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单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,临床实用病理学技术,江医上饶分院病理教研室,方 义 湖,第一讲 组织切片制作技术常规,（,H-E,染色法,),一、病理标本的接收,二、组织固定,三、取材,四、组织脱水,五、包埋,六、组织石蜡切片,七、常规染色,八、封片,一、病理标本的接收,是,临床与病理科交接的首要环节，程序如下：,1,、核对病理申请单是否与标本匹配,名称、数目、大小、部位、组织来源、临床诊断等,2,、检查标本大小与固定液比例是否合适,4%,的中性甲醛或,10%,的中性福尔马林,小标本：,6-10,倍量,大标本：切开固定,3,、编上病理号，录入电脑存档,二、组织的固定,1,、固定的目的和意义,目的：,保持原有的形态和结构（生理、病理、免疫）,意义：,是制作优秀切片的前提和基础,2,、注意事项：,1,）及时取材 切开固定,2,）及时固定,3,）液量充分,6-10,倍,4,）适度固定,24,小时内,5,）适宜温度,36-38,度,6,）适当搅拌,3,、固定液的选择,1,）单纯固定液：,10%,中性福尔马林，最常用,乙醇固定液：,8095%,，少用，主要用于核酸操作的固定,4%,的多聚甲醛 用于细胞培养,2,）混合固定液：,AF;,Bouin,;,Carnoy,;,Zenker,.,4,、操作方法：,小标本：,610,倍液体量,4,小时,大标本：切开固定,18,小时,三、取 材,1,、概念：,对标本客观描述,+,切成小片装入小盒,2,、取材环境：略,3,、操作过程：,核对、观察与描述（,2.0 x1.5x0.3cm),、,记录、存档或照相,4,、注意事项：略,四、组织脱水,利于透明剂和石蜡的渗入,1,、手工脱水,1,）器械：,大标本缸；浸蜡缸；脱水篮；恒温烤箱,2,）流程：,4%,中性甲醛,3 h,80%,酒精,1 h,90%1 h 95%,过夜 无水酒精,a2 h,无水,酒精,b2 h,二甲苯,-,无水酒精,30,分钟 二甲苯,a30,二甲苯,b1 h,石蜡,a,、,b,、,c(60,度）各,1 h,。,2,、半自动,/,全自,动脱水机,五、包 埋,1,、意义,可以达到一定的硬度和韧度，有利于切片,2,、步骤,熔化石蜡 注入模具 放入组织块 冷冻 待切蜡块,3,、注意事项,1,）镊子要加热,2,）包埋盒内无水及其他异物,3,）蜡温度,58-60,度,4,）注意包埋面及边缘,六、石蜡切片,1,、切片方法：,1,）,平推式石蜡切片；,2,）,旋转式石蜡切片,2,、操作步骤 （略）,3,、注意事项 （略）,七、常规染色（,HE,）,苏木精（,hematoxylin,),和伊红（,eosin),染色方法，简称,HE,染色法。,1,、人工染色法：古老而实用，步骤,30,步（略）,注意事项：,1,）烤片温度：恒温箱,75c,2,）脱蜡要彻底：,3,次二甲苯,3,）苏木精、伊红染液配制准确，要经常过滤,4,）,HCL/,氨水要经常更换,5,）脱水要充分,6,）用中性树胶封片,7,）在通风良好的环境中操作,8,）所有步骤严格按照标准进行,2,、自动染色机染色（略）,八、封 片,1,、手工封片,注意事项（略）,2,、机器封片,1,）机器胶带封片机,2,）机器盖玻片封片机,谢谢大家,
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