实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量

,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Third level,Fourth level,Fifth level,*,/10,在线答疑：,yanjie, S,大,学,通,用,化,学,实,验,技,术,紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中,的维生素,C,含量,实验,93,紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的,维生素,C,含量,93.1,实验目的,(1)掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。,(2)掌握,水果（或蔬菜）中的,维生素,C,含量的,测定方法。,93.2,实验原理,紫外快速测定维生素,C,法，是根据维生素,C,具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于,243 nm,处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素,C,的含量。,（一）标准曲线的制作,1,抗坏血酸标准溶液的配制：用分析天平准确称取抗坏血酸,10 mg,，加,2 mL 10%,盐酸，加蒸馏水定容至,100 mL,，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为,100 g,mL,-1,。,93.3,操作步骤,2.,标准曲线的绘制,1,2,3,4,5,6,7,8,标准抗坏血酸溶液加入体积,/mL,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.8,1.0,9.9,9.8,9.7,9.6,9.5,9.4,9.2,9.0,总体积,/mL,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,抗坏血酸溶液浓度,/(g,mL,-1,）,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0,10.0,3,消光值的测定：以蒸馏水为空白，在,243 nm,处测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值，以抗坏血酸的含量（,g,）为横坐标，以相应的消光值为纵坐标作标准曲线。,（二）样品的测定,1,样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。称取,5.00 g,于研体中，加入,2,5 mL 1%,HCl,，匀浆，转移到,25 mL,容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（,10000 g,10 min,）来消除。,2,样品的测定：取,0.1,0.2 mL,提取液，放入盛有,0.2,0.4 mL 10%,盐酸的,10 mL,容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为空白，在,243 nm,处测定其消光值。,3,待测碱处理液的制备：分别吸取,0.1,0.2 mL,提取液，,2 mL,蒸馏水和,0.6,0.8 mL 1 mol,L,-1,NaOH,溶液依次放入,10 mL,容量瓶中，混匀，,15min,后加入,0.6,0.8 mL 10%,HCl,，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白。在,243 nm,处测定其消光值。,4,由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和标准曲线，即可计算出样品中维生素,C,的含量。,5,也可直接以待测碱处理液为空白，测出待测液的消光值，通过查标准曲线，计算出样品的维生素,C,的含量。,93.4,计算,V,总,维生素,C,的含量（,g/g,）,=,V,1,W,总,式中：,从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量,（,g,）,V,1,测消光值时吸取样品溶液的体积（,mL,）,V,总,样品定容体积（,mL,）,W,总,称样重量（,g,）,93.5,问题讨论,（）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法,?,（,1,）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法,?,答：一、氧化还原法,1.,直接碘量法,2.2,6-,二氯酚靛酚滴定法,二、分光光度法,1.,紫外快速测定法,2.2,4-,二硝基苯肼法,3.,高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸,三、光电比浊法,四、电化学法,五、荧光分析法,1.,抗坏铁酸的微量荧光测定法,2.,抗坏铁酸总量的荧光测定法,93.6,参考答案,