实验七荧光显微镜的使用及观察

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,实验七 荧光显微镜的使用及观察,一、实验目的与要求：,了解荧光显微镜的构造及其维护方法。掌握荧光显微镜的使用方法和使用中的注意事项。学习胼脂质荧光的观察方法。,二、实验材料和仪器：,荧光显微镜、镊子、解剖针、盖玻片、载玻片、脱色苯胺蓝染色液、蒸馏水、拟南芥开花植株。,三、实验内容与方法：,1.,观察荧光显微镜的结构、练习使用荧光显,微镜。,2.,花粉四分体胼胝质壁的观察。,3.,花粉粒在柱头上的萌发和花粉管的生长。,四、作业：,1,、描述在荧光显微镜下所观察到的实验现象。,2,、绘拟南芥花粉四分体的形态图。,激发滤片,型号,允许通过的波长,配用的阻断滤片,应用,UV,365W,410W,硫代黄素荧光,染色和,FITC,V,410,420W,460W,单胺荧光,BV,404,435W,515W,、,530W,吖啶橙,B,490W,515W,FITC,和金胺,G,520,550W,580W,TRITC,和佛根,反应荧光染色,荧光显微镜的配套滤片,荧光显微镜使用方法,1,打开灯源，超高压汞灯要预热几分钟才能达,到最亮点。,2,用低倍镜白光观察，调整光源中心，使其位,于整个照明光斑的中央。,3,选择合适的激发光和滤光片。,4,观察。,使用中应注意：末装滤光片不要用眼直接观 察，以免引起眼的损伤；用油镜观察标本时，必须用无荧光的特殊镜头油；,汞灯使用注意事项,汞灯接通电源后需要,10-15,分钟预热，汞才能充分汽化并形成汞弧，产生高亮度而稳定的激发光。,b.,在汞灯使用过程中，不要随意开关汞灯的电源。,c.,关掉汞灯电源后，必须等待,15-20,分钟待汞灯自燃冷却后才可再次接通电源，违反这一操作规定时，将会造成严重后果！（轻则烧断保险丝或烧毁汞灯电源中的扼流圈，重则汞灯爆炸）,d.,汞灯的使用寿命一般只有,300,小时，使用得当可达,600,小时，使用寿命与开关的次数成反比，样品应集中观察。,花粉小孢子,四分体,水溶性苯胺蓝染色液,拟南芥花粉在柱头上的萌发,授粉后,10-30,分钟的拟南芥柱头、水溶性苯胺蓝染色液,