的乙酰,CoA,可产生12分子的,ATP，,草酰乙酸参与反应而本身并不消耗。,TCA循环的重要特点,（1）循环一次的结果是乙酰CoA的乙酰基被氧化为2分子CO,2,并重新生成1分子草酰乙酸；,（2）整个循环有四步氧化还原反应，其中三步反应中将NAD,+,还原为NADH+H,+，,另一步为FAD还原；,（3）为糖、脂、蛋白质三大物质转化中心枢纽。,（4）循环中的某些中间产物是一些重要物质生物合成的前体；,（5）生物体提供能量的主要形式；,（6）,为人类利用生物发酵生产所需产品提供主要的代谢途径。如柠檬酸发酵；Glu发酵等。,中间代谢产物,分解代谢起源,在生物合成中的作用,葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-6-磷酸,核糖-5-磷酸,赤藓糖-4-磷酸,磷酸烯醇式丙酮酸,丙酮酸,3-磷酸甘油酸,a-酮戊二酸,草酰乙酸,乙酰辅酶A,葡萄糖 半乳糖 多糖,EMP途径,HMP途径,HMP途径,EMP途径,EMP途径 ED途径,EMP途径,三羧酸循环,三羧酸循环,丙酮酸脱羧 脂肪氧化,核苷糖类,戊糖 多糖贮藏物,核苷酸 脱氧核糖核苷酸,芳香氨基酸,芳香氨基酸 葡萄糖异生 CO,2,固定,胞壁酸合成 糖的运输,丙氨酸 缬氨酸 亮氨酸 CO,2,固定,丝氨酸 甘氨酸 半胱氨酸,谷氨酸 脯氨酸 精氨酸 赖氨酸,天冬氨酸 赖氨酸 蛋氨酸 苏氨酸 异亮氨酸,脂肪酸 类异戊二烯 甾醇,递氢、受氢和ATP的产生,经上述脱氢途径生成的NADH、NADPH、FAD等还原型辅酶通过呼吸链等方式进行递氢，最终与受氢体（氧、无机或有机氧化物）结合，以释放其化学潜能。,根据,递氢特别是受氢过程中氢受体性质的不同,把微生物能量代谢分为呼吸作用和发酵作用两大类.,发酵作用,：没有任何外援的最终电子受体的生物氧化模；,呼吸作用,：有外援的最终电子受体的生物氧化模式；,呼吸作用又可分为两类：,有氧呼吸最终电子受体是分子氧O,2,;,无氧呼吸最终电子受体是O,2,以外的,无机氧化物，如NO,3,-,、SO,4,2-,等.,概念：在生物氧化中发酵是指无氧条件下，底物脱氢后所产生的还原力不经过呼吸链传递而直接交给一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。在发酵工业上，发酵是指任何利用厌氧或好氧微生物来生产有用代谢产物的一类生产方式。,发酵途径：葡萄糖在厌氧条件下分解葡萄糖的产能途径主要有,EMP、HMP、ED,和,PK,途径。,发酵类型：在上述途径中均有还原型氢供体,NADH+H,+,和,NADPH+H,+,产生，但产生的量并不多，如不及时使它们氧化再生，糖的分解产能将会中断，这样微生物就以葡萄糖分解过程中形成的各种中间产物为氢（电子）受体来接受,NADH+H+,和,NADPH+H+,的氢（电子），于是产生了各种各样的发酵产物。,根据发酵产物的种类有乙醇发酵、乳酸发酵、丙酸发酵、丁酸发酵、混合酸发酵、丁二醇发酵、及乙酸发酵等。,发酵作用,酵母型酒精发酵,同型乳酸发酵,丙酸发酵,混合酸发酵,2,3丁二醇发酵,丁酸发酵,丙酮酸的发酵产物,C,6,H,12,O,6,2CH,3,COCOOH,2CH,3,CHO,2CH,3,CH,2,OH,NAD,NADH,2,-2CO,2,EMP,2ATP,乙醇脱氢酶,酵母菌的乙醇发酵：,该乙醇发酵过程只在pH3.54.5以及厌氧的条件下发生。,A、乙醇发酵,当发酵液处在碱性条件下，酵母的乙醇发酵会改为甘油发酵。,原因：该条件下产生的乙醛不能作为正常受氢体，结果2分子乙醛间发生歧化反应，生成1分子乙醇和1分子乙酸；,CH,3,CHO+H,2,O+NAD,+,CH,3,COOH+NADH+H,+,CH,3,CHO+NADH+H,+,CH,3,CH,2,OH+NAD,+,此时也由磷酸二羟丙酮担任受氢体接受3-磷酸甘油醛脱下的氢而生成,-磷酸甘油，后者经-磷酸甘油酯酶催化，生成甘油。,2葡萄糖 2甘油+乙醇+乙酸+2CO,2,丙酮酸,CO,2,乙醛,NADH,NAD+,乙醇,磷酸二羟基丙酮,NADH,NAD+,磷酸甘油,甘油,3%的亚硫酸氢钠（或pH7）,Saccharomyces cerevisiae厌氧发酵,酵母菌的一型和二型发酵原理,（磺化羟基乙醛）,概念：有氧条件下，发酵作用受抑制的现象（或氧对发酵的抑制现象）,。,意义：合理利用能源,通风对酵母代谢的影响,通风（有氧呼吸）,缺氧（发酵）,酒精生成量,耗糖量/单位时间,细胞的繁殖,低（接近零）,少,旺盛,高,多,很弱至消失,巴斯德效应(,The Pasteur effect),现象：,巴斯德效应（Pasteur effect）机理,巴斯德在研究酵母的酒精发酵时发现：厌氧条件下酵母菌进行酒精发酵，葡萄糖的消耗速度很快；而在有氧条件下，酵母菌进行呼吸作用，糖的消耗速度较低，酒精产量也降低。,呼吸抑制发酵作用的的现象,巴斯德效应的本质是能荷调节。,三磷酸腺苷(ATP)是为许多反应提供能量的高能磷酸化物,细胞中的ATP、ADP和AMP含量处于相对平衡的状态细胞中